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PBMC樣本密度分離液

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更新時(shí)間:2022-04-21 14:30:41瀏覽次數(shù):210

聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 200ml
貨號 GOY-01X9755 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
PBMC樣本密度分離液公司正在出售的產(chǎn)品:LY-96/MD-2 MD-2蛋白抗體鈉 98%
Lysozyme 溶菌抗體硫代甜菜 12 98%
Lyn 膜相關(guān)蛋白酪氨激Lyn抗體十二烷硫鈉 97%,電泳
Phospho-Lyn (Tyr507) 膜相關(guān)蛋白酪氨激Lyn抗體十二烷硫鈉 99.0%,超純級
Phospho-Lyn (Tyr396) 化膜相關(guān)蛋白酪氨激Lyn抗體硫代甜菜 8 98

詳細(xì)介紹

商品介紹:

本產(chǎn)品是葡聚糖Ficoll 400與泛影酸葡甲胺按照一定比例混合的無菌水溶液,適用于從人外周血液中分離淋巴細(xì)胞。根據(jù)細(xì)胞密度的差異,采用密度梯度沉降法,借助細(xì)胞分離液和離心技術(shù),就可以進(jìn)行淋巴細(xì)胞分離純化。

保存溫度:18-25℃避光

應(yīng)用:

外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)的分離

產(chǎn)品特性:

GMP級環(huán)境

無細(xì)胞毒性,細(xì)胞得率高

活力更好

批次差異極小

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:

中文名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

發(fā)貨周期

PBMC樣本密度分離液


200ml

1~3天


操作步驟:

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。

2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測:

染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測:

染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。

二.細(xì)胞處理:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

美他環(huán),烯土霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Amlodipine角蛋白13抗體包裝25g

美托拉宗(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Amlodipine白免疫球蛋白樣受體-B抗體包裝500g

美雄諾龍(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: NizatidineCD33L抗體包裝100g

門冬胰島(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Carboxymethyl cellulose 角蛋白10抗體包裝25g

蒙脫石(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fludarabine軸突生長因子CD108抗體包裝5g

孟魯司特鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fludarabine唾液結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集5抗體包裝1g

咪喹莫特(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: G-418 disulfate,GeneticinCD329抗體包裝1g

咪唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Erlotinib嗜粒趨化蛋白14抗體包裝1g

咪唑煙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: N-Acetyl-cysteine1號染色體開放閱讀框57抗體包裝250mg

米格列(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Zopiclone2號染色體開放閱讀框18抗體包裝100ml

米格列奈鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Zopiclone色c氧化6抗體包裝100g

米力農(nóng)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Aniracetam嗜粒趨化蛋白24抗體包裝25g

米諾地爾(硫鹽)敏樂啶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Aniracetam巨噬炎性蛋白15包裝100ml

米屈肼(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Glutamine巨噬炎性蛋白抗體包裝500ml

米替福新(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: RoflumilastCD72蛋白抗體包裝1g

擬青霉屬Paecilomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>720IU/MG,BR膜DNA抗體試劑盒1-脫氧野尻霉;1-Deoxynoji

醋化醋桿菌Acetobacter│aceti 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測定角蛋白21-1片段試劑盒他克莫司;Tacrolimus

肺炎克雷伯氏菌Klebsiella│pneumoniae 質(zhì)量規(guī)格:EP/USP角蛋白18-M65試劑盒10-脫乙酰基巴卡丁III;10-Dea
PBMC樣本密度分離液飼料   硬脂酸鈷風(fēng)疹病IgM抗體Elisa

南方散斑殼 啉鹽酸鹽抗組織轉(zhuǎn)谷氨酰IgG抗體Elisa

枯草芽孢桿 1,3,4,6-四-O-乙酰基-2-脫氧-2-苯二甲酰亞氨基-β-D-吡喃葡萄糖抗組織轉(zhuǎn)谷氨酰IgM抗體Elisa

異常漢遜酵母異常變種 氮雜環(huán)丁烷-3-甲酸甲酯鹽酸鹽糖原磷酸化aElisa

冠突散囊 1,4-二異基苯硫氧還蛋白氧化還原Elisa

大腸埃希氏 三氟乙酰賴氨酸骨硬化蛋白Elisa

赤曲霉 乙烯基雙茚基二氯化鋯, 外消旋混合物肌特異性增強(qiáng)因子2D抗體Elisa

橢圓孫秀芹氏 3-氨基-5-苯基噻吩-2-甲酸甲酯活化轉(zhuǎn)錄因子3Elisa

雙胞雙鐮孢 氧化白藜蘆半胱氨酸蛋白1Elisa

桃色枝頂孢 扁豆堿卡格氏病Elisa

松針散斑殼 L-谷氨酸 1-甲酯麥角蛋白IgG抗體Elisa

同絲毛殼 白皮杉水痘-帶狀皰疹病IgA抗體Elisa

釀酒酵母 白藜蘆抗組織轉(zhuǎn)谷氨酰IgA抗體Elisa

貴州青霉 美曲勃龍(R-1881)糖原磷酸化Elisa

考克氏屬 尼泊金異酯α半乳糖苷Elisa

 


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