詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
英文名稱:b-AP15
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
b-AP15特異性抑制去泛素化酶(deubiquitinating)UCHL5和Usp14活性。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1009817-63-3 別名:NSC 687852 純度:98.03% 分子量:419.39 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
意外片球菌線粒體導肽水解β抗體Anti-ADAM10 Antibody抵抗(Resistin)
匍匐曲霉原變種富含脯蛋白15抗體Anti-ADAM19 Antibody低氧誘導因子3α(HIF-3α)
香菇維生K依賴的蛋白C輕鏈抗體Anti-ADAM15 Antibody低氧誘導因子2(HIF-2)
雪白根霉Anti-ADAM2 Antibody低氧誘導因子1α(HIF-1α)
柯達酵母屬一種腫瘤抑制基因抗體(C端)Anti-ADAM2 Antibody低密度脂蛋白受體相關蛋白6(LRP-6)
紫杉木齒菌血小板活化因子受體抗體Anti-ADAM28 Antibody低密度脂蛋白受體相關蛋白5(LRP-5)
pet-21a蛋白磷γ1抗體Anti-ADAM8 Antibody低密度脂蛋白受體相關蛋白4(LRP-4)
立枯絲核菌核苷還原M2B抗體Anti-ADAMTS1 Antibody低密度脂蛋白受體相關蛋白1(LRP-1)
溶血葡萄球菌磷二酯4A抗體Anti-ADAMTS1 Antibody低密度脂蛋白受體(LDLR)
釀酒酵母絲束蛋白T Plastin抗體Anti-ADAM9 Antibody低密度脂蛋白免疫復合物(LDL-IC)
鏈格孢屬神經叢蛋白A2抗體Anti-ADAMTS2 Antibody低密度脂蛋白(LDL)
ATCC 35030網蛋白抗體Anti-ADAMTS2 Antibody低分子質量蛋白7/β型蛋白體9(LMP7/PSMB9)
釀酒酵母前列腺腫瘤高表達蛋白1抗體Anti-ADAMTS13 Antibody低分子肝(LMWH)
球黑孢菌磷化腫瘤抑制基因P53抗體Anti-ADAMTS4 Antibody登革熱抗體IgM(DF-Ab IgM)
盤長孢狀盤孢嘌呤ATP受體抗體Anti-ADAR Antibody登革熱抗體(DF-Ab)
沙漠類芽胞桿菌磷化絲裂原活化蛋白激p38抗體Anti-ADH1A Antibody刀豆A(ConA)
盤長孢狀刺盤孢Glomerella│cingulata (Stoneman) Spauld. & H. Schrenk 質量規格:98%,美國進口
麥芽糖假絲酵母Candida│maltosa 質量規格:>98%,進分
谷棒桿菌Ⅰ型Corynebacterium│glutamicum Ⅰ 質量規格:>98%,進分
UCHL5和Usp14活性抑制劑(b-AP15)金針菇(毛柄、冬菇) 含90ml磷酸鹽緩沖液均質袋血清鐵Elisa
枯草芽孢桿 改良CCDA瓊脂平板(9cm)血清總補體Elisa
黃曲霉 甲基烯酸四氫糠基酯血栓A2Elisa
孢小克銀漢霉輪生變種 改良CCDA瓊脂平板(9cm)血栓B2Elisa
糙孢曲霉 BCYE-CYS瓊脂平板(9cm)血栓調節蛋白Elisa
假絲酵母屬 甘露卵黃多粘瓊脂平板(9cm)血小板活化因子Elisa
淡紫擬青霉 2-甲基-6-乙基苯(MEA)血小板膜糖蛋白Ⅱb;ⅢaElisa
伯頓絲孢畢赤酵母 改良Skirrow氏瓊脂平板(9cm)血小板衍生生長因子Elisa
彩色豆馬勃 TSA培養基平板(9cm)血小板衍生生長因子ABElisa
土曲霉 含青霉TSA培養基平板(7cm)氧化低密度脂蛋白Elisa
枯草芽孢桿 2,6-二異基苯(DIPA)Elisa
柱形胞鏈霉 NA平板(加青霉)(9cm)一氧化氮Elisa
多形布勒擔子酵母 我妻氏血瓊脂平板(9cm)一氧化氮合成Elisa
多噬伯克霍爾德氏 慶大霉瓊脂平板(9cm)胰島Elisa
米根霉 玫瑰紅鈉瓊脂平板(9cm)胰島樣生長因子2Elisa