商品介紹:
用途: 用于紅細(xì)胞計(jì)數(shù) 注意事項(xiàng): 由檸檬酸鈉,等組成。 儲(chǔ)存條件:室溫,12個(gè)月 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Dacie氏液
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:100ml
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
辛夷(望春花)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Glutamic acid 5-methyl ester鐵調(diào)節(jié)蛋白25抗體包裝100g
辛夷脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: N-Acetyl-L-leucineHD域內(nèi)含蛋白2抗體包裝25g
新補(bǔ)骨脂異黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Orn(Z)-OH艾滋病病p55抗體包裝5g
新橙皮苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: N-Acetyl-L-phenylalanine造血激抗體包裝1g
新橙皮苷二氫查爾(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-ProlinamideHEAT重復(fù)內(nèi)含蛋白5B蛋白抗體包裝25g
新穿心蓮內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: N-6-Trifluoroacetyl-L-lysine缺氧誘導(dǎo)基因1B蛋白抗體包裝5g
新地奧斯明英文名稱: O-Benzyl-L-serine乙酰化組蛋白H4抗體包裝1g
新綠原(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: O-tert-Butyl-L-serine 熱休克蛋白B2抗體包裝5g
新芒果苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: CAL-101 (GS-1101)人類白抗原B27包裝25MG
新藤黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: O-tert-Butyl-L-threonine螺旋環(huán)螺旋轉(zhuǎn)錄因子HATH6抗體包裝25g
新烏頭原堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-dopa,Levodopa神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1β2抗體包裝5g
杏葉防風(fēng)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-dopaHDHD3蛋白抗體包裝1g
雄蠶蛾(家蠶)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-a-Aminoadipic acidHEATR3蛋白抗體包裝5g
熊膽粉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Cyclopropylalanine癌增強(qiáng)蛋白抗體包裝1g
熊果苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Homophenylalanine單基組蛋白H3K9抗體包裝25g
庫(kù)爾勒海洋桿菌Pontibacter│korlensis 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)突變基因試劑盒蘆丁;Rutin
雞白痢沙門氏菌Salmonella│pullorum 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR麻疹病試劑盒克班寧;Crebanine
芽孢桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品麻疹病試劑盒苦龍膽酯苷;aMarogentin
Dacie氏液馬克斯克魯維酵母 己烯雌酚絲氨酸棕櫚酰轉(zhuǎn)移長(zhǎng)鏈堿性亞基1Elisa
鞘氨盒屬 2-氟-3-硝基-5-氯吡啶冠蛋白1AElisa
產(chǎn)氣腸桿 加巴噴丁球蛋白κElisa
假單胞屬 4-溴-3-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑?yàn)V泡型轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1Elisa
馬闊里類芽孢桿 二乙基異基萊姆病Elisa
球孢白僵 3-氯酸甲酯抗單核抗體Elisa
枯草芽孢桿 2-甲基丁酸π--S-轉(zhuǎn)移Elisa
球孢鏈霉 2,3-二天冬酰合成Elisa
平菇 甘氨酸鹽酸鹽肌苷酸Elisa
玫煙色棒束孢 新戊酰基乙鳥苷一磷酸Elisa
腐皮殼 3,3'-二氨基二苯砜脂肪酸轉(zhuǎn)位Elisa
熱帶假絲酵母 3-溴-2-氟甲苯人白介2受體α亞基Elisa
大西洋魯杰氏 D-氫化乳清酸延胡索酸水合Elisa
滑菇 甘氨膽酸水合物1,4,5-三磷酸肌Elisa
缺陷短波單胞 L-氫化乳清酸核酮糖-1,5-二磷酸羧化;加氧Elisa