詳細介紹
商品介紹:
CHIR-98014是一種有效的,細胞通透的GSK-3抑制劑,可抑制GSK-3α和GSK-3β的活性,IC50值分別為0.65和0.58nM;CHIR-98014對cdc2和erk2的作用較弱。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:252935-94-7 純度:98.0% 分子式:C??H??Cl?N?O? 分子量:486.31 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
CHIR-98014 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
蕈狀芽孢桿菌胰高血糖樣肽-1抗體Human Syntaxin 6 ELISA Kit大鼠基質金屬蛋白7(MMP-7)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌顆粒蛋白前體抗體Human TADA2B ELISA Kit大鼠基質金屬蛋白5(MMP-5)免疫試劑盒
硬結節桿菌磷脂酰基蛋白聚糖1抗體Human STX1A(Syntaxin-1A) ELISA Kit大鼠基質金屬蛋白4(MMP-4)免疫試劑盒
鞘菌糖原合激3α抗體Human TADA2L ELISA Kit大鼠基質金屬蛋白3(MMP-3)免疫試劑盒
*灰葡萄孢慶大霉單克抗體Human TADA3L ELISA Kit大鼠基質金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)免疫試劑盒
糞腸球菌谷胱甘肽硫轉移ω1抗體Human TAF1L ELISA Kit大鼠基質金屬蛋白14(MMP-14)免疫試劑盒
毛霉屬間隙連接蛋白31抗體Human TAF1 ELISA Kit大鼠基質金屬蛋白13(MMP-13)免疫試劑盒
弓形蟲(GJS-3株)甘-N-甲基轉移Human TAF3 ELISA Kit大鼠基質金屬蛋白10(MMP-10)免疫試劑盒
北京擲孢酵母G蛋白偶聯受體75抗體Human TAF7 ELISA Kit大鼠基質金屬蛋白1(MMP-1/Collagenase I)免疫試劑盒
蓋替隱球酵母GATA結合蛋白4抗體Human TAF6L ELISA Kit大鼠肌質網膜鈣ATP(SERCA)免疫試劑盒
淺灰小雙孢菌兔抗γ1基丁抗體Human TAF5L ELISA Kit大鼠肌激同工MM(CK-MM)免疫試劑盒
廣西腐霉G蛋白偶聯受體GPR85蛋白抗體Human DNASE1(Deoxyribonuclease-1) ELISA Kit大鼠肌激同工MB(CK-MB)免疫試劑盒
黑曲霉慶大霉抗體Human TAF9(Transcription initiation factor TFIID subunit 9) ELISA Kit大鼠肌激同工BB(CK-BB)免疫試劑盒
空腸彎曲桿菌半乳糖凝集9抗體Human TAF9B ELISA Kit大鼠肌球蛋白(MYS)免疫試劑盒
緣毛殼促代謝型谷受體2+4抗體Human Syntaxin 10 ELISA Kit大鼠肌紅蛋白(MYO/MB)免疫試劑盒
鞘桿菌GPNMB抗體Human STX1A(Syntaxin-1A) ELISA Kit大鼠肌酐(Cr)免疫試劑盒
小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質量規格:分析標準品,99%黃杞苷
天麻萌發菌Mycena│sp. 質量規格:分析標準品,≥99.5%(GC)晶蘭苷
豬呼吸與繁殖障礙綜合征病毒Arterivirus│Porcine respiratory and reproductive syndrome virus 質量規格:分析標準品8-O-乙酰山梔苷酯
GSK-3抑制劑(CHIR-98014)A2AR 腺苷A2A受體抗體氨胍碳氫鹽 分析標準品
AACT-Alpha1 α-1抗胰糜蛋白抗體順式-烏頭 98%
AAK1 AP2關聯激1抗體N-(4-氨酰)-L-谷氨 97%
AARS2 氨酰tRNA合成2抗體花生四烯 ≥99.0% (GC)
AAT α-1抗胰蛋白抗體腺苷-5'- from yeast, ≥97%
AATK AATK凋亡關聯酪氨激抗體對氨苯胂 分析標準品
AATF 拮抗凋亡轉錄因子抗體4-氨聯苯 AR
ABCA1 腺苷三結合盒轉運體A1抗體4-氨聯苯 分析標準品