詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Thiazovivin | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
Thiazovivin(Tzv)是新型的ROCK抑制劑,IC50為0.5μM,能促進hESC的存活。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1226056-71-8 純度:99.32% 分子量:311.36 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
粉紅鐮孢磷化嗜中性粒胞漿因子1抗體Anti-OCT-2(POU2F2) Antibody硫肝蛋白聚糖(HSPG)
孢小克銀漢霉神經突觸3抗體Anti-OFD1 Antibody硫肝(HS)
大腸埃希氏菌神經囊泡循環蛋白1抗體Anti-OGG1 Antibody硫嘌呤甲基轉移(TPMT)
蘇云金芽孢桿菌以色列亞種神經囊泡循環蛋白3抗體Anti-OGT Antibody(PB0819)硫代硫鹽轉硫(TST)
藤黃微球菌神經囊泡循環蛋白4抗體Anti-OGN Antibody硫三磷(THTPA)
核果尾孢跨膜蛋白SEMA5B抗體Anti-OLFM4 Antibody硫焦磷激1(TPK1)
新月彎孢軸突導向因子SEMA6C抗體Anti-OLIG1 Antibody鱗狀癌抗原2(SCCA2)
亞美尼亞小脆柄菇絲/蘇蛋白激2抗體Anti-OLR1 Antibody鱗狀癌抗原1(SCCA1)
潮濕學校擬諾卡氏菌多重表皮生長因子樣蛋白4抗體Anti-OLR1 Antibody鱗蛋白(ICHYN)
蒼白桿菌跨膜蛋白SEMA4B抗體Anti-OLR1 Antibody磷酯Cγ1(PLCγ1)
肉糜 牛源性成分(定性)跨膜蛋白SEMA4F抗體Anti-OLR1 Antibody磷脂酰乙結合蛋白1(PEBP1)
島生異擔子菌跨膜蛋白SEMA4G抗體Anti-OMP Antibody磷脂酰乙-N-甲基轉移(PEMT)
枯草芽胞桿菌軸突導向因子SEMA3E抗體Anti-OMG Antibody磷脂酰絲脫羧(PISD)
灰葡萄孢(灰霉病菌)泛相關修飾蛋白特異性蛋白5抗體Anti-ONECUT1 Antibody磷脂酰絲受體(PSR)
毛殼SNAPC3蛋白抗體Anti-ONECUT2 Antibody磷脂酰絲合2(PTDSS2)
紅緣層孔菌琥珀脫氫復合體亞基A抗體Anti-OPA1 Antibody磷脂酰絲合1(PTDSS1)
2'-5'-寡腺苷合成2抗體Aquibacillushalophilus人腎管狀上皮細胞提取物
RNA結合蛋白NOB1抗體Clavibactermichiganensissubsp.michiganensis人輸尿管上皮細胞提取物
胚胎發育相關蛋白Nodal抗體Xylophilusampelinus人尿道上皮細胞提取物
轉錄因子NAC1抗體Corynebacteriumtrachiae人腎成纖維細胞提取物
ROCK抑制劑(Thiazovivin)利福霉小單孢 2-(二環己基膦基)聯苯脂肪酸結合蛋白3Elisa
松口蘑 3,3′,5-三-L-甲狀腺原氨酸 鈉鹽B瘤因子2Elisa
茯苓 對氟芐脫3bElisa
江華島類諾卡氏 淀粉乙酰CoA羧化Elisa
釀酒酵母 醋酸棉酚3-羥基-3-甲基戊二酰合1Elisa
天藍色鏈霉 亞培南酸性脂肪Elisa
梭 頭孢西丁中性脂肪Elisa
釀酒酵母 3,4,5-氧基甲酯磷脂Elisa
里澤無氧芽孢桿 3,4,5-氧基磷脂AElisa
哈茨木霉 5-三氟甲氧靛紅色P450 19Elisa
蠟狀芽孢桿 二氫膽固叉頭框蛋白2Elisa
芽胞桿 木通苯乙苷BSmad同源物4Elisa
黑木耳 杯莧甾酮總超氧化物歧化Elisa
地衣芽孢桿 遠志山酮III谷氨酰Elisa
葡萄球屬 甲基蓮心堿α酮戊二酸Elisa