詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
英文名稱:GSK1324726A
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
GSK1324726A是一種有效的選擇性BET蛋白抑制劑,高親和力結合到BRD2(IC50=41nM),BRD3(IC50=31nM)和BRD4(IC50=22nM)。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1300031-52-0 別名:I-BET726 純度:98.21% 分子量:434.91 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
棕黑腐質霉花生四烯15脂氧合2抗體Anti-NOGOR(RTN4R) Antibody腦膜瘤基因1(MN1)
毛腿環銹傘硫氧還蛋白還原抗體Anti-Nogo A/RTN4 Antibody腦富含膜附著信號蛋白1(BASP1)
球孢白僵菌5-羥色受體2C抗體Anti-NOL3 Antibody腦啡肽2(NEP2)
蕈狀芽孢桿菌5-羥色受體5B抗體Anti-NONO Antibody腦啡肽(NEP)
黑曲霉絲/精相關核基質蛋白4抗體Anti-NOS1 Antibody腦多巴神經營養因子(CDNF)
維及尼鏈霉菌絲/精相關核基質蛋白3抗體Anti-NOS1 Antibody腦蛋白44樣蛋白(BRP44L)
米曲霉磷化絲/蘇蛋白激II β(casein kinase IIβ)抗體Anti-non-muscle Myosin IIB/MYH10 Antibody腦蛋白44(BRP44)
四川散斑殼單核蛋白5抗體Anti-NOS2 Antibody囊性纖維化跨膜傳導調節因子(CFTR)
健康皮張抗原SAMD9蛋白抗體Anti-NOS2 Antibody囊泡乙酰轉運蛋白(VAChT)
尖孢鐮刀菌SARM1蛋白抗體Anti-NOS3 Antibody囊泡單轉運蛋白2(VMAT2)
間型彎孢染色質組裝因子1P155抗體Anti-NOTCH1 Antibody耐氧化性能蛋白1(OXR1)
鏈格孢蛙皮降壓肽抗體Anti-NOTCH2 Antibody耐扭蛋白3A(TOR3A)
哈茨木霉信號誘導增殖相關蛋白1樣蛋白2抗體Anti-NOTCH1 Antibody耐扭蛋白2A(TOR2A)
滑菇、光帽黃傘DNA聚合δ相互作用蛋白3抗體Anti-NOTCH4 Antibody耐扭蛋白1B(TOR1B)
橙色綠屈擾菌絲/蘇蛋白激SRPK2抗體Anti-NOVA1 Antibody耐扭蛋白1A(TOR1A)
猴頭分化蛋白SEPT8抗體Anti-NOVA2 Antibody鈉協同轉運蛋白(NCCT)
視神經相關蛋白1抗體簡單芽孢桿菌人主動脈內皮細胞提取物
螺旋轉錄因子OTP抗體玫瑰色孫修琴菌人臍動脈內皮細胞提取物
少突膠質細胞轉錄因子3抗體綠針假單胞菌橙色亞種人大隱靜脈內皮細胞提取物
嗅覺受體家族5亞基1抗體嗜鹽螺旋桿菌人主動脈平滑肌細胞提取物
BET蛋白抑制劑(GSK1324726A)釀酒酵母 化亞錫一氧化氮Elisa
芽孢桿 化鎳誘導型NO合Elisa
蘋果黑腐皮殼 化鎂幾丁質Elisa
尕海湯飛凡 化組織蛋白HElisa
鐵鉆土鏈霉 線粒體促凋亡蛋白Elisa
披發糖多孢披發亞種 化亞銅半胱氨酸蛋白3Elisa
釀酒酵母 無水化鋰核酸內切GElisa
向日葵鏈格孢 化鋰抗凋亡因子Elisa
涅氏短狀桿 化鈷轉化因子2Elisa
猴頭菇 無水化鈣彈性蛋白Elisa
香菇(可訂購) 化鈣鎖鏈Elisa
費氏中華根瘤 二叉頭框蛋白01Elisa
鹽古桿 正辛酸補體片段2aElisa
香菇 3,5-二甲酸補體片段3bElisa
相思根瘤 磺基水楊酸鈉補體片斷3aElisa