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Hoechst 33342染色液

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更新時(shí)間:2022-04-21 15:26:14瀏覽次數(shù):232

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10ml|50ml
貨號(hào) GOY-01X9828 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
Hoechst 33342染色液公司*的產(chǎn)品:phospho-PKC delta (Tyr311) 化蛋白激C亞性D型抗體四米氏酮 99%
PLAU/uPA 尿激型纖溶原激活因子抗體米氏酮 98%
PLAUR 尿激型纖溶原激活因子受體抗體N-二 98%
PLG 纖維蛋白溶原抗體N-二 99%
Plexin A1 神經(jīng)叢蛋白A1抗體2-(氨) 99%
Plexin A2 神經(jīng)叢蛋白

詳細(xì)介紹

公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;

②生物膜與細(xì)胞器的研究;

③細(xì)胞骨架體系的研究;

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;

⑧細(xì)胞工程.

產(chǎn)品屬性:

中文名稱:Hoechst 33342染色液

英文名稱:

產(chǎn)品規(guī)格:10ml|50ml

發(fā)貨周期:1~3天

商品介紹:

熒光染料Hoechst 33342 具有一定的細(xì)胞膜透性,能少許進(jìn)入正常細(xì)胞膜,使其染上低藍(lán)色。Hoechst33342 可以用來復(fù)染細(xì)胞的細(xì)胞核。

對于非固定的活細(xì)胞來說,hoechst33342 可以起到區(qū)別凋亡和正常細(xì)胞的作用,因?yàn)榈蛲黾?xì)胞的膜通透性增強(qiáng),因此進(jìn)入細(xì)胞中的Hoechst 33342 比正常細(xì)胞的多,熒光強(qiáng)度要比正常細(xì)胞中要高,此外,凋亡細(xì)胞的染色體DNA 對于細(xì)胞的稱染來說,可以配以適當(dāng)?shù)?.1% Triton X-100 通透,從而是所有細(xì)胞細(xì)胞核有效的染上hoechst 染料。

儲(chǔ)存:4℃,避光,有效期6個(gè)月。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

大黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Barium sulfate纖維母生長因子5抗體包裝1g

大黃-8-β-D-吡喃葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Benzenesulfonic acid脆性X綜合征相關(guān)蛋白AFF1抗體包裝25g

大黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Benzoin感覺神經(jīng)蛋白1抗體包裝5g

大黃英文名稱: Benzophenone hydrazone線粒體型共濟(jì)失調(diào)蛋白抗體包裝1g

大黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bismuth (III) chlorideFC段IgE受體α多肽抗體包裝1g

大戟因子L1(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bismuth (III) citrateFAM81A蛋白抗體包裝250mg

大薊(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bismuth (III) potassium iodideFAM78B蛋白抗體包裝25g

大薊苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bismuth (III) sulfate9號(hào)染色體開放閱讀框59抗體包裝5g

大麥芽堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bismuth(III) subcarbonate basicFAM76A蛋白抗體包裝100g

大青葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bismuth(III) subsalicylateFAM76B蛋白抗體包裝1g

大蒜,二烯基二硫英文名稱: Bismuth, granularFAM92A1蛋白抗體包裝1g

大血藤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: BNOA-Na, β--Naphthoxyacetic acid sodium saltFAM98A蛋白抗體包裝5g

大葉骨碎樸(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Brij 56FRMD5蛋白抗體包裝25g

大葉茜草英文名稱: Bromochlorophenol blue sodium saltFRMD6蛋白抗體包裝5g

大葉茜草英文名稱: Bromophenol blue, sodium saltFAM161A蛋白抗體包裝25g

暫無Planktotalea│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品神經(jīng)營養(yǎng)因子3試劑盒5-羥基-6,7-二氧基黃;5-Hy

大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>98%,分析標(biāo)準(zhǔn)品神經(jīng)型一氧化氮合成試劑盒5-羥基-7,8-二氧基黃;5-hy

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品神經(jīng)粘著分子試劑盒去氫荷包牡丹堿;Dehydrodicen
Hoechst 33342染色液香蕉 1-丁基-3-甲基咪唑乳酸鹽β烯Elisa

鴨疫里氏桿 3-氟-4-甲酸甲酯抗甲狀腺抗體Elisa

嘴突凸臍蠕孢 三聚酸酯白介1可溶性受體Elisa

牛布氏陽性血清品(虎紅平板) (2S,6S)-2,6-二叔丁基-2,3,5,6-四氫-1H-咪唑并[1,2-a]咪唑百日咳IgG抗體Elisa

Rhizobium  4-甲磺酰基苯肼鹽酸鹽百日咳IgM抗體Elisa

塔氏糖多孢 2,6-二甲基喹啉T4多聚核苷酸激Elisa

銅綠假單胞 6-溴-2-甲基喹啉保羅樣激Elisa

大腸埃希 4-(4-溴吡唑-1-基)-1-甲酸叔丁酯尿泛-核糖體融合蛋白52Elisa

金黃殼囊孢 (S)-1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙淋球抗體Elisa

墳?zāi)构?jié)桿 2-羥基-3-甲氧基EB病衣殼抗原IgG抗體Elisa

枯草芽孢桿 5-羥基異喹啉EB病衣殼抗原IgM抗體Elisa

土曲霉 (2S,4R)-1-((S)-2-(環(huán)戊氧羰基))-3,3-二甲基丁酰基)-4-羥基吡咯烷-2-羧酸EB病核抗原Elisa

燒土正青霉 2-(二氟甲氧基)苯甲基大腸桿宿主殘留蛋白Elisa

雞縱 4-正基T4多聚核苷酸激Elisa

蘋果錐梗孢 3--5-氮雜STEAP家族成員1Elisa


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