Hoechst 33342/PI雙染試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品：Phospho-PLC gamma 1 （Ser1248） 化酯Cγ1抗體D-2-苯甘氨 99%
Phospho-PLC gamma 1 （Tyr783） 化酯Cγ1抗體L?(+)-α-苯甘氨 98%
PKC gamma/SCA14 蛋白激C亞型G抗體3,5-二-4-吡唑 97%
Phospho-PKC gamma (Thr514

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

楤木皂苷A英文名稱： Amikacin成纖維生長因子受體2抗體包裝1g

粗葉懸鉤子甙英文名稱： Aminophyllin hydrate成纖維生長因子受體4抗體包裝5g

醋辛酯（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ammonium bismuth citrate, hydrate凝血原(纖維介)抗體包裝1g

大波斯菊苷,芹菜-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（標(biāo)準(zhǔn)...英文名稱： Ammonium bromide衰老關(guān)鍵蛋白抗體包裝25ml

大車前苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Ammonium iodide凋亡調(diào)節(jié)基因之一抗體包裝5ml

大豆苷,黃豆苷 （標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ammonium iron(II) sulfate, hexahydrate凋亡調(diào)節(jié)基因之一抗體（短型）包裝25ml

大豆,黃豆苷元(標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ammonium molybdate, tetrahydrate纖維連接蛋白抗體包裝5ml

大風(fēng)子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ammonium phosphomolybdate , hydrateFosB蛋白抗體包裝250mg

大腹皮（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ammonium sodium phosphateFRA2/FOSL2抗體包裝1g

大果木姜子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ammonium succinate叉頭蛋白P3抗體包裝5g

大紅袍（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ammonium thiosulfate成纖維生長因子8抗體包裝50mg

大黃(掌葉大黃)（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Amprolium hydrochloride肌動蛋白結(jié)合蛋白Fascin抗體包裝25g

大黃（藥用大黃）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Antimony (III) oxide線粒體裂變1蛋白抗體包裝5g

大黃酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Azomethine-H monosodium salt叉頭蛋白P1抗體包裝25g

大黃酚-8-O-葡萄糖苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Azure C鼠疫F1蛋白/鼠疫耶爾森氏菌莢膜抗原F1單克抗體包裝5g

束梗鏈格孢(犁黑斑病菌)Alternaria│bokurai 質(zhì)量規(guī)格：進口原裝Santa,99%腎試劑盒去基川陳皮;Demethylnobi

黃孢原毛平革菌Phanerochaete│chrysosporium 質(zhì)量規(guī)格：含量98.0%~100.5%神經(jīng)軸突絲蛋白試劑盒芹菜-7-O-β-D-葡萄糖苷;Api

#擬雙輪絲鏈輪絲菌Streptoverticillium│biverticillatopsis Yan et al. 質(zhì)量規(guī)格：>99%神經(jīng)元凋亡抑制蛋白試劑盒芹菜-7-O-葡萄糖苷;Apige
Hoechst 33342/PI雙染試劑盒慢生根瘤 異丁酸異戊酯泛激活E1Elisa

食酸戴爾福特* 4-氯-2,5-二氟苯甲泛激活E2Elisa

多殺性巴氏桿 2-甲基丁酸異丁酯甲型流感病Elisa

褐球固氮 2,3,4,5,6-五溴甲苯窖蛋白Caveolin2Elisa

節(jié)桿屬 (甲硫基）乙酸窖蛋白Caveolin3Elisa

滕倉赤霉 1-十二烷基-3-甲基咪唑四氟酸鹽I因子補體片段3bElisa

大腸埃希分泌磷酸蛋白1Elisa

山綠豆根瘤 3,5-二氟-4-維甲酸受體Elisa

*正紅菇 2-(2'-羥基-5'-基)苯并三唑70kDa熱休克蛋白8Elisa

拜耳接合酵母 2,3-二氟-4-氯苯百日咳桿Elisa

釀酒酵母 2,3-二溴-5-氟吡啶胰島受體αElisa

傘枝犁頭霉 2-溴-4,5-二氟甲酯抗卵透明帶抗體Elisa

枯草芽孢桿* 1,5,6,8-四氫吡喃并[4',3':4,5]噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-酮抗腎上腺皮質(zhì)抗體Elisa

長柄鏈格孢 多拉司瓊甲磺酸鹽一水合物全段甲狀旁腺Elisa

鮮綠青霉 N-甲基辛炭疽桿IgM抗體Elisa