詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:鈣黃綠素AM
英文名稱:Calcein,AM
產品規格:10μg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
鈣黃綠素AM,是一種應用廣泛的綠色熒光細胞標記物。鈣黃綠素AM具有膜透性,共孵育時可以傳過細胞,其本身不具有熒光信號,但在胞內被酯酶水解后,生成具有熒光信號的鈣黃綠素。 在健康的活細胞細胞質中,鈣黃綠素可以保持高負電荷狀態。由于其對細胞的毒性小,鈣黃綠素AM 已經被廣泛用于研究細胞膜的完整性和長期示蹤觀察以及活細胞計數。 CAS:148504-34-1 分子式:C46H46N2O23 分子量:994.86 儲存:-20℃,避光,有效期12個月 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
車前草苷D英文名稱: 1-Naphthalene ethanol核仁纖維蛋白抗體包裝1g
車前子(車前)(標準品)英文名稱: 1-Naphthyl acetate鐵蛋白輕鏈抗體包裝250mg
車葉草苷(標準品)英文名稱: 1-Octacosanol肝核因子3抗體包裝5g
沉香(標準品)英文名稱: 1-Phenyl-1H-tetrazole-5-thiol果糖1,6-二磷酯抗體包裝100g
沉香四英文名稱: 2,2-Dimethyl-1,3-propanediol6磷果糖激抗體包裝1g
陳皮(標準品)英文名稱: 2,2-Dimethylsuccinic acid肌肉果糖二磷抗體包裝5g
陳皮炭(標準品)英文名稱: 2,7-Dihydroxynaphthalene纖維蛋白原γ鏈抗體包裝5g
橙黃決明(標準品)英文名稱: 2,6-Dichloroquinone-4-chlorimide纖維蛋白肽B抗體(血纖肽B)包裝100ml
橙皮(標準品)英文名稱: 2-Adamantanol原癌基因c FGR抗體包裝100ml
橙皮苷(標準品)英文名稱: 2-Adamantanone肢體畸形相關蛋白FHOD1抗體包裝500ml
橙皮(標準品)英文名稱: 2-Bromonaphthalene磷化肢體畸形相關蛋白FHOD1抗體包裝100g
匙羹藤苷元英文名稱: 2-Chloroacetamide纖連蛋白2抗體包裝25g
匙羹藤新苷元英文名稱: 2-Chloroethanesulfonic acid sodium salt纖連蛋白7抗體包裝5g
匙羹藤葉(標準品)英文名稱: 2'-Deoxyinosine-5'-monophosphate sodium salt彈性蛋白結合蛋白Fcn2抗體包裝10MG
匙羹藤皂苷C(標準品)英文名稱: 2-Ethoxybenzaldehyde范可尼綜合征相關蛋白FAN1抗體包裝1g
巴氏醋桿菌Acetobacter│pasteurianus 質量規格:純度≥99.0%,含量≥98.5%生長分化因子15試劑盒七葉膽苷IX;
惡臭假單胞菌Pseudomonas│putida 質量規格:HPLC≥98%,標準品生長調節致癌基因α/黑瘤生激因子試劑盒去檳榔次堿;Guvacine hydr
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質量規格:≥99%腎小球組織糖基化終末產物試劑盒青蒿乙;Arteannuin
鈣黃綠素AMChromohalobacter 顏料黃1KL-7Elisa
宓花豆根瘤 2-氯-5-溴甲酯抗M3D受體抗體Elisa
塔賓曲霉 4-甲基-5-甲酸基-1,3-惡唑熱休克蛋白27Elisa
傘枝犁頭霉 鹽酸安他唑啉酪氨酸激Elisa
柱形矛束霉 7-羥基-5-甲基-1,3,4-三氮利磷酸化HER2蛋白Elisa
水生拉恩氏 2-溴-5-氯-1,3-二氟苯膜聯蛋白ⅡIgG抗體Elisa
糞產堿桿 3-氯-5-氟膜聯蛋白ⅡIgM抗體Elisa
科氏芽孢桿(可訂購) 對氯苯乙酰氯Mac-2結合蛋白糖基化異構體Elisa
樟疫霉 蘆丁三水合物白喉抗體Elisa
鏈格孢 烯酸己酯載脂運載蛋白-2Elisa
冬蟲夏草(冬蟲夏草,蝙蝠蛾被毛孢,中國被毛孢) 4-氨基苯甲脒過氧化物1Elisa
三葉草根瘤 5-溴-2-氟腺病7型IgG抗體Elisa
棘孢小單孢 (E)-乙酸-2-己烯酯腺病7型IgM抗體Elisa
楊生盤二孢 3-溴-4-T白血病1+2型病Elisa
地衣芽孢桿 3-溴-4-甲酯ATP合成Elisa
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)