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詳細介紹
商品介紹：
本品為IV型膠原酶，≥125 CDU/mg solid（CDU = collagen digestion units），特別適用于胰島組織的消化。 本品來源于溶組織梭菌（Clostridium histolyticum），是一種酶粗提物，不僅含有膠原酶（更準確的稱法為梭菌蛋白酶A（clostridiopeptidase A）），能夠降解天然膠原和網狀纖維。還含有其他的一些蛋白酶，多糖酶，脂酶等，分別能夠有效水解結締組織和上皮組織細胞外基質內的其他蛋白、多糖和脂質，使得本品非常適用于組織消化。 膠原酶（Collagenase）是一種蛋白酶，一種肽鏈內切酶，能夠特異性的識別Pro-X-Gly-Pro序列（該序列高頻率出現在膠原中，很少發現于其他蛋白中）并切割該序列中性氨基酸（X）和甘氨酸（Gly）之間的肽鍵。許多蛋白酶都能水解單鏈且變性的膠原多肽，但膠原酶是一種可以降解具有三股超螺旋結構的天然膠原纖維的蛋白酶，這種膠原纖維廣泛存在結締組織內。 目前商業化提供的細菌膠原酶主要根據膠原酶活性的差異，分為四種類型：膠原酶I型，II型，III型和IV型，在應用上有所偏向： 1）膠原酶I（Type I Collagenase）：含有比較均勻的各種酶活力（包括膠原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性）。通常用作上皮細胞、肝、肺、脂肪和腎上腺組織細胞的制備； 2）膠原酶II（Type II Collagenase）：含有更高的梭菌蛋白酶活性，通常用于心臟、骨、肌肉、胸腺和軟骨等組織來源細胞的制備； 3）膠原酶III（Type III Collagenase）：含有較低的蛋白酶活性，常用于乳腺細胞的制備； 4）膠原酶IV（Type IV Collagenase）：含有低胰酶活性，通常用于胰島細胞的制備，或者需要維持受體完整性的細胞制備實驗。 酶活力單位定義 在37℃，pH7.5 的條件下，5h內水解膠原產生相當于1μM L-亮氨酸的酶量定義為1個酶活力單位。 儲存條件：4℃避光，有效期兩年 |
產品屬性：
中文名稱：膠原酶IV型
英文名稱：Collagenase IV
產品規格：100mg
發貨周期：1～3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調控；
⑤細胞分化及其調控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
嗎啉惡（標準品）英文名稱： Caffeic acid磷化巨噬集落激因子受體抗體包裝5g
嗎貝(標準品)英文名稱： Caffeic acid微管結合蛋白CYLD抗體包裝100g
嗎替麥考酚酯/霉酚酯（標準品）英文名稱： Caffeic acid磷化微管結合蛋白CYLD抗體包裝25g
麥白霉（標準品）英文名稱： Neomycin sulfate磷化CBX5抗體包裝5g
麥迪霉（標準品）英文名稱： Neomycin sulfate霉抗體包裝100mg
麥芽三糖(標準品)英文名稱： Diphenhydramine hydrochloride磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝1g
麥芽糖（標準品）英文名稱： Diphenhydramine hydrochloride磷化質膜微囊蛋白-1抗體包裝500mg
沒食子乙酯(標準品)英文名稱： Polyinosinic acid磷化周期依賴激2抗體包裝100g
霉酚; 麥考酚（標準品）英文名稱： Mildronate,Meldonium磷化分裂周期蛋白25C抗體包裝25g
美(標準品)英文名稱： Mildronate,Meldonium磷化周期依賴性激2抗體包裝5g
美羅培南(標準品)英文名稱： Carrageenan質膜微囊蛋白-3抗體包裝25g
美洛西林鈉(標準品)英文名稱： Pranlukast3號染色體開放閱讀框34抗體包裝5g
美洛昔康（標準品）英文名稱： Metoprolol tartrateCD134抗體包裝1g
美索巴莫（標準品）英文名稱： Metoprolol tartrate單核趨化蛋白5抗體包裝5g
美他多辛（標準品）英文名稱： Arabic gum髓鞘相關糖蛋白CD57抗體包裝100g
優雅食烷菌Alcanivorax│venustensis 質量規格：HPLC>98%,標準品色C-1試劑盒甜菊糖;Stevioside
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規格：>98%,BR色b561試劑盒特女貞苷;Specnuezhenide
假單胞菌屬Pseudomonas│sp. 質量規格：HPLC≥98%,標準品絨毛蛋白/埃茲蛋白試劑盒β-蛻皮激;Hydroxyecdyso
膠原酶IV型黃桿 3-羥基異惡唑-5-甲酸甲酯凝血因子ⅡaElisa
小孢根霉原變種 水合乙酸鋱(III), REacton髓樣分化蛋白2Elisa
中慢生根瘤 過氧化單硫酸鹽五型腺病抗原Elisa
溜曲霉 4,6-二氨基-2-甲硫基嘧啶破傷風類IgG抗體Elisa
多孢木霉 氟化釩(IV)糖蛋白95Elisa
蘇云金芽胞桿 三氟釩肝結合性表皮生長因子Elisa
臭曲霉 磷酸鉍(III)腦紅蛋白Elisa
小橢圓接合酵母 N,2-二甲基-3,3-二苯基-2-脂Elisa
歧皺青霉 2-巰基-4-氨基-6-羥基嘧啶抵抗樣分子βElisa
葉球鞘氨單胞 3-硝基-4-羥乙氨苯旋毛蟲抗體Elisa
谷氨酸棒桿 環基萘啶羧酸血小板反應蛋白2Elisa
干酪乳桿 2-基噻吩胰島抗原2Elisa
假單胞屬 異戊酸己酯抗甲狀腺過氧化物抗體Elisa
微球 硫酸銪(III)十水合物, REacton甲狀腺球蛋白抗體Elisa
蘇云金芽孢桿松蠋亞種 硝酸鏑(III) 水合物抗磷脂抗體Elisa
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