詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
U0126 | 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
英文名稱:U0126 產品規格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg U0126是一種非ATP競爭性的MEK抑制劑,作用于MEK1和MEK2,IC50分別為70nM和60nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1173097-76-1 別名:U0126-EtOH 純度:98.03% 分子量:426.56 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
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謝瓦曲霉骨架相關蛋白2/腫瘤和微管相關蛋白抗體Human OxHDL(Oxidized high-density lipoprotein) ELISA Kit人異質性胞核核糖核蛋白R(hnRNP R)免疫試劑盒
草假單胞菌染色質修飾蛋白4B(4C)抗體Human TUBA1B(Tubulin alpha-1B chain) ELISA Kit人異質性胞核核糖核蛋白P2(hnRNP P2)免疫試劑盒
弗氏鏈霉菌磷化非受體酪激c-Abl抗體Human CORT(Corticosterone) ELISA Kit人異質性胞核核糖核蛋白M(hnRNP M)免疫試劑盒
木菇屬磷化非受體酪激c-Abl抗體Human PGRN(Progranulin) ELISA Kit人異質性胞核核糖核蛋白L(HNRPL)抗體免疫試劑盒
瓜果腐霉磷化非受體酪激c-Abl抗體Human CAGE1(Cancer associated gene 1 protein) ELISA Kit人異質性胞核核糖核蛋白L(hnRNP L)免疫試劑盒
釀酒酵母酪蛋白激1γ2抗體Human CFHR2(Complement factor H-related protein 2) ELISA Kit人異質性胞核核糖核蛋白K(hnRNP K)免疫試劑盒
優美氈被菌柯薩奇病蛋白受體B抗體Human DSP(Dentin Sialoprotein) ELISA Kit人異質性胞核核糖核蛋白I(hnRNP I/PTB)免疫試劑盒
黃色孢鏈霉菌腫瘤抑制因子FBW7抗體Human pro-ET1(Pro-endothelin 1) ELISA Kit人異質性胞核核糖核蛋白H(hnRNP H)免疫試劑盒
克羅諾桿菌屬粘附分子4抗體Human S100 Protein ELISA Kit人異質性胞核核糖核蛋白G(hnRNP G)免疫試劑盒
嗜熱側孢霉鈣調蛋白結合轉錄激活因子1抗體Human KCND3(Potassium voltage-gated channel subfamily D member 3) ELISA Kit人異質性胞核核糖核蛋白E(hnRNP E)免疫試劑盒
羅倫隱球酵母周期依賴性激5激活結合蛋白C53抗體Human PCOL-I(Procollagen I) ELISA Kit人異質性胞核核糖核蛋白D(hnRNP D)免疫試劑盒
開菲爾乳桿菌著絲粒蛋白H抗體Human FOXM1(Forkhead box protein M1) ELISA Kit人異質性胞核核糖核蛋白C(hnRNP C)免疫試劑盒
畢赤酵母半胱蛋白抑制劑6抗體Human TGT(tRNA-Guanine Transglycosylase) ELISA Kit人異質性胞核核糖核蛋白A3(hnRNP A3)免疫試劑盒
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梨形游動放線 N-(β-氨乙基-γ-氨基)甲基二甲氧基硅烷髓樣分化因子88Elisa
單色云芝 2'-氨基脫氧鳥苷羧化不全骨鈣Elisa
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紅曲紅曲 Tergitol TMN 3聚乙二基壬基糖化白蛋白Elisa
枯草芽孢桿枯草亞種 (3-甲氧芐基)膦酸二乙酯糖化蛋白Elisa