詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Actinomycin D | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
商品介紹:
英文名稱:Actinomycin D 產品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg Actinomycin D抑制DNA修復,IC50為0.42μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:50-76-0 別名:Dactinomycin;Actinomycin IV 純度:99.89% 分子量:1255.42 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
公司產品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
解淀粉芽孢桿菌碳酐相關蛋白/腦蛋白10抗體Human EPS8(Epidermal growth factor receptor kinase substRate 8) ELISA Kit人異質性胞核核糖核蛋白A2/B1(hnRNP A2/B1)免疫試劑盒
冠突曲霉白介-18受體α鏈抗體Human OxHDL(Oxidized high-density lipoprotein) ELISA Kit人異質性胞核核糖核蛋白A1(hnRNP A1)免疫試劑盒
廈門交替紅色桿菌轉錄阻抑蛋白CTCF抗體Human TUBA1B(Tubulin alpha-1B chain) ELISA Kit人異質性胞核核糖核蛋白A0(hnRNP A0)免疫試劑盒
喜濕小脆柄菇T淋巴CD1抗體Human IFNA21(IFN alpha 21) ELISA Kit人異質核糖核蛋白Q(SYNCRIP/HNRPQ/NSAP1)免疫試劑盒
粘紅酵母磷化周期檢測點激2抗體Human ProCollagen II ELISA Kit人異鎖鏈(IDES)免疫試劑盒
根瘤菌網格蛋白重鏈抗體Human ALD(Aldosterone) ELISA Kit人異檸檬脫氫(ICD)免疫試劑盒
美澳型核果褐腐病菌透明質介導游走受體抗體Human Aldolase B ELISA Kit人異常凝血原(APT)免疫試劑盒
節(jié)桿菌2號染色體開放閱讀框24抗體Human IFNA21(IFN alpha 21) ELISA Kit人異腎上腺(iso-Hyd)免疫試劑盒
魯氏毛霉2號染色體開放閱讀框60抗體Human ProCollagen II ELISA Kit人乙型肝炎病前S2抗原(HBV preS2Ag)免疫試劑盒
空泡單胞菌磷化周期依賴性激7抗體Human ALD(Aldosterone) ELISA Kit人乙型肝炎病前S2抗體(HBV preS2Ab)免疫試劑盒
狹窄革菌磷化周期依賴性激9抗體Human AO-IgG(Ovary-Immunoglobulin G) ELISA Kit人乙型肝炎病核心抗體IgM(HBcAb-IgM)免疫試劑盒
梨生殼囊孢磷化周期檢測點激1抗體Human CYP7B1(Cytochrome P450 7B1) ELISA Kit人乙型肝炎病核心抗體IgG(HBcAb-IgG)免疫試劑盒
米曲霉磷化周期檢測點激1抗體Human Aldolase B ELISA Kit人乙型肝炎病核心抗體(HBcAb)免疫試劑盒
潘諾尼亞鎖霉磷化抑癌基因p16抗體Human ZP-IgG(zona pellucida-Immunoglobulin G) ELISA Kit人乙型肝炎病表面抗體(HBsAb)免疫試劑盒
停乳鏈球菌磷化抑癌基因p16抗體Human EB-VCA-IgG(Epstein-barr virus capsid antigen-Immunoglobulin G) ELISA Kit人乙型肝炎病X抗原(HBxAg)免疫試劑盒
黑曲霉磷化抑癌基因p16抗體Human A16-IgG(Coxsackie virus A16-Immunoglobulin G) ELISA Kit人乙型肝炎病X蛋白相互作用蛋白(HBXIP)免疫試劑盒
金針菇Flammulina│velutipes 質量規(guī)格:>98%,BRHSP60 IgG抗體金松雙黃
ATCC9790資源名稱: 海氏腸球菌 質量規(guī)格:>60%,BSHSP60 IgA抗體角鯊烯
鹽單胞菌Halomonas│sp. 質量規(guī)格:>70%,BSH-ras 氧醉椒
DNA修復抑制劑(Actinomycin D)休哈塔假絲酵母 3,4-二氟苯硫酚糖化血紅蛋白Elisa
安絡小皮傘* 4-羥基-2-甲基喹啉糖化血紅蛋白A1cElisa
大腸埃希 2-硝基芴糖化血清蛋白Elisa
假單胞屬 仲丁基溴化鎂糖皮質類固受體Elisa
少根根霉 8-硝基喹啉糖缺失性轉鐵蛋白Elisa
大腸埃希氏桿 5-硝基喹啉糖原合成Elisa
枯草芽孢桿 2--4-氟苯糖原合成激3Elisa
*灰葡萄孢 乙基二苯基膦糖原合成激3βElisa
栗褐芽孢桿 2-溴-4-苯甲天門冬氨酸Elisa
蘋果鏈格孢 2,6-二硝基苯天門冬氨酸氨基轉移;谷草轉氨Elisa
枯草芽孢桿 2-氨基-3-甲酸甜菜堿高半胱氨酸甲基轉移Elisa
黑曲霉 N-Boc-5-溴-2-酸鐵調Elisa
葡萄座腔 9-乙?;?3,6-二咔唑同型半胱氨酸Elisa
擬黑馬朗假絲酵母 Pamabrom銅藍蛋白Elisa
Bacillus aryabhattai 2,3-二甲氧基-5-甲基-1,透明質酸Elisa