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詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Collagenase III | 100mg | 1～3天 |
商品介紹：
本品為III型膠原酶，≥100 U/mg solid，常用于乳腺細胞和胎兒細胞的制備。 本品來源于溶組織梭菌（Clostridium histolyticum），是一種酶粗提物，不僅含有膠原酶（更準確的稱法為梭菌蛋白酶A（clostridiopeptidase A）），能夠降解天然膠原和網狀纖維。還含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等，分別能夠有效水解結締組織和上皮組織細胞外基質內的其他蛋白，多糖和脂質，使得本品非常適用于組織消化。 膠原酶（Collagenase）是一種蛋白酶，一種肽鏈內切酶，能夠特異性的識別Pro-X-Gly-Pro序列（該序列高頻率出現在膠原中，很少發現于其他蛋白中）并切割該序列中性氨基酸（X）和甘氨酸（Gly）之間的肽鍵。許多蛋白酶都能水解單鏈且變性的膠原多肽，但膠原酶是一種可以降解具有三股超螺旋結構的天然膠原纖維的蛋白酶，這種膠原纖維廣泛存在結締組織內。 目前商業化提供的細菌膠原酶主要根據膠原酶活性的差異，分為四種類型：膠原酶I型，II型，III型和IV型，在應用上有所偏向： 1）膠原酶I（Type I Collagenase）：含有比較均勻的各種酶活力（包括膠原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性）。通常用作上皮細胞、肝、肺、脂肪和腎上腺組織細胞的制備； 2）膠原酶II（Type II Collagenase）：含有更高的梭菌蛋白酶活性，通常用于心臟、骨、肌肉、胸腺和軟骨等組織來源細胞的制備； 3）膠原酶III（Type III Collagenase）：含有較低的蛋白酶活性，常用于乳腺細胞的制備； 4）膠原酶IV（Type IV Collagenase）：含有低胰酶活性，通常用于胰島細胞的制備，或者需要維持受體完整性的細胞制備實驗。 分子量：68-130 kDa 激活劑：Ca2+、Zn2+ 抑制劑：EDTA, EGTA,Cysteine, histidine, 2-mercaptoethanol, o-phenanthroline DTT, Hg2+, Pb2+, Cd2+, Cu2+, Zn2+, Not inhibited by DFP or serum 活力單位：在37℃，pH7.5 的條件下，5h內水解膠原產生相當于1μM L-亮氨酸的酶量定義為1個酶活力單位。 儲存條件：4℃避光，有效期兩年 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
洛莫司汀（標準品）英文名稱： Adenosine-5'-diphosphate disodium salt(ADPna)CD8抗體包裝1g
洛匹那韋（標準品）英文名稱： Adenosine 5'-(trihydrogen diphosphate)/ADP表面趨化因子受體2抗體包裝100g
洛索洛芬鈉（標準品）英文名稱： Saxagliptin monohydrate胱抑B/半胱蛋白抑制劑B抗體包裝25g
麻保沙星;馬波沙星(標準品)英文名稱： Ganciclovir趨化樣蛋白抗體包裝5g
馬來地平（標準品）英文名稱： Ganciclovir角蛋白20抗體包裝100g
馬來吡汀(標準品)英文名稱： 5,6-Dimethoxy-1-indanone鈣激活的中性蛋白2抗體包裝25g
馬來伏沙明（標準品）英文名稱： PaeoniflorinCD45RO抗體包裝100g
馬來桂哌齊特(標準品)英文名稱： Paeoniflorin嗜中性粒抗原CD177抗體包裝25g
馬來那敏/撲爾敏(標準品)英文名稱： Paeoniflorin鈣整合結合蛋白1抗體包裝5g
馬來曲美布汀（標準品）英文名稱： Paeoniflorin21號染色體開放閱讀框7抗體包裝100g
馬來噻嗎洛爾（標準品）英文名稱： Paeoniflorin磷化巨噬集落激因子受體抗體包裝25g
馬來替加色羅（標準品）英文名稱： 5-Hydroxytryptophan磷化巨噬集落激因子受體抗體包裝5g
馬來溴那敏(標準品)英文名稱： 5-HTP磷化巨噬集落激因子受體抗體包裝1g
馬來依那普利（標準品）英文名稱： Rivastigmine tartrate磷化巨噬集落激因子受體抗體包裝5g
嗎多明（標準品）英文名稱： Rivastigmine tartrate磷化巨噬集落激因子受體抗體包裝25g
小單孢菌Micromonospora│sp. 質量規格：>98.5%,USP色c氧化亞基5A,線粒體試劑盒土荊皮乙;Pseudolaric Ac
馬爾他布魯氏菌 生物Ⅰ型Brucella│melitensis BiovarⅠ 質量規格：HPLC>99%,標準品色c氧化Ⅵα亞基多肽1試劑盒塔拉薩敏;Talatisamine
LMG27494T=CGMCC1.12516T資源名稱: 芽孢八疊球菌 質量規格：>98%,BR,可用于培養色C氧化試劑盒天麻;Gastrodin
膠原酶III型釀酒酵母 溴化吡斯的明肺炎衣原體IgA抗體Elisa
靈芝 3-羥基二苯基結核抗體Elisa
污水水微 3-甲氧基二苯血小板膜表面相關抗體IgGElisa
豐加鏈霉灰白亞種 鹽酸米那普侖周期蛋白依賴性激2Elisa
異配囊接霉 1-(2-氟苯基)哌周期依賴性激4Elisa
短芽孢桿 5-甲基色鹽酸鹽周期依賴性激5Elisa
金針菇 N,N-二芐基乙周期蛋白依賴性激2Elisa
解脂鹽紅 1,2-二溴-3,5-二氟苯周期依賴性激4Elisa
鴨疫里氏桿 四水合磷酸鉻(III)周期依賴性激5Elisa
南類芽孢桿 氧氟沙星羧酸周期依賴性激11Elisa
猬木霉 1,4-二乙酰基苯表皮生長因子受體Ⅲ型突變體Elisa
溶血不動桿基因型4 1-(4-吡啶基)哌白介6受體αElisa
貝倫格葡萄座腔 2-甲氧基-4-甲基吡啶超敏肌鈣蛋白IElisa
鴨疫里氏桿 1-甲基-3-氯-4-甲氧羰基吡唑-5-磺酰氧鯊烯環化Elisa
抗生鏈霉 5-氯-2-并噻唑氨基端前腦鈉Elisa
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