商品介紹:
英文名稱:ARS-853 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg ARS-853是一種選擇性的KRASG12C抑制劑,IC50值約為2.5μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1629268-00-3 純度:98.39% 分子量:432.94 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
茄鏈格孢死亡相關(guān)蛋白3抗體Human WDTC1 (WD and tetratricopeptide repeats protein 1) ELISA KIT人激M2型同工(M2-PK)免疫試劑盒
周雄腐霉防御α6抗體Human WDSUB1 (WD repeat, SAM and U-box domain-containing protein 1) ELISA KIT人(MGO)免疫試劑盒
哈茨木霉S期激活化蛋白DBF4B抗體Human HMGA2(High mobility group protein HMGI-C) ELISA Kit人二單酰(malonyl CoA)免疫試劑盒
水生拉恩氏菌脫氧胞苷激抗體Human UXS1 (UDP-glucuronic acid decarboxylase 1) ELISA KIT人二(MDA)免疫試劑盒
粉紅單端孢短鏈脫氫還原3抗體Human UFL1 (E3 UFM1-protein ligase 1) ELISA KIT人轉(zhuǎn)/谷轉(zhuǎn)(ALT/GPT)免疫試劑盒
HomoserinimonasDNA聚合θ/DNA pol θ抗體Human CHIT1(Chitotriosidase-1) ELISA Kit人別孕烯/3α,5α-四氫孕(AP/3α,5α-THP)免疫試劑盒
黃曲霉DENN域內(nèi)含蛋白2D抗體Human WDYHV1 (Protein N-terminal glutamine amidohydrolase) ELISA KIT人表皮活化肽因子(CAPF)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌肌相關(guān)蛋白DAG1抗體Human WRAP73 (WD repeat-containing protein WRAP73) ELISA KIT人表皮生長因子樣結(jié)構(gòu)域蛋白7(EGFL7)免疫試劑盒
芽胞桿菌屬磷化肌相關(guān)蛋白DAG1抗體Human URGCP (Up-regulator of cell proliferation) ELISA KIT人表皮生長因子受體2(sp185/Her2)免疫試劑盒
米根霉磷化形態(tài)發(fā)生紊亂關(guān)聯(lián)激活因子1抗體Human TAP2 (Antigen peptide transporter 2) ELISA KIT人表皮生長因子受體(EGFR)免疫試劑盒
念珠狀諾卡氏菌磷化D酪激衰減蛋白1抗體Human WDSUB1 (WD repeat, SAM and U-box domain-containing protein 1) ELISA KIT人表皮生長因子(EGF)免疫試劑盒
黃暗色鏈霉菌磷化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體Human HMGA2(High mobility group protein HMGI-C) ELISA Kit人表睪免疫試劑盒
解淀粉芽孢桿菌磷化D酪激衰減蛋白1抗體Human TRIO (Triple functional domain protein) ELISA KIT人表達(dá)于SiSo系的受體結(jié)合型腫瘤抗原(RCAS1)免疫試劑盒
球孢白僵菌磷化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體Human HADHB (Trifunctional enzyme subunit beta, mitochondrial) ELISA KIT人變腎上腺(MN)免疫試劑盒
土曲霉金色變種磷化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體Human TCHHL1 (Trichohyalin-like protein 1) ELISA KIT人鞭毛蛋白(flagellin)免疫試劑盒
黑根霉磷化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體Human TRMU (Mitochondrial tRNA-specific 2-thiouridylase 1) ELISA KIT人臂板蛋白4C(Sema 4C)免疫試劑盒
桿狀毛霉Mucor│bacilliformis 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%土荊皮
蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereus 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,溶劑:土槿皮乙-O-β-D-葡萄糖苷
芽孢桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:100µg/mL,基體:土槿皮-O-β-D-葡萄糖苷
KRASG12C抑制劑(ARS-853)鏈霉屬 3,5,7,8-四氫-2-甲基-4H-硫代吡喃并[4,3-D]嘧啶-4-酮四旋蛋白2Elisa
雪白根霉 5-氨基-2-溴轉(zhuǎn)錄激活因子6Elisa
枯草芽孢桿 11-溴十一酸X框結(jié)合蛋白Elisa
微小根毛霉 2-溴-9,9-二甲基芴蛋白二硫鍵異構(gòu)Elisa
香菇 (3S)-3-(芴甲氧羰基氨基)-5-氧代-5-(三苯甲基氨基)戊酸單氧化Elisa
枯草芽孢桿 5-羥基-1-四氫萘酮苯乙N甲基轉(zhuǎn)移Elisa
枯草芽孢桿 2,6-二甲基-4H-4-亞吡喃基二β-己糖Elisa
大腸埃希 間溴苯乙巨病PP65抗原Elisa
塞納加爾彎孢 1,3-雙(2,6-二異苯基)-4,5-二氫咪唑四氟酸鹽磷酸肌3激Elisa
白球擬酵母 2,6-二異基苯異酸酯游離皮質(zhì)酮Elisa
產(chǎn)紫晶鏈孢囊福井亞種 2,6-二氟II型膠原Elisa
炭疽芽胞桿 L-脯氨酸叔丁基酯α-突觸核蛋白Elisa
短小芽孢桿 羥基乙叉二膦酸(HEDP)硫酸乙酰肝蛋白多糖Elisa
裂蹄層孔(可提供) 乙二興奮性神經(jīng)遞質(zhì)Elisa
貝倫格葡萄座腔梨生專化型 2,6-雙(2-苯并咪唑基)吡啶尿Elisa