詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:Rho抑制劑(Rhosin鹽酸鹽)
英文名稱:Rhosin hydrochloride
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
Rhosin鹽酸鹽是Rho特異性抑制劑,結合WT RhoA的Kd值為0.4uM,對Cdc42和Rac1作用無。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1281870-42-5 純度:99.98% 分子量:394.86 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
構巢曲霉Alexa Fluor 488標記的羊抗人IgMAnti-SRCIN1 Antibody高爾基蛋白73(GP73)
草木樨中華根瘤菌Alexa Fluor 555標記的羊抗人IgMAnti-SRI Antibody干因子(SCF)
雅致小克銀漢霉Alexa Fluor 647標記的羊抗人IgMAnti-SRI Antibody干擾誘導T-α亞族趨化劑(ITαC)
分枝卷霉PE-Cy5.5標記的羊抗人IgMAnti-SRP1/KPNA1 Antibody干擾調節因子9(IRF9)
大腸埃希氏桿菌PE-Cy7標記的羊抗人IgMAnti-SRSF3 Antibody干擾調節因子5(IRF5)
釀酒酵母Cy3標記的羊抗人IgMAnti-SSR3 Antibody干擾調節因子4(IRF4)
灰樹花堿性磷(AP)標記的羊抗人IgMAnti-SRY Antibody干擾調節因子1(IRF1)
東方伊薩酵母辣根過氧化物標記的羊抗人IgMAnti-SSTR2 Antibody干擾ω(IFNω)
短柄帚霉辣根過氧化物標記的小鼠抗人IgGAnti-SRSF1 Antibody(PB0431)干擾κ(IFNκ)
薄蓋靈芝堿性磷(AP)標記的小鼠抗人IgGAnti-SSTR3 Antibody干擾ε(IFNε)
米曲霉羅丹明標記的小鼠抗人IgGAnti-SSX2 Antibody干擾γ誘導蛋白30(IFI30)
殼梭孢屬(都不提供)FITC標記的小鼠抗人IgGAnti-SSTR1 Antibody干擾γ誘導蛋白16(IFI16)
枯草芽孢桿菌膠體金標記的小鼠抗人IgGAnti-ST13 Antibody干擾γ誘導單核因子(MIγ)
鉛黃腸球菌PE-Cy5.5標記的小鼠抗人IgGAnti-ST13 Antibody干擾γ(IFNγ)
粉紫小菇PE-Cy7標記的小鼠抗人IgGAnti-ST7 Antibody干擾β(IFNβ)
假絲酵母屬Alexa Fluor 350標記的小鼠抗人IgGAnti-STAR Antibody干擾α8(IFNα8)
谷受體調節蛋白2抗體檸檬明串珠菌大鼠成年表皮角質形成層細胞提取物
鈉鈣交換蛋白3抗體蒼白桿菌屬大鼠內臟脂肪細胞提取物
NDUFAF4抗體鞘桿菌屬宮頸上皮細胞和腫瘤原代細胞提取物
巰基氧化1抗體羅輪隱球酵母直腸上皮細胞和腫瘤原代細胞提取物
Rho抑制劑(Rhosin鹽酸鹽)釀酒酵母 AmberliteIRA-411陰離子交換樹脂
黑曲霉 維生A酸
釀酒酵母 DL-α-酚醋酸酯
白囊耙齒 維生K4
凍干粉 金黃色葡萄球(定量) 5(6)-羧基熒光二乙酸酯
葡萄穗霉 堿性紅1:1
秦氏蜜環 活性大紅
雞腿菇 活性艷紅
薄邊蜂窩 酸性艷紅
半軟干酪居真細 5(6)-羧基熒光
節桿 酸性橙12
桃色枝頂孢 羥基萘酚藍二鈉
鍺栓孔 桑根酮K
美味側耳(紫孢側耳) 刻葉紫堇
斑玉蕈 24-去乙酰澤瀉O
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)