藍(lán)色標(biāo)本保色液公司*的產(chǎn)品：phospho-ATF2(pSer490/pSer498)/FITC 熒光標(biāo)記抗化活化復(fù)制因子2抗體IgG間苯二 98%
phospho APP(pThr668)/FITC 熒光標(biāo)記抗化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體IgG鄰苯二 99%
phospho-P53(pSer392)/FITC 熒光標(biāo)記抗化腫瘤抑制因P53抗體IgG酰二茂鐵 95%
phosphor-

產(chǎn)品屬性：

中文名稱(chēng)：藍(lán)色標(biāo)本保色液

英文名稱(chēng)：

產(chǎn)品規(guī)格：2×250ml

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

萊西氏菌屬布氏桿菌菌體蛋白抗體Human GALK2 ELISA Kit小鼠CD44分子(CD44)免疫試劑盒

褪色沙雷氏菌（粘質(zhì)沙雷氏菌）磷化B-Raf抗體Human GALNT4 ELISA Kit小鼠CD34分子(CD34)免疫試劑盒

水叢毛單胞菌磷化B-Raf抗體Human GALM ELISA Kit小鼠CD33分子(CD33)免疫試劑盒

土生隱球酵母多聚合苷激3磷化抗體Human GADD34 ELISA Kit小鼠CD30分子(CD30)免疫試劑盒

秀珍菇癌易感基因1抗體Human GABRG2 ELISA Kit小鼠CD19分子(CD19)免疫試劑盒

紫棕炭團(tuán)菌Bcl-2同源拮抗劑抗體Human GADD45A ELISA Kit小鼠CC趨化因子受體6(CCR-6)免疫試劑盒

嗜熱鏈球菌β3腎上腺能受體抗體Human GADD45GIP1 ELISA Kit小鼠cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)免疫試劑盒

土生克雷伯氏菌腦鈉/利鈉肽抗體Human GAGE2D ELISA Kit小鼠Ca-ATP(Ca-ATPase)免疫試劑盒

馬昆德擬青霉BZW2蛋白抗體Human GAGE1 ELISA Kit小鼠B因子(BF)免疫試劑盒

布魯氏菌緩激肽B1受體抗體Human GAK ELISA Kit小鼠B淋巴瘤因子2(Bcl-2)免疫試劑盒

釀酒酵母鈣激活通道蛋白α1抗體Human GAGE7 ELISA Kit小鼠B淋巴瘤-XL(Bcl-xl)免疫試劑盒

彎曲芽孢桿菌卵黃狀黃斑病蛋白2抗體Human GABARAPL1 ELISA Kit小鼠B活化因子(BAFF)免疫試劑盒

解淀粉周培瑾氏菌絲/蘇蛋白激SAD-B抗體Human GABARAPL2 ELISA Kit小鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)免疫試劑盒

可可球二孢鼻咽癌相關(guān)轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白抗體Human GALE ELISA Kit小鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)免疫試劑盒

灰黃淺黃酵母腦肌激BCK抗體Human GAN ELISA Kit小鼠Apelin 免疫試劑盒

釀酒酵母β葡萄糖苷抗體Human GAPDHS ELISA Kit小鼠Apelin 13(AP13)免疫試劑盒

發(fā)光假蜜環(huán)菌(亮菌)Armillaria tabescens 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRα-內(nèi)肽試劑盒3,5,6,7,8,3’,4’-七氧基

納豆芽孢桿菌Bacillus│natto 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRα肌動(dòng)蛋白試劑盒25-羥基原人參二

宇佐美曲霉Aspergillus│usamii 質(zhì)量規(guī)格：>90%,BSα-黑色激試劑盒3-氫化去氫松苓
藍(lán)色標(biāo)本保色液大腸埃希氏O抗原微量凝集定型血清診斷液 甲酸戊酯p53誘導(dǎo)基因3Elisa

大腸桿 N-α-羰基苯氧基-D-精氨酸PeriostinElisa

人參土成對(duì)桿 辛酸戊酯P糖蛋白;滲透性糖蛋白Elisa

白色金針菇 3-甲基-2-酸乙酯P物質(zhì)Elisa

孟氏假單胞 4-乙酰乙酸乙酯P選擇Elisa

大腸埃希 己酸己酯Ras同源基因家族成員AElisa

雞傷寒沙門(mén)氏 疊氮乙酸乙酯Rho關(guān)聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激1Elisa

微小桿 四氫糠乙酸酯Rho關(guān)聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激2Elisa

串珠鐮孢 2-氟-5-甲R(shí)-脊椎蛋白1Elisa

交替紅色桿屬 2(3H)-4-氟苯并噻唑酮S100B蛋白Elisa

矮被孢霉 鄰乙酰氨基對(duì)酚S100蛋白Elisa

金耳 6-氟-2(3氫)苯噻唑酮S100鈣結(jié)合蛋白A8;A9復(fù)合物Elisa

釀酒酵母 鄰乙酰氨基對(duì)酚SKA2Elisa

豇豆慢生根瘤 苯炔酸Syndecan-1;CD138Elisa

藤倉(cāng)鐮孢 6,8-二溴-咪唑[1,2-A]吡Tamm-Horsfall蛋白Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)