詳細介紹
商品介紹:
nMS-873是一種有效的,選擇性的VCP/p97抑制劑,在1mM ATP條件下,IC50值為20nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1418013-75-8 純度:99.93% 分子量:520.67 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
NMS-873 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
紫紅曲霉巨噬調控相關蛋白LRRFIP1抗體Human PDS5A ELISA Kit天青殺(AZU)
貝倫格葡萄座腔菌梨生專化型促黃體生成抗體Human PDS5B ELISA Kit天門冬酰-tRNA合成(DARS)
紫芝整合和生長因子樣蛋白1抗體Human PDSS2 ELISA Kit天門冬轉/谷草轉(GOT/GPT)
微小桿菌相似腫瘤抑制基因HUGL抗體Human PDE6A ELISA Kit天門冬基轉移(AST)
植物乳桿菌LAMTOR1蛋白抗體Human PDXDC1 ELISA Kit特異性巨噬武裝因子(SMAF)
齊藤土星形酵母LIM結構域結合蛋白3抗體Human PDE6B ELISA Kit套膜蛋白(iNV)
彩色豆馬勃ILK結合蛋白LIMS2抗體Human PDCD5 ELISA Kit糖脂抗體(glycolipid)
茄勞爾氏菌淋巴特異性接頭蛋白抗體Human PXDN(Peroxidasin homolog) ELISA Kit糖原磷化同工MM(GP-MM)
凍膠假絲酵母表面免疫球蛋白樣轉錄因子4抗體Human PDCD6 ELISA Kit糖原磷化同工II(GP-II)
球孢白僵菌淋巴抗原6重復位點蛋白G6F抗體Human PDCD7 ELISA Kit糖原磷化同工BB(GP-BB)
樁蛋白抗體Human PDCD6IP ELISA Kit糖原磷化(GP)
雞葡萄球菌脂蛋白受體相關蛋白/低密度脂蛋白相關蛋白的相關蛋白1抗體Human PDCL2 ELISA Kit糖原合成激3(GSK-3)
大肥菇皮屑樣蛋白2抗體Human PDCL ELISA Kit糖原合成激(GSK)
慢生根瘤菌層粘蛋白α3抗體Human PDCD10 ELISA Kit糖缺失性轉鐵蛋白(CDT)
球孢白僵菌溶體相關膜蛋白1抗體Human PCNP ELISA Kit糖皮質激受體β(GR-β)
解淀粉鹽盒菌羧肽抑制劑抗體Human PDCD2(Programmed cell death protein 2) ELISA Kit糖皮質激受體α(GR-α)
巨大芽孢桿菌Bacillus│megaterium 質量規格:>98.0%(HPLC)(N)擬人參皂苷RT5
黑曲霉Aspergillus│niger 質量規格:>98.0%(HPLC)人參皂苷Rf
小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質量規格:>85.0%(HPLC)人參皂苷Rd
VCP/p97抑制劑(NMS-873)蟲草 2-甲氧基苯甲短鏈脂肪酸Elisa
惡臭假單胞 4-(反-4-戊基環己基)苯甲病性出血性敗血癥病Elisa
粘質沙雷氏 4,4'-二羥基二苯甲酮活性氮簇Elisa
頂頭孢霉 4,4'-二氨基二苯甲酮白介1αElisa
白絨紅蛋巢 4,4'-二甲基二苯甲酮白三烯B4Elisa
焦曲霉 基(2-甲基-3-呋喃基)二硫球蛋白DElisa
總狀共頭霉 苯甲酰甲酸過氧化氫Elisa
耐輻射奇球 5-氨基喹啉過氧化物Elisa
散囊 2-基乳酸脫氫Elisa
煙曲霉 2,4-二甲酸谷轉氨Elisa
釀酒酵母 2-甲酯谷草轉氨Elisa
光滑青霉 2-溴甲酯甲狀腺過氧化物Elisa
茯苓 3-硝基-4-氨基N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷Elisa
嗜麥芽寡養單胞 4--2-氟性磷酸Elisa
魯氏毛霉 三氟甲磺酸鎂谷氨酸草酰乙酸轉氨Elisa