詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
英文名稱:PFI-2 hydrochloride
產品規格:1mL(10mM)|10mg|50mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
PFI-2鹽酸鹽是甲基轉移酶SETD7高效選擇性抑制劑,IC50值為2nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1627607-87-7 別名:(R)-PFI-2 hydrochloride 純度:98.60% 分子量:535.98 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
華盛頓腥擲孢菌血小板衍化生長因子γ抗體Anti-AK2 Antibody(PB1089)存活抗體/生存蛋白(Surv)
運動發酵單孢菌(現1)血小板47蛋白抗體Anti-AKAP12 Antibody脆性組三聯體(FHIT)
虎掌菌*相關血漿蛋白A2抗體Anti-AK1 Antibody催乳誘導蛋白(PIP)
水鹽單胞菌屬血漿谷羧肽抗體Anti-AKR1C1/C2 Antibody催乳抑制激(PIH)
殼菌磷化腫瘤抑制基因P53抗體Anti-AKR1B10 Antibody催乳釋放激(PRH)
弗吉尼亞鏈霉菌撲克蒙蛋白抗體Anti-AKR1B1 Antibody催乳(PRL)
粟酒裂殖酵母癌易感基因相關蛋白2Anti-AKR1D1 Antibody催產受體(OXTR)
多主葡萄殼菌細小清蛋白抗體Anti-AKR1D1 Antibody催產(OT)
灰葡萄孢(灰霉病菌)脂酰肌聚糖A抗體Anti-AKT1 Antibody促有絲分裂因子(MF/MPF)
Havobacterium原鈣粘蛋白11抗體Anti-AKR7A2 Antibody促胰液/胰泌(Secretin)
綠色木霉P選擇糖蛋白配體1抗體Anti-AKT2 Antibody(PB0006)促胰液/分泌受體(SR)
秸稈色假單胞菌蛋白激N2抗體Anti-AKT2 Antibody促胰液(secretin)
黃白側耳G蛋白偶合受體激2抗體Anti-Alas1 Antibody促性腺激釋放激(GnRH)
釀酒酵母早期發育調控蛋白2抗體Anti-ALDH1A1 Antibody促酰化蛋白(ASP)
克魯弗酵母磷酯Cβ3Anti-ALCAM Antibody促胃液受體(GsaR)
污黑腐皮殼血小板源性生長因子A抗體Anti-ALDH18A1 Antibody促睡眠肽(DSIP)
無害李斯特菌Listeria│innocua 質量規格:>99%,BR
乳桿菌屬Lactobacillus│sp. 質量規格:HPLC≥98%,標準品
斯魯菲亞紅酵母Rhodotorula│slooffiae 質量規格:>98%,BR
甲基轉移酶SETD7抑制劑(PFI-2鹽酸鹽)地衣芽孢桿 三(2-噻吩基)膦胱抑Elisa
球孢白僵 煌綠乳糖膽鹽肉湯BGLB(含小倒管)骨蛋白Elisa
檸檬色節桿 煌綠乳糖膽鹽肉湯BGLB(含小倒管)輪狀病抗體Elisa
滑假絲酵母 EC肉湯(含小倒管)仙臺病抗體Elisa
釀酒酵母 N-(2-氨乙基)甘氨酸印度猬因子Elisa
納什維爾鏈霉 LST-MUG信號3AElisa
雜色曲霉 LST發酵管(含小倒管)圓環病2型Elisa
耐寒短桿 三糖鐵管蛋白聚糖Elisa
羊肚 改良EC(mEC+n)肉湯白介5Elisa
綠色木霉 2-叔丁基對甲酚I型膠原蛋白Elisa
牛絲膜 改良EC(mEC+n)肉湯總膠原Elisa
辣椒溶桿 磷酸鹽緩沖液(PBSpH7.2)白介21Elisa
鏈格孢 營養瓊脂(水質監測)白介20 Elisa
溜曲霉 異硫基乙酸乙酯白介22Elisa
*灰葡萄孢 D-環絲氨酸溶液AKT蛋白Elisa