詳細介紹
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Plank-Rychlo脫鈣液
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:500ml
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
用途: 快速脫鈣液,組織脫鈣,酸性脫鈣液 注意事項: 主要由氯化銨、甲酸等組成。 儲存條件:室溫,12個月 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
藁本(標準品)英文名稱: Tiopronin組蛋白去基化JARID1B抗體包裝25g
藁本內(nèi)酯英文名稱: Tiopronin硫角質(zhì)抗體包裝5g
告達亭苷元(標準品)英文名稱: Doxofylline角質(zhì)生長因子調(diào)節(jié)蛋白2抗體包裝25g
戈米辛D(標準品)英文名稱: Doxofylline離子通道蛋白G蛋白4抗體包裝5g
戈米辛G(標準品)英文名稱: PRT062607 (P505-15, BIIB057) HCl通道多聚體結(jié)構(gòu)域KCTD18抗體包裝1g
戈米辛H英文名稱: Columbamine胞質(zhì)接頭蛋白Keap1包裝250mg
戈米辛J(標準品)英文名稱: Proflavine hydrochloride舞蹈癥相關(guān)蛋白KALRN抗體包裝5g
戈米辛N(標準品)英文名稱: Azlocillin sodium內(nèi)流通道蛋白Kir4.1抗體包裝100g
戈米辛O英文名稱: Geldanamycin樣蛋白3抗體包裝25g
格列風(fēng)內(nèi)酯(標準品)英文名稱: Bafilomycin A1, from Streptomyces griseusKLF樣轉(zhuǎn)錄因子7抗體包裝5g
葛根(標準品)英文名稱: Efaproxiral SodiumKelch樣蛋白8抗體包裝25g
葛根(標準品)英文名稱: Amlexanox離子通道蛋白家族KCNQ2抗體包裝5g
葛根-6''-O-木糖苷英文名稱: (+)-Usnic acid 離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體包裝1g
葛根芹菜糖苷英文名稱: (+)-Usnic acid 通道蛋白1抗體包裝25g
蛤蚧(標準品)英文名稱: Anisomycin, from Streptomyces griseolus電壓門控通道蛋白1抗體包裝5g
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品抗血小板抗體試劑盒甘露糖;D-Mannitol
土星擬威爾酵母土星變種Williopsis│saturnus var. saturn 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品抗血小板抗體試劑盒枸櫞;Citric acid mono
產(chǎn)堿假單胞菌Pseudomonas│alcaligenes 質(zhì)量規(guī)格:1M in H2O(260Mg/ml),進口原裝抗胸腺球蛋白試劑盒瓜子金皂苷己;Polygalasapon
Plank-Rychlo脫鈣液隱花青鵝膏 4-酮-3-羧酸甲酯鹽酸鹽螯合肽合成Elisa
羅伊氏乳桿 6-羥甲基煙酸甲酯二羥環(huán)氧苯并芘Elisa
香菇 硝唑尼特硒蛋白PElisa
同絲毛殼 3,3-二苯基鳥氨酸氨甲酰轉(zhuǎn)移Elisa
乙型溶血性鏈球 -甲基-2-S-鳥氨酸轉(zhuǎn)氨Elisa
茶樹菇 賴氨酸氯尼辛1-氨基-環(huán)烷羧酸合成Elisa
粘質(zhì)沙雷氏 2-溴-5-羥基吡啶色P4501A1Elisa
Okibacterium 2-溴-5-羥基吡啶焦磷酸Elisa
馬克斯克魯維酵母 十一烯酸鋅赤霉3-氧化Elisa
尖孢鐮刀 硬脂酸鐵磷脂A1Elisa
Paraburkholderia sp. Boc-4-氨基-L-苯氨酸磷酸蔗糖合成Elisa
葡萄白腐(可訂購) 3-(1-萘基)-L-氨酸蘋果褪綠葉斑病Elisa
雪腐微座孢 3,4-二酸蘋果莖痘病Elisa
密旋鏈霉 2-二甲基氨基谷氨酰合成Elisa
釀酒酵母 5-氯甲基四氮唑百香果斑駁病Elisa