詳細介紹
商品介紹:
LY2801653是一種II型ATP競爭性的MET酪氨酸激酶抑制劑,Ki為2nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1206799-15-6 別名:Merestinib 純度:99.71% 分子量:552.53 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
產品屬性:
英文名稱:LY2801653
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
新疆鹽地桿菌線粒體脫偶連蛋白2抗體Anti-LIMK2 Antibody神經營養因子4(NT4)
擴展青霉線粒體脫偶連蛋白3抗體Anti-LIMK1 Antibody神經營養因子3(NT3)
丁梭菌UBX結構域域蛋白D2抗體Anti-LIF Antibody(PB0067)神經型一氧化氮合(NOS1)
紅色蠟蘑泛硫酯L3抗體Anti-LMAN1 Antibody神經酰激(CERK)
側孢短芽孢桿菌泛硫酯L1+3抗體Anti-LIN28A Antibody神經纖維網蛋白2(NRP2)
大腸桿菌人狀瘤病E6相關蛋白抗體Anti-LIPC Antibody神經纖維網蛋白1(NRP1)
膠孢泛蛋白連接Q1抗體Anti-LMNB2 Antibody神經纖維2(NF2)
大腸埃希氏菌泛蛋白連接U抗體Anti-LMO1 Antibody神經纖維1(NF1)
嗜假諾卡氏菌泛載體蛋白L6抗體Anti-LMO2 Antibody神經黏附分子(NCAM)
禾谷鐮孢菌*泛激活2H抗體Anti-LONP1 Antibody神經外營養蛋白4(NXPH4)
嗜乳桿菌泛蛋白連接G1抗體Anti-LMTK3 Antibody神經外營養蛋白3(NXPH3)
棒曲霉泛蛋白連接E1抗體Anti-LOC134147/CMBL Antibody神經外營養蛋白2(NXPH2)
枯草芽孢桿菌枯草亞種泛蛋白連接E3抗體Anti-LOC134147/CMBL Antibody神經外營養蛋白1(NXPH1)
Marisediminicola泛蛋白連接2E2抗體Anti-LOX Antibody神經突蛋白1(NRN1)
黃絮鱗鵝膏菌泛蛋白連接D4抗體Anti-LOXL2 Antibody神經調節肽U受體1(NMUR1)
環狀芽胞桿菌泛蛋白連接D3抗體Anti-LOR Antibody神經調節4(NRG4)
SET結合蛋白1抗體熱紫鏈霉菌大鼠腎上皮細胞
電壓門控鈉通道5α抗體巴氏生孢八疊球菌大鼠膀胱平滑肌細胞
沉默調節蛋白5抗體大腸桿菌BS-3234大鼠腎小管上皮細胞
葡萄糖轉運蛋白4增強因子抗體膿腫分枝桿菌大鼠腎足突細胞
MET酪氨酸激酶抑制劑(LY2801653)土曲霉 三氟化甲補體蛋白4Elisa
伯頓畢赤酵母 大豆油腫瘤壞死因子αElisa
大腸埃希 乙酰羥肟酸乙酯白介1βElisa
立枯絲核 三正辛色P4503A4Elisa
Pycnidiophora sp. 檸檬酸三丁酯碳酸酐Elisa
球孢白僵 氨基比林1,6-二磷酸果糖Elisa
大腸埃希氏 亞磷酸二乙酯17β羥類固脫氫Elisa
褐孢大禿馬勃 1-磷酸鞘氨Elisa
假單胞屬 凡士林3β羥類固脫氫Elisa
濃香乳菇 三氧化二5核苷酸Elisa
新鞘氨 碳化6-磷酸葡萄糖酸脫氫Elisa
枯草芽孢桿 海砂7-乙氧基-3-異吩惡唑酮-脫乙基Elisa
葡萄座腔屬 丁二酸酐核酸氧化8-羥基脫氧鳥苷Elisa
釀酒酵母 吩噻ATPElisa
木糖氧化無色桿 土耳其紅油I型膠原蛋白Elisa