商品介紹:
英文名稱:AZD2014 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg AZD2014是一種ATP競爭性的mTOR抑制劑,IC50為2.81nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1009298-59-2 別名:Vistusertib 純度:98.99% 分子量:462.54 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
mTOR抑制劑(AZD2014) | AZD2014 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
根瘤菌谷受體紅藻離子5抗體Human IDH1(IsocitRate dehydrogenase [NADP] cytoplasmic) ELISA Kit大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)免疫試劑盒
麥根腐平臍孺孢棕櫚酰轉(zhuǎn)移GODZ抗體Human UBA2 ELISA Kit大鼠血小板活化因子(PAF)免疫試劑盒
大麗花輪枝孢G蛋白信號調(diào)節(jié)蛋白1抗體Human UBA5 ELISA Kit大鼠血小板反應蛋白/凝血敏感蛋白1(TSP-1)免疫試劑盒
布魯氏菌病(+)陽性血清G基丁受體β2+3/GABAA Rβ2+GABAA Rβ2抗體Human UBA6 ELISA Kit大鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)免疫試劑盒
孟氏假單胞菌G蛋白α抗體Human BAI3(Brain-specific angiogenesis inhibitor 3) ELISA Kit大鼠血纖蛋白原(Fbg)免疫試劑盒
香菇G蛋白β樣蛋白抗體Human TXNDC17 ELISA Kit大鼠血栓合成(TXAS)免疫試劑盒
莫氏克羅諾桿菌通用轉(zhuǎn)錄因子GTF2B抗體Human TULP1 ELISA Kit大鼠血栓B2(TXB2)免疫試劑盒
醋化醋桿菌磷化gp130抗體Human TUFT1 ELISA Kit大鼠血栓A2(TXA2)免疫試劑盒
戴爾根霉糖脂轉(zhuǎn)移蛋白結(jié)構(gòu)域2抗體Human UBA5 ELISA Kit大鼠血栓前體蛋白(TpP)免疫試劑盒
紅霉鏈霉菌高爾基體膜相關蛋白6樣蛋白4抗體Human BAI3(Brain-specific angiogenesis inhibitor 3) ELISA Kit大鼠血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)免疫試劑盒
釀酒酵母胞漿區(qū)相關蛋白GIPC2抗體Human UBA6 ELISA Kit大鼠血清受體2A/5-羥色受體2A(5-HT-2A)免疫試劑盒
土曲霉糖基轉(zhuǎn)移8結(jié)構(gòu)域1抗體Human UBAC2 ELISA Kit大鼠血清(5-羥色)-N-乙酰基轉(zhuǎn)移(AANAT)免疫試劑盒
短桿狀馬賽菌促代謝型谷受體2抗體Human UBASH3A ELISA Kit大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)免疫試劑盒
香菇G蛋白修補結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體Human TXNDC5(Thioredoxin domain-containing protein 5) ELISA Kit大鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)免疫試劑盒
巴氏醋桿菌β1-6 N-乙酰基葡萄糖轉(zhuǎn)移6抗體Human UBAP1 ELISA Kit大鼠血紅氧合2(HO-2)免疫試劑盒
明膠樣鏈霉菌牛磺/β-基乙磺抗體Human TXNDC4 ELISA Kit大鼠血紅氧合1(HO-1)免疫試劑盒
云南紅球菌Rhodococcus│yunnanensis 質(zhì)量規(guī)格:40-60目,氣相、液相色譜柱表小檗堿
: AS2.614資源名稱: 釀酒酵母 質(zhì)量規(guī)格:干燥劑用地榆皂苷II
吸鏈霉菌Streptomyces│hygroscopicus 質(zhì)量規(guī)格:3-5mm,球形地榆皂苷I
mTOR抑制劑(AZD2014)巴氏醋桿 2-煙酸乙酯表面活性蛋白AElisa
大腸埃希 4-正丁基苯酸肺表面活性物質(zhì)相關蛋白AElisa
異常威克漢姆酵母 四羰基二-代合二銠,Rh中性粒趨化因子1Elisa
金針菇 8-羥基喹啉-2-甲單核趨化蛋白1Elisa
大豆慢生根瘤 5-溴-2-羥基苯乙酮抗血小板IgM抗體Elisa
Bacillus aryabhattai 氫氧化鑭(III) (REO)類風濕因子IgA抗體Elisa
細麗擬盤多毛孢 4-[(2,4-二甲氧基苯基)(Fmoc-氨基)甲基]苯氧乙酸成肌分化抗原Elisa
蘋果鏈格孢 1-乙基-3-甲基咪唑甲基磺酸鹽腎Elisa
谷氨酸棒桿 1-乙基-3-甲基咪唑三氟甲磺酸鹽色C氧化Elisa
蠟葉散囊 N,N'-二-Boc-硫脲間接膽紅Elisa
木糖氧化無色桿 芐基三苯基溴化磷轉(zhuǎn)化生長因子αElisa
紅色鏈孢囊 2-氨基-3-氟三氟甲苯血管內(nèi)皮粘附分子Elisa
小柄凸臍蠕孢 2-溴-3,5-二吡啶間粘附分子Elisa
酚節(jié)桿 磺甲二唑低密度脂蛋白Elisa
總狀毛霉 草酸鈦白介8Elisa