詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Metyrapone | 1mL(10mM)|500mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
Metyrapone抑制P450介導的ω/ω-1羥化酶活性和CYP11B1. 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:54-36-4 別名:Su-4885 純度:98.0% 分子式:C??H??N?O 分子量:226.27 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
乳乳球菌乳亞種蛋白激GCN2蛋白抗體Human USP38 ELISA Kit大鼠轉錄因子P65(RELA)免疫試劑盒
地衣芽孢桿菌G蛋白偶聯受體GPR78蛋白抗體Human USP39(Inactive ubiquitin-specific peptidase 39) ELISA Kit大鼠轉甲狀腺蛋白(TTR)免疫試劑盒
巨型艾美耳球蟲G蛋白激活內流通道蛋白2抗體Human USP44 ELISA Kit大鼠轉化生長因子β激蛋白22(TSC22)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌生長因子受體結合蛋白10抗體Human USP45 ELISA Kit大鼠轉化生長因子β3(TGF-β3)免疫試劑盒
雞油菌磷化生長因子受體結合蛋白10抗體Human USP42 ELISA Kit大鼠轉化生長因子β2受體(TGF-β2R)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌磷化糖原合激3β抗體Human USP25 ELISA Kit大鼠轉化生長因子β2(TGF-β2)免疫試劑盒
孔雀石綠鏈霉菌磷化蛋白激GCN2蛋白抗體Human USP24 ELISA Kit大鼠轉化生長因子β1受體(TGF-β1R)免疫試劑盒
鐮孢屬磷化蛋白激GCN2蛋白抗體Human USP28 ELISA Kit大鼠轉化生長因子β1(TGF-β1)免疫試劑盒
教酒色鏈霉菌磷化接頭蛋白Gab 1抗體Human USP3 ELISA Kit大鼠轉化生長因子α(TGF-α)免疫試劑盒
茶色粘傘菌磷化接頭蛋白Gab 1抗體Human USP32 ELISA Kit大鼠晝夜節律蛋白同源物2(PER2)免疫試劑盒
Bacillus weihenstephanensis磷化葡萄糖合成1抗體Human USP33(Ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase 33) ELISA Kit大鼠周脂(Plin1/Peri/Plin)免疫試劑盒
蠟狀芽孢桿菌GCNT1葡萄糖轉移抗體Human SERPINB5(Serpin B5) ELISA Kit大鼠周期依賴性激5(CDK5)免疫試劑盒
谷棒桿菌胰島樣生長因子1受體相互作用蛋白1抗體Human USP38 ELISA Kit大鼠腫瘤轉移抑制基因KISS1蛋白(KISS1/Kisspeptin 1)免疫試劑盒
中國臺灣根霉鳥苷環化α1/GCS-α-1抗體Human USF1 ELISA Kit大鼠腫瘤特異生長因子(TSGF)免疫試劑盒
鐘器腐霉G蛋白偶聯受體125抗體Human USP2 ELISA Kit大鼠腫瘤壞死因子誘導蛋白6(TSG-6)免疫試劑盒
熱脂環芽胞桿菌G蛋白偶聯受體84抗體Human USF2 ELISA Kit大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體受體4(TRAIL-R4)免疫試劑盒
: JCM20040=ATCC9046資源名稱: 棕色固氮菌 質量規格:用于GC衍生化,≥98.5%高烏
香魚假單胞菌Pseudomonas│plecoglossicida 質量規格:0.98長春新堿
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質量規格:800目硫長春新堿
ω/ω-1羥化酶和CYP11B1抑制劑(Metyrapone)15-羥基松香(標準品)英文名稱: Sulfamethoxypyridazine早期B因子2抗體包裝5g
16α-Hydroxytrametenolic aci...英文名稱: TCEP; hydrochlorideELAVL2蛋白抗體包裝25g
16α-羥基松苓新英文名稱: Sodium thiosulfate, pentahydrateELAVL2+ELAVL4蛋白抗體包裝5g
17-Hydroxy sprengerinin C英文名稱: Sodium iodide同源盒蛋白轉錄因子EN1抗體包裝25mg
2''-O-p-反式香豆酰基葒草苷英文名稱: Starch soluble轉錄因子ER81蛋白抗體包裝5mg
2''-O-p-香豆酰基牡荊英文名稱: Lithium acetate dihydrate谷受體KA1抗體包裝1g
2''-O-鼠李糖基羊藿次苷II英文名稱: Ficol 400真核翻譯起始因子3K抗體包裝250mg
2'-O-基苦參英文名稱: 3,5-Dinitrosalicylic acid早期生長反應蛋白3抗體包裝250mg
2,3,5,4-四羥基二乙烯葡萄糖苷,二乙烯苷英文名稱: Sodium malonateEMSY蛋白抗體包裝1g
2,3,5,4-四羥基二乙烯葡萄糖苷,二乙烯苷(標...英文名稱: Sodium phosphate, monobasic, dihydrateFBXO36 F-box蛋白相關蛋白36抗體包裝25g
2,3-脫氫維英文名稱: MalonateCAST1蛋白抗體包裝5g
2,5,9-三羥基-4-氧基-9,10-二氫菲英文名稱: Manganese (II) chloride, tetrahydrateRAB6蛋白抗體包裝1g
20(21)-脫氫赤芝A英文名稱: Casein皮卡丘抗體包裝5g
20(S)-原人參三(標準品)英文名稱: VaselineELAVL4蛋白抗體包裝100g
21-O-順芷酰基匙羹藤新苷元英文名稱: Sodium orthovanadate表皮生長因子樣受體1包裝25g