以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
IDO1抑制劑(IDO5L) | IDO5L | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg | 1~3天 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
IDO-IN-2是一種有效的IDO1抑制劑,作用于Hela細(xì)胞,IC50為19nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):914471-09-3 純度:99.29% 分子量:271.64 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
紅曲霉UBXN2B蛋白抗體Anti-LAMP1 Antibody生長激促分泌受體(GHSR)
疣孢馬杜拉放線菌上調(diào)基因4抗體(N端)Anti-LASP1 Antibody生長激2(GH2)
米根霉泛蛋白抗體Anti-LAT Antibody生長關(guān)聯(lián)蛋白43(GAP43)
洋蔥曲霉泛特異性蛋白28抗體Anti-LAYN Antibody生長分化因子9(GDF9)
節(jié)桿菌尿激型纖溶原激活因子抗體Anti-LATS1 Antibody生長分化因子5(GDF5)
翹鱗傘尿鹽重吸收轉(zhuǎn)運(yùn)子1抗體Anti-LAT2 Antibody生長分化因子3(GDF3)
熱帶假絲酵母14號(hào)染色體開放閱讀框130抗體Anti-LBP Antibody生長分化因子11(GDF11)
棒桿菌屬去泛化3抗體Anti-LBR Antibody生長分化因子1(GDF1)
巴西果小克銀漢霉突觸囊泡融合蛋白Unc18-3抗體Anti-LBP Antibody生物酰(BTD)
片球菌屬泛蛋白連接E3α2抗體Anti-LCAT Antibody生精蛋白Ⅱ(SEMG2)
水管致黑棲熱菌腫瘤抑制基因UVRAG抗體Anti-LCAT Antibody生精蛋白Ⅰ(SEMG1)
爪哇青霉泛結(jié)合UFC1抗體Anti-LBP Antibody生肌因子6(MYF6)
紫色紅曲泛結(jié)合E2J1抗體Anti-LCAT Antibody生肌因子5(MYF5)
大腸埃希氏菌輔色C還原核心蛋白1抗體Anti-LCN1 Antibody滲透性糖蛋白(Pgp)
釀酒酵母核蛋白95抗體Anti-LCN2 Antibody滲出性玻璃體視網(wǎng)膜病變基因2(EVR2)
芽孢八疊球菌屬泛結(jié)合E2變異體1抗體Anti-LCK Antibody腎足蛋白(NPHN)
新型血小板相關(guān)血管內(nèi)皮分泌蛋白SCUBE1抗體淋病奈瑟菌大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞
應(yīng)激誘導(dǎo)分泌蛋白1抗體層出鐮刀菌(斜面)大鼠腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞
抗腫瘤蛋白ANUP抗體淡紫色擬青霉(斜面)大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
琥珀亞基B560抗體層出鐮刀菌大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
IDO1抑制劑(IDO5L)膜醭畢赤酵母 鋁、砷、、鋇、鈹、鉍、鈣、鎘、鈷、鉻、銫、銅、鐵、汞、、鋰、鎂、錳、鈉、鎳、鉛、銣、硒、鋅、釩/低氧誘導(dǎo)因子-1αElisa
硬皮地星 鋁、砷、、鋇、鈹、鉍、鈣、鎘、鈷、鉻、銅、鐵、、鋰、鎂、錳、鉬、鈉、鎳、鉛、銻、硒、鍶、鈦、、α干擾Elisa
蠟蚧 鋁、砷、鋇、鈹、鉍、鈣、鈰、鎘、鈷、鉻、銅、鐵、鎵、汞、銦、、鋰、鎂、錳、鈉、鎳、鉛、釕、硒、鍶、S轉(zhuǎn)移Elisa
白色短波單胞 鋁、砷、、鋇、鉍、鈣、鎘、鈷、鉻、銅、鐵、鎵、汞、銦、、鎂、錳、鉬、鈉、鎳、鉛、銻、鈧、硒、鍶、尿苷二磷酸葡萄糖酸轉(zhuǎn)移Elisa
楊盤二孢(都不提供) 鋁、砷、、鋇、鈹、鉍、鈣、鎘、鈷、鉻、銅、鐵、鎵、鍺、汞、、鋰、鎂、錳、鉬、鎳、磷、鉛、鉑、銣、磺基轉(zhuǎn)移Elisa
pBudCE4.1 氨酸甲酯紅霉-N-脫甲基Elisa
大腸埃希氏 砷、鉍、鎵、鍺、銦、鉛、銻、硒、錫,碲、/As, Bi, Ga, Ge, In, Pb, Sb,苯-4羥化Elisa
枯草芽孢桿 鋇、鈹、鈰、鈷、銦、鋰、鎂、鉛、銠、、釔/Ba, Be, Ce, Co, In, Li, Mg,氨基吡啉-N-脫甲基Elisa
蠟狀芽孢桿 鉍、鍺、銦、镥、銠、鈧、鋱、釔/Bi, Ge, In, Lu, Rh, Sc, Tb, Y白斑癥病雙抗體夾心Elisa
高盧蜜環(huán)(可訂購) 鈧、銫、銦、銠/Sc, Cs, In, Rh磷脂酰Elisa
靈芝 鉍、鍺、銦、銠、鈧、鋱、釔/Bi, Ge, In, Rh, Sc, Tb, Y磷脂酰絲氨酸Elisa
海芋平臍蠕孢 砷、鈹、鎘、鉻、鎳、鉛、硒、/As, Be, Cd, Cr, Ni, Pb, Se, Tl游離脂肪酸Elisa
大毛霉 鋰、鈉、、銨、鎂、鈣、鍶、鋇/Li, Na, K, NH4+, Mg, Ca, Sr, BaGTPElisa
熱帶靈芝 氟、、溴、硝酸根、硫酸根/F-, Cl-, Br-, NO3-, SO42-P糖蛋白;滲透性糖蛋白Elisa
腫囊腐霉 鑭、鈰、鐠、釹、釤、銪、釓、鋱、鏑、鈥、鉺、銩、鐿、镥、釔/La, Ce, Pr, Nd, Sm,維生CElisa