以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
多激酶抑制劑(Sorafenib) | Sorafenib | 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|500mg | 1~3天 |
商品介紹:
英文名稱:Sorafenib 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|500mg Sorafenib是一種有效的多激酶抑制劑,抑制Raf-1,B-Raf和VEGFR-3,IC50分別為6nM,20nM和22nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:284461-73-0 別名:Bay 43-9006 純度:99.83% 分子量:464.83 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
釀酒酵母鈣粘附分子10抗體Human calprotectin ELISA Kit人胸腺表達(dá)趨化因子(TECK/CCL25)免疫試劑盒
黃赭色鏈霉菌R Cadherin/CDH4Human Thrombin ELISA Kit人胸腎表達(dá)趨化因子(BRAK/CXCL14)免疫試劑盒
釀酒酵母大鼠細(xì)小病H-1株(H-1)抗體Human LPS IgG(lipopolysaccharide IgG) ELISA Kit人胸苷合成(TS)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌22號染色體開放閱讀框9抗體Human SCRG1(Scrapie responsive protein 1) ELISA Kit人性激結(jié)合球蛋白(SHBG)免疫試劑盒
微小桿菌腫瘤高表達(dá)周期相關(guān)蛋白抗體Human HGS(Hepatocyte growth factor-regulated tyrosine kinase substRate) ELISA Kit人性別決定區(qū)Y蛋白(SRY)免疫試劑盒
釀酒酵母9號染色體開放閱讀框117抗體Human AP12(Apelin 12) ELISA Kit人信號識別顆??贵w(SRP)免疫試劑盒
蟻巢傘屬6號染色體開放閱讀框120抗體Human calprotectin ELISA Kit人信號傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子6(STAT6)免疫試劑盒
金灰青霉補(bǔ)體C1qα鏈多肽抗體Human ACCPA(anti-cyclic citrullinated peptide antibody) ELISA Kit人信號傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子5(STAT5)免疫試劑盒
露濕漆斑菌補(bǔ)體C1qγ鏈多肽抗體Human Thrombin ELISA Kit人信號傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子4(STAT4)免疫試劑盒
根瘤菌鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性絲蛋白激抗體Human LPS IgG(lipopolysaccharide IgG) ELISA Kit人信號傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子3(STAT3)免疫試劑盒
淺綠氣球菌老年癡呆相關(guān)類鈣粘蛋白CS2抗體Human SCRG1(Scrapie responsive protein 1) ELISA Kit人信號傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子2(STAT2)免疫試劑盒
小青霉質(zhì)多聚腺苷結(jié)合蛋白3抗體Human IL-12(p35)(Interleukin 12 p35) ELISA Kit人信號傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子1(STAT1)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌Complexin I/復(fù)合1抗體Human alpha 1 microglobulin ELISA Kit人新生甲狀腺(NN-T4)免疫試劑盒
松杉靈芝Complexin II/復(fù)合2抗體Human LAMTOR1(Ragulator complex protein LAMTOR1) ELISA Kit人新喋呤(NEOP)免疫試劑盒
尖孢鐮刀菌棉花?;娃D(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBPγ抗體Human HAV-IgM(hepatitis A virus-Immunoglobulin M) ELISA Kit人鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白6(ZnT6)免疫試劑盒
梨頭霉(+)質(zhì)連接蛋白2抗體Human MYEF2(myelin expression factor 2) ELISA Kit人鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4(ZnT4)免疫試劑盒
豬鏈球菌Streptococcus│suis 質(zhì)量規(guī)格:工業(yè)級EB病核抗原3A抗體試劑盒甘草次十八酯
鏈格孢霉屬Alternaria│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BREB病核抗原1試劑盒甘草二
尖孢鐮孢Fusarium│oxysporum 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BREB病IgA試劑盒根薯內(nèi)酯B
多激酶抑制劑(Sorafenib)釀酒酵母 1,4-環(huán)氧-1,4-二氫萘炎癥因子3;穿透Elisa
克魯維畢赤酵母 BOC-D-4-氟苯氨酸氧化低密度脂蛋白Elisa
平菇(肺形) 2-溴蒽醌氧化型Elisa
地森林單胞 磺酸銨鹽Elisa
糙皮側(cè)耳 1-(叔丁氧羰基)哌一磷酸腺苷Elisa
蘋果黑腐皮殼 乙氧基試鹵靈一氧化氮Elisa
豬布魯氏 生物Ⅰ型 堿式碳酸鋯(IV)一氧化氮合成Elisa
新康氏木霉 L-3-基苯氨酸一氧化碳Elisa
栗疫 2-甲氧基苯基酸胰蛋白Elisa
根瘤 對酸胰蛋白原激活肽Elisa
白色類諾卡氏 3,6-二溴-9-苯基咔唑胰島Elisa
磚紅鐮孢 9-(4-溴苯基)咔唑胰島降解Elisa
腸桿屬 11-馬來酰亞基十一酸胰島受體底物1Elisa
竹喙球 4-馬來酰亞丁酸胰島受體底物2Elisa
弧 4-乙基聯(lián)苯胰島樣生長因子1Elisa