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詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
| One Step TUNEL Apoptosis Assay Kit | 20次|50次 | 1～3天 |
商品介紹：
本試劑盒提供了一種高靈敏度又快速簡便的細胞凋亡檢測方法。對于經過固定和洗滌的細胞或組織，只要經過一步染色反應，洗滌后就可以通過熒光顯微鏡或流式細胞儀檢測到呈現綠色熒光的凋亡細胞。本試劑盒足夠檢測20個樣品。 試劑盒組份： TdT酶——————————40μl 熒光標記液————————960μl TdT酶稀釋液(選用)————500μl 細胞在發生凋亡時，會激活一些DNA內切酶，這些內切酶會切斷核小體間的基因組DNA。細胞凋亡時抽提DNA進行電泳檢測，可以發現180-200bp的DNA ladder。基因組DNA斷裂時，暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)的催化下加上綠色熒光探針熒光素(FITC)標記的dUTP(fluorescein-dUTP)，從而可以通過熒光顯微鏡或流式細胞儀進行檢測，這就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法檢測細胞凋亡的原理。注：FITC是fluorescein isothiocyanate的縮寫，實際上大多數情況下所謂的FITC即為fluorescein。 本試劑盒有如下優點。 (1)高靈敏度：背景染色極低，陽性染色明亮，可以在單細胞水平檢測到細胞凋亡，同時由于凋亡早期就有DNA斷裂，可以檢測到早期的細胞凋亡。 (2)特異性：TUNEL檢測時通常更容易標記凋亡細胞，而不容易標記壞死細胞。 (3)快速：僅需約1-2個小時即可完成。 (4)方便：只需一步染色反應，洗滌后即可觀察，不必使用二抗等進行多步操作。 (5)應用范圍廣：可以用于檢測冷凍或石蠟切片中的細胞凋亡情況，也可以檢測培養的貼壁細胞或懸浮細胞的凋亡情況。 TUNEL法特異性檢測細胞凋亡時產生的DNA斷裂，但不會檢測出射線等誘導的DNA斷裂(和細胞凋亡時的斷裂方式不同)。這樣一方面可以把凋亡和壞死區分開，另一方面也不會把射線等誘導發生DNA斷裂的非凋亡細胞判斷為凋亡細胞。 極少數細胞凋亡時沒有DNA斷裂，此時不適用TUNEL法檢測。在個別類型的壞死細胞中也發現TUNEL檢測呈陽性。在需要嚴格判斷細胞凋亡的情況下，好同時檢測多個凋亡指標。 儲存條件：-20℃。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
細胞周期D2(Cyclin-D2)英文名稱：Cyclin-D2 ELISA KitAICAR酰基轉移抗體包裝5MG
細胞周期D1(Cyclin-D1)英文名稱：Cyclin-D1 ELISA Kit磷化毛細血管擴張性共濟失調癥突變蛋白抗體包裝1g
細胞因子信號轉導抑制因子3(SOCS-3)英文名稱：SOCS-3 ELISA KitATP5E蛋白抗體包裝250mg
細胞因子信號轉導抑制因子1(SOCS-1)英文名稱：SOCS-1 ELISA KitATP5G2蛋白抗體包裝25g
細胞外信號調節激(ERK)英文名稱：ERK ELISA KitATP6V0D2蛋白抗體包裝5g
C(Cyt-C)英文名稱：Cyt-C ELISA KitATP6V1B2蛋白抗體包裝1g
細胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)英文名稱：CYFRA21-1 ELISA KitATPIF1蛋白抗體包裝5g
細胞角蛋白18-M65(CK 18-M65)英文名稱：CK 18-M65 ELISA KitAttractin蛋白抗體包裝10mg
細胞角蛋白18-M30(CK 18-M30)英文名稱：CK 18-M30 ELISA Kit磷化有絲分裂激B抗體包裝50mg
細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)英文名稱：ICAM-3/CD50 ELISA Kit肌動蛋白相關蛋白M1抗體包裝100mg
細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)英文名稱：ICAM-2/CD102 ELISA KitALKB蛋白抗體包裝1g
細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)英文名稱：ICAM-1/CD54 ELISA Kit乙酰酰基轉移1抗體包裝5g
細胞毒性T淋巴細胞相關抗原4(CTLA-4/CD152)英文名稱：CTLA-4/CD152 ELISA Kit磷化β-肌動蛋白抗體包裝250g
硒蛋白M(SELM)英文名稱：SELM ELISA Kit磷化腎上腺能受體β2/β2-AR 抗體包裝25g
戊糖(Pentosidine)英文名稱：Pentosidine ELISA Kit磷化腎上腺能受體β2/β2-AR抗體包裝5g
激活受體相互作用蛋白1抗體白介6(IL6)RTA-408 是一種抗氧化炎癥調節劑 (AIM)，可激活 Nrf2 并抑制一氧化氮 (NO)。RTA-408 通過抑制 STING 依賴的
一步法TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒(綠色熒光)黑紫紅菇 間羥基苯酮Rho關聯含卷曲螺旋蛋白激酶1檢測試劑盒
葡萄座腔屬 三氟酮酸甲酯Rho關聯含卷曲螺旋蛋白激酶2檢測試劑盒
傳染性喉氣管炎病 1-[2-氨基-1-(4-甲氧基苯基)乙基]環己鹽酸鹽Rho關聯含卷曲螺旋蛋白激酶5檢測試劑盒
齒雙歧桿 1,8-萘內酰亞RNA結合基序蛋白6檢測試劑盒
枯草芽孢桿 N-Fmoc-L-天冬氨酸-1-叔丁酯RNA聚合酶轉錄終止因子Ⅰ檢測試劑盒
副豬嗜血桿 1,1'-二茂鐵甲酸R-脊椎蛋白2檢測試劑盒
糞產堿糞亞種 3-甲硫基苯酸S100A11鈣結合蛋白檢測試劑盒
小孢根霉華變種 敵百畝/二甲基二硫代氨酸鈉二水合物S100A12鈣結合蛋白檢測試劑盒
根瘤 二茂鐵甲S100A14鈣結合蛋白檢測試劑盒
嗜熱脂肪地芽孢桿 蔗糖酯S100鈣結合蛋白B檢測試劑盒
枯草芽孢桿 氨魯米特S-100蛋白檢測試劑盒
矩圓黑盤孢 十四烷酸乙酯S100鈣結合蛋白A8;A9復合物檢測試劑盒
鮭色鎖擲酵母 間苯二異酸酯S100鈣結合蛋白A9檢測試劑盒
腸道致病性大腸埃希氏 3,5-二氟苯乙酮Salusinα蛋白檢測試劑盒
梭 膽堿SAX1蛋白檢測試劑盒
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