詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
LY3023414 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
產品價格:詢價LY3023414有效且選擇性地抑制PI3Kα,PI3Kβ,PI3Kδ,PI3Kγ,mTOR和DNA-PK,IC50分別為6.07nM,77.6nM,38nM,23.8nM,165nM和4.24nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1386874-06-1 純度:99.70% 分子量:406.48 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
Pseudomonas核膜糖蛋白210抗體Human TRIM25 ELISA Kit大鼠褪黑(MT)免疫試劑盒
慶豐鏈霉菌GADD153抗體Human TRIM24 ELISA Kit大鼠突觸體/突觸(Syp/SYN)免疫試劑盒
Rummeliibacillus stabekisiiG蛋白偶聯受體57抗體Human TRIM29 ELISA Kit大鼠突觸蛋白1(Syn1)免疫試劑盒
黑木耳GSK-3結合蛋白FRAT2抗體Human TRIM27 ELISA Kit大鼠透明質1(HYAL1)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌磷化內收蛋白gamma抗體Human DDO(D-aspartate oxidase) ELISA Kit大鼠透明質結合蛋白(HABP)免疫試劑盒
華根霉生長因子受體結合適應蛋白抗體Human TRIM31 ELISA Kit大鼠透明質(HA)免疫試劑盒
金黃色葡萄球菌*GARNL3蛋白抗體Human TRERF1 ELISA Kit大鼠銅藍蛋白(CP)免疫試劑盒
杏鮑菇Tuberin樣蛋白1抗體Human TRIB2 ELISA Kit大鼠同型半胱(Hcy)免疫試劑盒
銅綠假單胞菌(綠膿桿菌)X連鎖Charcot-Marie-Tooth變相關蛋白抗體Human TRIM11 ELISA Kit大鼠鐵蛋白(FE)免疫試劑盒
乳菌計數質控樣品甘酰核苷合成抗體Human SRSF3(Serine/arginine-rich splicing factor 3) ELISA Kit大鼠天門冬基轉移(AST)免疫試劑盒
卷枝毛霉卷枝變型生長休止特定蛋白2抗體Human TRIM15 ELISA Kit大鼠糖原磷化同工MM(GP-MM)免疫試劑盒
棲土曲霉G蛋白γ11/Gγ11 抗體Human TRIM14 ELISA Kit大鼠糖原磷化同工BB(GP-BB)免疫試劑盒
白假絲酵母磷化肌動蛋白結合蛋白Girdin抗體Human TRIM17 ELISA Kit大鼠糖原磷化(GP)免疫試劑盒
芽孢桿菌屬γ-谷酰轉肽7重鏈抗體Human TRIM23 ELISA Kit大鼠糖原合成激3α(GSK3A)免疫試劑盒
炭疽芽胞桿菌生長激2/胎盤特異性生長激抗體Human TRIM2 ELISA Kit大鼠糖原合成激(GSK)免疫試劑盒
拜氏梭菌高爾基體相關蛋白GM130抗體Human TRIM25 ELISA Kit大鼠糖原合成免疫試劑盒
死亡谷芽孢桿菌Bacillus│vallismortis 質量規格:CP木蝴蝶苷A
茯苓Wolfiporia│extensa (Peck) Ginns 質量規格:325(44um)西貝母堿
膠孢刺盤孢Colletotrichum│gloeosporioides 質量規格:1250(11um)黃獨B
PI3K/mTOR/DNA-PK抑制劑(LY3023414)大腸埃希 硫酸卷曲霉谷氨酸脫羧Elisa
癭青霉 Fmoc-N-甲基-L-異亮氨酸休克蛋白70Elisa
膜醭假絲酵母 四金酸銨 水合物谷氨酸脫羧Elisa
香菇 Fmoc-3-(2-萘基)-D-氨酸精氨酸激Elisa
芽孢桿 四金酸鈉 二水合物總蛋白Elisa
白色類諾卡氏 2-基苯酸環磷酸腺苷Elisa
冷桿 (R,R)-DACH-苯基 Trost 配體葡萄糖-6-磷酸脫氫Elisa
棘抱曲霉 六銠(III)酸鄰苯二甲酸二丁酯Elisa
氨桿 4-頻哪酯磷脂酰Elisa
鹽索氏 硫酸鋱(III) 八水合物己糖Elisa
植物乳桿 N-乙酸-3-甲線粒體呼吸鏈復合物IElisa
產氣莢膜梭 C型 Irbesartansirt1去乙酰化Elisa
類布氏乳桿 DL-高瓜氨酸煙酰腺嘌呤二核苷酸Elisa
球孢白僵 四溴鈀酸狀腺原氨酸Elisa
土壤球 溴化鈥(III)甲狀腺Elisa