詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:Von Ebener's液
英文名稱:
產品規格:500ml
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
用途: 組織脫鈣,酸性脫鈣液 注意事項: 主要由飽和氯化鈉溶液、鹽酸、蒸餾水等組成,細胞核染色較好,無需水洗。 儲存條件:室溫,12個月 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
(氧化型)標準品英文名稱: VX-11e磷化Ras信號轉導KSR1蛋白抗體包裝25g
谷精草(標準品)英文名稱: Alogliptin(SYR-322)抗體包裝5g
骨碎補(標準品)英文名稱: Curcumenol激肽釋放7抗體包裝1g
固公果根(標準品)英文名稱: BYL-719激肽釋放9抗體(舒血管9)包裝5g
瓜蔞(栝樓)(標準品)英文名稱: BYL-719激肽釋放14抗體包裝1g
瓜蔞皮(雙邊栝樓(標準品)英文名稱: A66電壓閥門通道混合器相關亞家族成員7抗體包裝5mg
瓜蔞皮(栝樓)(標準品)英文名稱: SC514ATP敏感性通道亞基kir6.2抗體包裝100ml
瓜子金(標準品)英文名稱: γ-CyclodextrinTIP60抗體包裝25g
瓜子金皂苷V英文名稱: Me-β-CD組蛋白賴特異性脫基1抗體包裝5g
瓜子金皂苷XXXI(對照品)英文名稱: Epothilone B(EPO906, Patupilone) 轉錄因子GATA3結合蛋白G3B抗體包裝1g
瓜子金皂苷己(標準品)英文名稱: BMS345541磷化周期蛋白依賴激抑制因子1C抗體包裝5g
關白附(標準品)英文名稱: IKK16磷化通道蛋白DRK1抗體包裝25g
關黃柏(標準品)英文名稱: Trelagliptin succinate;SYR-472離子通道蛋白Kv3.4抗體包裝5g
管花苷A(標準品)英文名稱: 2-[2-(2-t-Boc-aminoethoxy)ethoxy]ethanol 離子通道蛋白Kv3.3抗體包裝1g
貫葉金絲桃(標準品)英文名稱: 2’,2’-Difluoro-2’-deoxyuridine 組蛋白去基化JMJD2B抗體包裝5g
金黃色葡萄球菌Staphylococcus│aureus 質量規格:含量82.5%~91.1%(每毫克頭孢吡肟含量,干品)抗心磷脂抗體IgA試劑盒甘草查爾B;Licochalcone
檸檬色赤桿菌Erythrobacter│citreus 質量規格:效價測定抗心肌抗體試劑盒甘草查爾A;Licochalcone
青霉屬Penicillium│sp. 質量規格:≥98.5%(按照干品計算)抗心肌β1受體試劑盒甘草次;18 β-Glycyrrhet
Von Ebener's液大斑凸臍蠕孢 3-氨基-5-溴三氟甲苯?;D移Elisa
擬康寧木霉 奎寧重硫酸鹽煙酰腺嘌呤二核苷酸磷酸;還原型輔ⅡElisa
塔賓曲霉 牻牛兒基焦磷酸Elisa
青霉 5-溴-2-甲氧基煙酸異戊烯基焦磷酸Elisa
三線鐮孢 1-(4-(4-溴苯氧基)苯基)乙酮脂肪Elisa
扶桑本森頓酵母 2-溴-3-納豆激Elisa
熒光假單胞 2,6-二甲氧基萘納豆激Elisa
球孢白僵 倍他司汀甲磺鹽甘露Elisa
雜色曲霉原變種 5--2-甲酸煙酰腺嘌呤二核苷磷酸Elisa
交鏈孢霉 3-氯-4-甲磷酸甘露糖變位Elisa
變幻青霉 1-(3-氯基)鹽酸鹽胼胝質Elisa
膨大彎頸霉 6-甲基煙酸甲酯半胱氨酸Elisa
純黃絲衣霉 1,3--二-間甲苯磺酸鹽磷酸甘露糖變位2Elisa
細鏈格孢 4-苯甲氧基苯乙酮K+-ATPaseElisa
灰色大孢鏈霉 2-三丁錫烷基噻吩線粒體解偶聯蛋白Elisa
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)