商品介紹:
T-863是二酰基甘油酰基轉(zhuǎn)移酶1(DGAT1)選擇性抑制劑,能結(jié)合DGAT1的酰基輔酶結(jié)合位點(diǎn),抑制三酰甘油在細(xì)胞內(nèi)的合成。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):701232-20-4 別名:DGAT-1 inhibitor 純度:99.08% 分子量:394.47 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
DGAT1抑制劑(T863) | T863 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
谷棒桿菌結(jié)核分枝桿菌分泌性蛋白ESAT6抗體Human NDST1 (Bifunctional heparan sulfate N-deacetylase/N-sulfotransferase 1) ELISA KIT人EJ抗體/抗甘酰tRNA合成抗體(EJ/GlyRS)免疫試劑盒
蠟狀芽孢桿菌真核翻譯起始因子1抗體Human NRAP (Nebulin-related-anchoring protein) ELISA KIT人Egl九同源物1(EGLN1/C1orf12/PNAS-118/PNAS-137)免疫試劑盒
油菜菌核病菌上皮粘連調(diào)控蛋白ESRP2抗體Human MYRIP (Rab effector MyRIP) ELISA KIT人EB病早期抗原(EBEA)抗體(IgG)免疫試劑盒
施氏假單胞菌T和嗜性粒表達(dá)特應(yīng)性皮炎蛋白ETEA抗體Human MTMR1 (Myotubularin-related protein 1) ELISA KIT人EB病衣殼抗原(EBVCA)抗體(IgM)免疫試劑盒
泡盛曲霉電子轉(zhuǎn)移黃蛋白脫氫抗體Human KAT7(Histone acetyltransferase KAT7) ELISA Kit人EB病衣殼抗原(EBVCA)抗體(IgG)免疫試劑盒
惡臭假單胞菌EGF受體7跨膜結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體Human NEIL3 (Endonuclease 8-like 3) ELISA KIT人EB病核抗原3A抗體(IgM)免疫試劑盒
條紋白蟻傘乙激2抗體Human NAALAD2 (N-acetylated-alpha-linked acidic dipeptidase 2) ELISA KIT人EB病核抗原3A抗體(IgG)免疫試劑盒
傘枝犁頭霉磷化Ets轉(zhuǎn)錄因子家族e(cuò)ts1抗體Human NAALADL1 (N-acetylated-alpha-linked acidic dipeptidase-like protein) ELISA KIT人EB病核抗原1(EBNA1)抗體(IgG)免疫試劑盒
米曲霉磷化上皮癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體Human MEAF6 (Chromatin modification-related protein MEAF6) ELISA KIT人EB病IgA(EBv IgA)免疫試劑盒
炭黑曲霉嗜性粒過(guò)氧化物抗體Human NOXO1 (NADPH oxidase organizer 1) ELISA KIT人EB病(Ebv)抗體(IgM)免疫試劑盒
Actinomadura cellulosilytica核內(nèi)切G抗體Human MYNN (Myoneurin) ELISA KIT人EB病(EBv)抗體(IgG)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌酪蛋白激受體A10抗體Human NDST1 (Bifunctional heparan sulfate N-deacetylase/N-sulfotransferase 1) ELISA KIT人E3泛蛋白連接TRIM68(TRIM68)抗體免疫試劑盒
河生腸桿菌胞吐囊復(fù)合體蛋白2抗體Human NRAP (Nebulin-related-anchoring protein) ELISA KIT人E3泛蛋白連接TRIM68(TRIM68)免疫試劑盒
網(wǎng)孢正青霉磷化4E結(jié)合蛋白1抗體Human MYRIP (Rab effector MyRIP) ELISA KIT人D-乳脫氫(D-LDH)免疫試劑盒
白假絲酵母磷化絲裂原活化蛋白激1/2抗體Human KAT7(Histone acetyltransferase KAT7) ELISA Kit人D-乳免疫試劑盒
冷溫木拉克酵母泛交聯(lián)抗體Human MEAF6 (Chromatin modification-related protein MEAF6) ELISA KIT人D二聚體(D2D)免疫試劑盒
多殺性巴氏桿菌Pasteurella│multocida 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99.5%(GC)α-細(xì)辛腦
: Bt0209資源名稱: 蘇云金芽胞桿菌 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,>99%(GC)L-茶
解脂耶羅威亞酵母Yarrowia│lipolytica 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品美伐他汀
DGAT1抑制劑(T863)泛鈣,維生B5英文名稱: Indapamide4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框51抗體包裝1g
泛鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Indapamide分支GBE1抗體包裝25g
泛昔洛韋(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Iopamidol磷化絲切蛋白抗體包裝5g
泛影(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Iopamidol補(bǔ)體成分5受體1抗體包裝1g
非布索坦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Loperamide HCl分裂周期2樣蛋白激6抗體包裝250mg
非洛地平(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Loperamide HCl補(bǔ)體C3IP1抗體包裝5g
非洛地平雜質(zhì)Ⅰ(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ketorolac Tromethamine 磷化周期檢測(cè)點(diǎn)激2抗體包裝500mg
非那西丁(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ketorolac Tromethamine 周期依賴性激11抗體包裝1g
非諾貝特雜質(zhì)Ⅰ(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lansoprazole 周期依賴性激10包裝5g
非諾貝特雜質(zhì)Ⅱ(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lansoprazole 8號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框86抗體包裝100g
非諾洛芬鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L base磷化分裂周期蛋白25B抗體包裝10g
非普拉宗(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Levonorgestrel磷化分裂周期蛋白25B抗體包裝25g
芬達(dá)唑;硫咪唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Levonorgestrel磷化半胱蛋白蛋白6抗體包裝25MG
芬布芬(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Levosulpiride9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框172抗體包裝100g
酚磺乙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Levosulpiride磷化P27抗體/周期依賴激抑制劑包裝25g