詳細介紹
商品介紹:
VER-155008是Hsc70/Hsp70新型小分子抑制劑,對HCT116細胞GI50值為5uM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1134156-31-2 純度:98.83% 分子量:556.4 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
VER-155008 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
木賊鐮孢菌P-鈣粘附分子抗體Anti-AHR Antibody單核增多性李斯特菌O((LLO)
淺灰白鏈霉菌腺苷環化激活肽-38抗體Anti-AHSA1 Antibody單核趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)
假單胞菌屬腫瘤抑制基因P53蛋白抗體(野生型P53)Anti-AHR Antibody單核趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)
釀酒酵母腫瘤抑制基因p63α抗體Anti-AIF1 Antibody單核趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)
玉米大斑病菌磷二酯4A8抗體Anti-AHSG Antibody單核趨化蛋白2(MCP-2)
薄花邊傘血小板源性生長因子AB+BB抗體Anti-AHSG Antibody單核趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)
東方伊薩酵母增殖核抗原抗體Anti-AHSG Antibody單核趨化蛋白1(MCP-1)
棲熱菌腦特異性多肽蛋白19抗體Anti-AICDA Antibody單氧化(MAO)
金龜子綠僵菌三磷腺苷門控陽離子通道蛋白抗體Anti-AIFM1 Antibody帶3蛋白(Band3)
枯草芽孢桿菌硫氧還蛋白過氧化物Ⅱ/巰基抗氧化蛋白抗體Anti-AIFM1 Antibody大皰性類天皰瘡抗體(BP)
鴨肝炎病p53凋亡相關作用蛋白PMP22抗體Anti-AIFM1 Antibody(PB0388)大內皮(Big ET-1)
交鏈孢磷核糖咪唑羧化抗體Anti-AIMP2 Antibody大內皮(Big ET)
*無色桿菌神經生長因子受體抗體Anti-AIM2 Antibody(PB0721)大腸菌(colicin)
果生鏈核盤菌腫瘤錯配修復基因PMS1抗體Anti-AIP Antibody大腸癌專一抗原4(CCSA-4)
貝氏葡萄座腔菌腺苷單磷活化蛋白激γ2抗體Anti-AIRE Antibody大腸癌專一抗原3(CCSA-3)
焦曲霉血小板衍化生長因子β抗體Anti-AKAP2 Antibody大腸癌專一抗原2(CCSA-2)
細極鏈格孢Alternaria│tenuissima (Kunze) Wiltshire 質量規格:>99%
病毒Influenzavirus A│Avian influenza virus 質量規格:>99%,BR
致病性大腸埃希菌Escherichia│coli 質量規格:>99%
Hsc70/Hsp70新型小分子抑制劑(VER-155008)野油菜黃單胞(甘藍黑腐病黃單胞,野油菜桿) 3,3'4,4'-二苯甲酮四羧酸二酐Dickkopf 1Elisa
香菇 改良磷酸鹽緩沖液(PSB)4E結合蛋白1Elisa
亞洲盤孢 改良磷酸鹽緩沖液(PSB)可溶性血管黏附因子Elisa
孟氏假單胞 FB2增液CXC趨化因子配體2Elisa
彩色豆馬勃 李氏增肉湯LB2基質衍生因子1Elisa
雜色曲霉 改良月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯-萬古霉瘟抗體Elisa
色褐鏈霉 3,3',4,4'-聯苯四甲酸二酐前列腺EElisa
梭 M肉湯血脂Elisa
Enterobacter SBG增液晚期氧化蛋白產物Elisa
枯草芽胞桿 鹽胱氨酸增液(SC)硬骨Elisa
普通變形桿* N(e)-Boc-L-賴氨酸I型膠原羥基端肽α降解產物Elisa
不等彎孢 RV肉湯內皮特異性分子Elisa
大腸埃希氏 雙料乳糖蛋白胨培養液(含小倒管)骨髓觸發受體-1Elisa
短小芽孢桿 乳糖蛋白胨培養液(含小倒管)心肌肌鈣蛋白Elisa
腐皮殼 單料乳糖膽鹽發酵培養基管(含小倒管)環氧合1Elisa