商品介紹:
英文名稱:SC79 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg SC79是一種能腦滲透的Akt磷酸化激活劑,增強(qiáng)Akt的活動(dòng)。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):305834-79-1 純度:98.0% 分子量:364.78 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Akt磷酸化激活劑(SC79)
英文名稱:SC79
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
聚生殼菌二氫二脫氫1/2抗體Human SRSF7 (Serine/arginine-rich splicing factor 7) ELISA KIT人白介2受體(IL2R)免疫試劑盒
漢遜德巴利酵母 形態(tài)發(fā)生紊亂關(guān)聯(lián)激活因子2抗體Human FCGRT(IgG receptor FcRn large subunit p51) ELISA Kit人白介2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)免疫試劑盒
粉紅單端孢霉質(zhì)分裂付出蛋白2抗體Human SREK1 (Splicing regulatory glutamine/lysine-rich protein 1) ELISA KIT人白介2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)免疫試劑盒
乳乳球菌質(zhì)分裂付出蛋白4抗體Human SI (Sucrase-isomaltase, intestinal) ELISA KIT人白介29(IL-29)免疫試劑盒
原玻璃蠅節(jié)桿菌質(zhì)分裂付出蛋白5抗體Human GGT1(Gamma-glutamyltranspeptidase 1) ELISA Kit人白介28B(IL-28B)免疫試劑盒
噬尼古丁節(jié)桿菌淋巴抗原75抗體Human SHFM1 (26S proteasome complex subunit DSS1) ELISA KIT人白介28A(IL-28A/IFN-λ2)免疫試劑盒
嗜熱鏈球菌DIP13β抗體Human SULF1(Extracellular sulfatase Sulf-1) ELISA Kit人白介26(IL-26)免疫試劑盒
Ramlibacter tataouinensis 胎盤和前列腺相關(guān)蛋白DLG5抗體Human SVIL (Supervillin) ELISA KIT人白介25(IL-25)免疫試劑盒
產(chǎn)氮假單胞菌(可定)接頭蛋白DOK7抗體Human SRCIN1 (SRC kinase signaling inhibitor 1) ELISA KIT人白介24(IL-24)免疫試劑盒
莫哈韋芽孢桿菌特異性DMRT3蛋白抗體Human SBSN (Suprabasin) ELISA KIT人白介23受體(IL-23R)免疫試劑盒
變綠肉座菌橋粒芯糖蛋白2抗體Human SGMS2 (Phosphatidylcholine:ceramide cholinephosphotransferase 2) ELISA KIT人白介23A(IL-23A)免疫試劑盒
少孢酵母溶體絲蛋白DPP2抗體Human SLC2A8 (Solute carrier family 2, facilitated glucose transporter member 8) ELISA KIT人白介23(IL-23)免疫試劑盒
盤多毛孢菌Notch信號(hào)通路Delta樣配體4抗體Human SON (Protein SON) ELISA KIT人白介22(IL-22)免疫試劑盒
短小克銀漢霉動(dòng)力相關(guān)蛋白1抗體Human GPA33(Cell surface A33 antigen) ELISA Kit人白介-21(IL-21)免疫試劑盒
釀酒酵母形態(tài)發(fā)生紊亂關(guān)聯(lián)激活因子1抗體Human SPG11 (Spatacsin) ELISA KIT人白介20(IL-20)免疫試劑盒
雞傷寒沙門氏菌磷化DNA甲基轉(zhuǎn)移1抗體Human SORT1(Sortilin) ELISA Kit人白介2(IL-2)抗體免疫試劑盒
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml伊立替康
燼灰刺孢鏈霉菌Streptomyces│cinereospinus 質(zhì)量規(guī)格:500mg/L,溶劑:羥基酪
多殺性巴氏桿菌Pasteurella│multocida 質(zhì)量規(guī)格:1000mg/L,基體:七葉皂苷D
Akt磷酸化激活劑(SC79)根瘤 3-(三苯甲基巰基)酸胸腺基質(zhì)生成Elisa
卵形巴貝斯蟲(張家川株) 3,5-二氟線粒體呼吸鏈復(fù)合物IIIElisa
尖孢鐮刀 3,4-二氟視黃酸Elisa
噬肌畢赤酵母 2,5-二氟抑瘤MElisa
棒曲霉 3,5-二溴生長關(guān)聯(lián)蛋白43Elisa
卷枝毛霉 異喹啉-3-羧酸甲酯M型肌酸激Elisa
解脂復(fù)膜孢酵母 異硫酸熒光膽固7α單氧Elisa
運(yùn)動(dòng)節(jié)桿 3,5-二甲酸甲酯色P450家庭成員27A1Elisa
赤水太白山 5-溴-2-苯基吡啶色P450家庭成員8b1Elisa
Ramlibacter sp. 5--1,3-二甲基-1H-吡唑-4-甲色P450家庭成員7b1Elisa
香菇 D-erythro-sphingosine-1-phosphate角蛋白20Elisa
馬紅球 9,10-二(1-萘基)蒽色C氧化Elisa
韓國溶桿 2-氨基-4,5-二甲氧基苯磷酸三酯Elisa
蘇云金芽孢桿 6-溴-1-己烯內(nèi)酯Elisa
Hymenobacter perfusus 對(duì)苯乙烯磺酸鈉