商品介紹:
英文名稱:NEDD8-activating enzyme inhibitor 產品規格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg MLN4924是一種有效的選擇性NEDD8活化酶(NEDD8-activating enzyme,NAE)抑制劑,IC50為4.7nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:905579-51-3 別名:Pevonedistat 純度:98.00% 分子量:443.52 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
產品屬性:
中文名稱:NEDD8活化酶抑制劑(MLN4924)
英文名稱:NEDD8-activating enzyme inhibitor
產品規格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
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公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
Paucimonas lemoignei4號染色體開放閱讀框29抗體Human KCNA4(Potassium voltage-gated channel subfamily A member 4) ELISA Kit人孕激誘導阻斷因子(PIBF)免疫試劑盒
芽孢桿菌屬4號染色體開放閱讀框21抗體Human Protein NDRG3(N-myc downstream-regulated gene 3 protein) ELISA Kit人孕激/孕(PROG)免疫試劑盒
豇豆慢生根瘤菌C型凝集結構域家族4成員C抗體Human P311(Neuronal protein 3.1) ELISA Kit人鑰孔蟲戚血藍蛋白(KLH)抗體(IgM)免疫試劑盒
嗜熱鏈球菌CD226抗體Human TIGAR(TP53-Inducible Glycolysis and Apoptosis Regulator) ELISA Kit人鑰孔蟲戚血藍蛋白(KLH)抗體(IgG)免疫試劑盒
新疆鹽地桿菌屬CD26抗體Human anti-CarP(anti-carbamylated protein) ELISA Kit人遠端上游元件結合蛋白1(FUBP1)免疫試劑盒
桃色枝頂孢免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ/Fc γ RII a抗體Human ApoB48 ELISA Kit人原纖維蛋白-1(FBN1)免疫試劑盒
腸桿菌屬緊密連接蛋白20抗體Human ABHD1 ELISA Kit人原鈣黏1(PCDH1)免疫試劑盒
游動球菌屬中心體蛋白135抗體Human EMP3(Epithelial membrane protein 3) ELISA Kit人魚精蛋白1(PRM1)免疫試劑盒
膠孢半胱蛋白蛋白-7抗體Human ABL2 ELISA Kit人誘導型一氧化氮合成(iNOS)免疫試劑盒
Herbaspirillum canariense鈣調節抗體(鈣調蛋白/鈣調)Human ABT1 ELISA Kit人有絲分裂原活化蛋白激14(MAPK14)免疫試劑盒
檸檬假絲酵母1號染色體開放閱讀框181抗體Human ABLIM1 ELISA Kit人游離脂肪(FFA)免疫試劑盒
*杏葉斑鏈格孢Ⅰ型補體受體抗體(C3b/C4b受體抗體)Human ACADSB ELISA Kit人游離原卟啉(FEP)免疫試劑盒
青霉屬8型膠原/內皮膠原蛋白抗體Human ABTB1 ELISA Kit人游離血紅蛋白(f-Hb)免疫試劑盒
孟氏假單胞菌結合轉化激活因子CITED1抗體Human ACADVL ELISA Kit人游離狀腺原(Free-T3)免疫試劑盒
石面單胞菌色P450 2C9抗體Human ACBD3 ELISA Kit人游離肉堿免疫試劑盒
摩洛哥芽孢桿菌色P450 2D6抗體Human ACAP1 ELISA Kit人游離前列腺特異性抗原(fPSA)免疫試劑盒
教酒鏈霉菌Streptomyces│chartreusis 質量規格:>70%,BSKI-67抗原試劑盒桔梗皂苷元
煙草Colletotrichum│tabacum 質量規格:BR;溶液,Au在23.5-23.8%Jo1抗體/抗組酰tRNA合成抗體試劑盒焦袂康
: AS01資源名稱: 熱帶假絲酵母 質量規格:>96%,BRIV形膠原蛋白α3鏈試劑盒基當藥寧
NEDD8活化酶抑制劑(MLN4924)小卷霉 3-乙酰芐生長分化因子15Elisa
涎沫假絲酵母 6-硝基喹啉生長Elisa
弗雷德里克斯堡假單胞 正丁基鋰生長釋放肽ghrelinElisa
大腸埃希 2-萘甲生長釋放因子Elisa
Arthrobacter 羧乙基鍺倍半氧化物(GE 132)生長調節致癌基因β;黑瘤生激因子Elisa
塔賓曲霉 檸檬酸氫二鈉水合物生長停滯基因6Elisa
美味側耳(紫孢側耳) 碳酸鈉,十水生長相關蛋白43Elisa
釀酒酵母 二甲胂酸鈉 三水合物生長抑Elisa
香菇 2-溴苯酸生長因子受體結合蛋白2Elisa
草酸青霉 乙酸鈉,三水食道癌相關基因4蛋白Elisa
枯草芽孢桿 BOC-對磺酰-D-精氨酸視黃結合蛋白Elisa
地衣芽孢桿 1-萘乙酸鈉視黃結合蛋白4Elisa
鐮刀屬 芐基化鎂嗜鉻粒蛋白AElisa
酒紅指孢囊 2-苯基喹啉嗜環蛋白;親環AElisa
毛柄(金針菇) 6-乙氧基-3-吡啶酸嗜酸性粒趨化蛋白Elisa