突變體EGFR變構(gòu)抑制劑公司正在出售的產(chǎn)品：Orexin A ELISA Kit 大鼠阿立新A3-苯 99%
Casp-3 ELISA Kit 大鼠胱天蛋白34-聯(lián)苯 97%
Bcl-2 ELISA Kit 大鼠B淋巴瘤因子2苯 98%
CXCR3 ELISA Kit 大鼠CXC趨化因子受體32,4,6-三 98%
NE ELISA Kit 大鼠中性粒彈性蛋白4-烯苯 96%
TSGF

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

南游動(dòng)球菌轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β3抗體（TGFβ3）Anti-KIF20B Antibody嗜粒趨化因子(ECF)

大腸埃希氏菌轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β受體2抗體（TGF-βRⅡ，TGFβRⅡ）Anti-KIF3A Antibody嗜乳脂蛋白亞家族1成員A1(BTN1A1)

香菇轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β受體1抗體Anti-KIN Antibody嗜鉻蛋白B(CHGB)

克魯斯假絲酵母甲狀腺過(guò)氧化物抗體Anti-KIF2C Antibody(PB0228)嗜鉻蛋白A(CHGA)

彎曲假單胞菌腫瘤壞死因子受體1相關(guān)死亡域蛋白抗體Anti-KIN Antibody視紫質(zhì)(RHO)

釀酒酵母生精凋亡相關(guān)基因3抗體Anti-KISS1R Antibody視錐蛋白樣蛋白1(VSNL1)

弓形蟲(chóng)(QHO株)狀腺T3抗體Anti-KISS1R Antibody視網(wǎng)膜劈裂蛋白(RS)

丁梭菌按蚊硫酯包含蛋白-1抗體Anti-KIT Antibody視網(wǎng)膜母瘤蛋白1(RB1)

發(fā)酵假絲酵母端粒結(jié)合蛋白P23抗體Anti-KITLG Antibody視網(wǎng)膜鈣黏附蛋白(RCAD)

釀酒酵母生精凋亡相關(guān)基因6抗體Anti-KIT Antibody(PB0240)視神經(jīng)蛋白3(OPA3)

葉生布勒擔(dān)子酵母酪激C抗體(神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體的一種)Anti-KITLG Antibody視變誘導(dǎo)反應(yīng)蛋白(OPTN)

大腸埃希氏桿菌原肌球蛋白抗體Anti-KITLG Antibody視黃脫氫8(RDH8)

圓錐曲霉促甲狀腺受體抗體Anti-KLF3 Antibody視黃脫氫5(RDH5)

單胞菌屬促甲狀腺受體抗體（C端）Anti-KLF4 Antibody視黃脫氫15(RDH15)

產(chǎn)氣莢膜梭菌       C型磷化轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β活化激1Anti-KLF4 Antibody視黃脫氫14(RDH14)

豬丹絲菌磷化NF-κB活化激抗體Anti-KLF4 Antibody視黃脫氫13(RDH13)

信號(hào)肽肽SPP抗體具核梭桿菌聚核亞種大鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞

溶質(zhì)載體鋅轉(zhuǎn)運(yùn)3抗體巴氏芽孢桿菌大鼠氣管和支氣管上皮細(xì)胞

核轉(zhuǎn)錄因子SOX22抗體艱難梭菌大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

核轉(zhuǎn)錄因子SOX4抗體出血性大腸埃希氏菌 O157：H7大鼠支氣管成纖維細(xì)胞
突變體EGFR變構(gòu)抑制劑球孢白僵 二十二肝腸孢蟲(chóng)Elisa

米曲霉 加雷沙星白斑病Elisa

水原拉梅爾芽胞桿 氨基二茂鐵谷氨酰轉(zhuǎn)Elisa

發(fā)酵接合酵母 黃豆粉黃頭病Elisa

皺蓋疣柄牛肝 卡松甲殼動(dòng)物高血糖Elisa

細(xì)黃鏈霉 馬來(lái)酸苯那敏法尼酸甲基轉(zhuǎn)移Elisa

果生鏈核盤(pán) 3-羧基苯甲多巴脫羧Elisa

黃海芽孢桿 荷葉堿微囊藻-LRElisa

海沙類諾卡氏* N-琥珀酰亞碳酸叔丁酯環(huán)磷酸鳥(niǎo)苷Elisa

尖孢鐮胞 3,4,5-氧基苯甲環(huán)磷酸腺苷Elisa

HIV假病 176-1 檸檬烯酚氧化Elisa

乳桿屬 2-萘酚-3 ，7-二磺酸二鈉精氨酸激Elisa

節(jié)桿 米諾地爾中過(guò)敏原原肌球蛋白Elisa

靈芝 橡膠硫化促進(jìn)劑CBS(CZ)肌苷酸Elisa

海南假絲酵母 卡波姆934鳥(niǎo)苷酸Elisa