EB染色液公司*的產(chǎn)品：Phospho-PPIG (Ser376) 化親環(huán)蛋白（親環(huán)）PPIG抗體芐酯 96%
PKB/Akt1 蛋白激B4-異酯 98%
phospho-AKT/PKB (Ser473) 化蛋白激B抗體環(huán)己異酯 98%
phospho-Akt(Thr308) 化蛋白激B抗體綠麥隆 分析標(biāo)準(zhǔn)品
phospho-Akt (Thr450) 化蛋白激B抗體綠麥隆標(biāo)準(zhǔn)溶液

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：EB染色液

英文名稱：

產(chǎn)品規(guī)格：100T

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

地膚子皂苷Ic（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Copper(II) oxalate hydrate卷曲蛋白FZD7抗體包裝25g

(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Copper(II) sulfate, anhydrous口蹄疫病A型抗體包裝500g

地骨皮（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Creatinine磷化粘著斑激抗體包裝1g

地瓜藤（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Crocein scarlet 7B人纖維蛋白原抗體包裝5g

地黃（生地黃）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Crystal ponceau 6R鋅指蛋白798抗體包裝25g

地錦草(斑地錦)（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Cyclocytidine肽基脯酰順?lè)串悩?gòu)FKBP10抗體包裝5g

地錦草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Cytidine-5'-triphosphate (CTP), 3sodium肽基脯酰順?lè)串悩?gòu)FKBP11抗體包裝250g

地龍（參環(huán)毛蚓）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Cytochalasin AFKBP135蛋白抗體包裝50g

地稔（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Cytochalasin C肽基脯異構(gòu)FKBP25抗體包裝1g

地蜈蚣（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Cytochalasin D肽基脯異構(gòu)FKBP8抗體包裝250mg

地榆(地榆)（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Cytochalasin E磷化叉頭蛋白L2抗體包裝100g

地榆皂苷II（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： D-(+)-Camphoric acid叉頭蛋白N2抗體包裝25g

地榆皂苷I（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： D-(+)DBTA, Dibenzoyl-D-tartaric acid, monohydrate磷化叉頭蛋白家族1抗體包裝50MG

滇藏五味子G英文名稱： DATD, (+)-N,N'-Diallyltartramide磷化叉頭蛋白家族1抗體包裝1g

滇桂艾納香（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： DDSA, dodecenylsuccinic anhydrous旋轉(zhuǎn)異構(gòu)FKBP6抗體包裝250mg

巴氏醋桿菌Acetobacter│pasteurianus 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR神經(jīng)母瘤抗體試劑盒千金子甾;Euphobiasteroi

球孢白僵菌Beauveria│bassiana (Bals.-Criv.) Vuill. 質(zhì)量規(guī)格：UV法含量測(cè)定神經(jīng)節(jié)苷脂試劑盒氫化原阿片堿;Hydroprotopin

鮑氏志賀菌Shigella│boydii 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR神經(jīng)節(jié)苷脂試劑盒7-羥基-5,8-二氧基黃烷;7-H
EB染色液大腸埃希氏 度骨化化高鐵血紅蛋白Elisa

黑曲霉 Tofacitinib (CP-690550) Citrate瓜氨酸化組蛋白H3Elisa

谷氨酸棒桿 CP-724714轉(zhuǎn)錄因子活化蛋白2CElisa

*百脈根根瘤 Raltegravir (MK-0518)Janus激3Elisa

托湖萊茵海默氏 Apixaban溶質(zhì)載體家族3成員2Elisa

黑曲霉 PNU-120596熱休克蛋白90βElisa

側(cè)孢短芽孢桿 Cyclophosphamide酸Elisa

長(zhǎng)枝木霉 Scopine腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6Elisa

棱柱散尾 EX 527 (Selisistat)骨架關(guān)聯(lián)蛋白4Elisa

枯草芽胞桿 EltrombopagB因子Elisa

糞腸球 NifuraH因子Elisa

不動(dòng)桿屬 Purmorphamine間粘附分子2Elisa

枯草芽孢桿 EdoxabanCereblon蛋白Elisa

巨大芽胞桿 Salmon Calcitonin Acetate絲氨酸；蘇氨酸蛋白激4Elisa

根瘤 R-1479肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)