產(chǎn)品屬性:
中文名稱:茜素紅S染色試劑盒
英文名稱:Alizarin Red S Staining Kit
產(chǎn)品規(guī)格:100mL
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
茜素紅S染色試劑中的茜素紅S可通過(guò)與鈣離子和其他金屬離子發(fā)生鰲和反應(yīng)而形成可以在顯微鏡下直接觀察的帶顏色的復(fù)合物。本產(chǎn)品就是基于此原理而開發(fā)。 產(chǎn)品特點(diǎn): 1.即開即用,用戶不需要單獨(dú)準(zhǔn)備各種溶液。 2.操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,顯色清晰。 3.可用于組織切片中的鈣沉積,尤其適用于骨細(xì)胞或組織的病理和生理研究。 4.可用于檢測(cè)動(dòng)物原生代或培養(yǎng)細(xì)胞的鈣沉積。 5.本產(chǎn)品為通用型,不但用于鈣離子的檢測(cè),還可用于FeCl2和CdCl2的檢測(cè)。 儲(chǔ)存條件:常溫運(yùn)輸和保存,有效期一年。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
尼索地平雜質(zhì)Ⅰ(2,6-二基-4-(2-基)-...英文名稱: Liranaftate碳化合物磺基轉(zhuǎn)移13抗體包裝250g
尼索地平雜質(zhì)Ⅱ(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Naproxen sodium碳化合物磺基轉(zhuǎn)移14抗體包裝50g
尼扎替丁(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Naproxen sodium碳化合物磺基轉(zhuǎn)移2抗體包裝100g
鳥嘌呤 (標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Zidovudine碳化合物磺基轉(zhuǎn)移3抗體包裝25g
鳥嘌呤核苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Zidovudine碳化合物磺基轉(zhuǎn)移5抗體包裝500g
尿嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Nicorandil碳化合物磺基轉(zhuǎn)移6抗體包裝100mg
尿嘧啶核苷,尿苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Nicorandil染色質(zhì)修飾蛋白CHMP7抗體包裝25ml
尿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Nicotinic acid軟骨凝集蛋白CHODL抗體包裝1g
尿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Rifampicin膽囊收縮39抗體包裝100ml
檸檬,枸櫞一(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Rifampicin乙激α抗體包裝500ml
檸檬無(wú)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Epsilon Polylysine 陽(yáng)離子通道相關(guān)蛋白4抗體包裝5ml
牛磺膽鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Promestriene胞漿動(dòng)力蛋白中間鏈1抗體包裝100g
牛磺豬去氧膽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bosentan hydrate胞漿動(dòng)力蛋白中間鏈2抗體包裝25g
紐甜;新特姆(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bosentan hydrate抑癌蛋白DKK3抗體包裝25g
諾沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fosaprepitant dimeglumine單克抗體包裝1g
傳染性法氏囊病病毒Avibirnavirus│Infectious bursal disease virus 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR相關(guān)蛋白A試劑盒合氧化前胡;Oxypeucedani
黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品相關(guān)蛋白A試劑盒松柏;4-Hydroxy-3-meth
根霉Rhizopus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP32,BR,可用于培養(yǎng)凋亡相關(guān)斑點(diǎn)樣蛋白試劑盒仙環(huán);Narciclasine
茜素紅S染色試劑盒黃色短桿 2-氟-5-羥酸流感病IgM抗體Elisa
中慢生華癸根瘤 (R)-(-)-2-芐-1-苯乙副流感病IgG抗體Elisa
孟氏假單胞 O-磷酸乙呼吸道合胞病IgG抗體Elisa
大腸埃希 2-羥基吡啶-5-呼吸道合胞病IgM抗體Elisa
產(chǎn)氣莢膜梭 C型 1,5-己二烯-3,4-二程序性死亡-1Elisa
單形擬桿 2,4-二氯-5-氟-3-甲酸(易)葡萄糖-6-磷酸脫氨2Elisa
長(zhǎng)赤細(xì) 丁酸香葉酯孕受體Elisa
靈芝(紅芝, 赤芝) N-乙基-1,3-二纖維蛋白原蛋白1Elisa
輪枝孢 2-甲氧基-4-吡啶甲酸賈地鞭毛蟲抗原Elisa
嗜根寡養(yǎng)單胞 1,3-二乙基-2-硫脲ASPMElisa
多節(jié)孢屬 炔草酸血清白蛋白Elisa
好食脈孢 2-溴-5-甲氧基吡啶蛋白激BβElisa
釀酒酵母 5,5,5-三氟-4-羥基-4-(三氟甲基)-2-戊酮Elisa
黃疣倫茨氏 四氯吡啶甲酸β-骨膠原交聯(lián)Elisa
植物乳桿 甲酸芐酯腺苷酸環(huán)化4Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)