詳細介紹
商品介紹:
SB525334是高活性ALK5選擇性抑制劑,IC50為14.3nM,對ALK4的抑制性較低,而對ALK2,3和6則無抑制性。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:356559-20-1 純度:99.18% 分子量:343.42 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
產品屬性:
中文名稱:高活性ALK5抑制劑(SB525334)
英文名稱:SB 525334
產品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
核盤菌HER2受體單克抗體Human SCNN1G ELISA Kit鯨睪(T)免疫試劑盒
巨獸芽孢桿菌癌分化因子P45抗體 HeregulinβHuman SCO1 ELISA Kit鯨雌二(E2)免疫試劑盒
尖孢鐮孢肝脂抗體Human SCP2 ELISA Kit甲型流感
硝基還原假單胞菌磷化組蛋白去乙酰化1抗體Human SCO2 ELISA Kit甲型流感H7N7 HA 免疫試劑盒
浙江芽孢桿菌解旋樣轉錄因子抗體Human SCNN1G ELISA Kit甲型流感H5N1(Avian Flu)HA 免疫試劑盒
紫芝(紫靈芝,中華靈芝)三羥基基合成2抗體Human SCO2 ELISA Kit甲型流感H3N2 HA 免疫試劑盒
黃曲霉人類白抗原A抗體Human SCO1 ELISA Kit海獅
淡紫擬青霉羥類固脫氫17β2抗體Human SCLY ELISA Kit海獅孕激/孕(PROG)免疫試劑盒
猴頭菌羥類固脫氫17β-HSD抗體Human SCT(Secretin) ELISA Kit海獅狀腺原(T3)免疫試劑盒
冬蟲夏草人肝單克抗體/肝特異性抗原抗體Human SCMH1 ELISA Kit海獅皮質(Cortisol)免疫試劑盒
粉擬青霉小鼠抗聚組單克抗體Human SCML1 ELISA Kit海獅甲狀腺(T4)免疫試劑盒
相思根瘤菌鐵調節(jié)蛋白/鐵調抗體Human SCML2 ELISA Kit海獅睪(T)免疫試劑盒
大豆慢生根瘤菌熱休克蛋白J1抗體Human SCML4 ELISA Kit海獅雌二(E2)免疫試劑盒
密旋鏈霉菌發(fā)狀分裂相關增強子-5抗體Human SCN10A ELISA Kit鮭魚
黃桿菌磷化熱休克蛋白90α抗體Human SCML1 ELISA Kit鮭魚促胰液/胰泌(SCT)免疫試劑盒
賴芽胞桿菌屬磷化組蛋白H2AX抗體Human SCML4 ELISA Kit鮭魚補體蛋白4(C4)免疫試劑盒
: GIM資源名稱: 淡紫青霉 質量規(guī)格:分析標準品10-羥基
銅綠假單胞菌Pseudomonas│aeruginosa 質量規(guī)格:100μg/ml,u=2%鷹嘴豆芽A
: F119,60033資源名稱: 變形桿菌 質量規(guī)格:10μg/ml,u=2%荷葉堿
高活性ALK5抑制劑(SB525334)甘肅姜成林氏 2-氟-5-溴苯甲基質金屬蛋白2Elisa
桿狀毛霉 化鋇,二水基質金屬蛋白3Elisa
米曲霉 4-甲氧基-2-羧酸基質金屬蛋白8Elisa
酸桿 5-氟-2'-脫氧尿苷-5'-單磷酸鹽基質金屬蛋白9Elisa
鼠傷寒沙門氏 Fmoc-3,5-二-L-酪氨酸D-乳酸脫氫Elisa
釀酒酵母 二苯基對甲苯基膦L-乳酸脫氫Elisa
矮棒曲霉 N,N'-二對甲苯基聯(lián)苯透明質酸Elisa
發(fā)酵畢赤酵母 1-芐氧羰基-4-甲酸催產Elisa
釀酒酵母 甲基三苯基化膦促生長釋放Elisa
棘孢曲霉 1,3 -雙(二環(huán)己膦基)烷去甲腎上腺Elisa
墨西哥畢赤酵母 氨基胍硝酸鹽乙酰Elisa
枯草芽孢桿 5-溴-2-甲氧基吡啶-3-甲一氧化氮Elisa
暗黑鏈霉 1-Boc-3-羥基吡咯烷多巴Elisa
雙孢蘑菇 N-苯基甘氨酸γ氨基丁酸Elisa
光滑青霉 2-(三氟甲氧基)苯磺酰脂肪Elisa