詳細介紹
產品屬性:
英文名稱:GNE-3511
產品規格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
GNE-3511是一個強的和選擇性的DLK,MAP3K12抑制劑, 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1496581-76-0 純度:99.52% 分子量:440.49 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
副豬嗜血桿菌鋅指蛋白ZBTB8A抗體Anti-NFIC Antibody尼克酰-N-甲基轉移(NNMT)
小麥粉 水分、灰分 鋅指蛋白916B抗體Anti-NFKB1 Antibody(PB0161)內質網核心信號1(ERN1)
豇豆慢生根瘤菌鋅指蛋白903抗體Anti-NFKB2 Antibody內質網肽2(ERAP2)
香菇鋅指蛋白923抗體Anti-NFKB2 Antibody內脂(VF)
大腸埃希氏菌鋅指蛋白288抗體Anti-NFKB2 Antibody內粘蛋白(EMCN)
玫瑰擬層孔菌鋅指蛋白185抗體Anti-NFKB2 Antibody(PB0160)內臟脂肪特異性絲蛋白抑制因子(Vaspin)
黃赭色鏈霉菌鋅指蛋白431抗體Anti-NFKBIA Antibody內酰β2(LACTβ2)
球孢白僵菌鋅指蛋白379抗體Anti-NFKBIA Antibody(PB0303)內酰β(LACTβ)
淡紫紫霉鋅指蛋白804A抗體Anti-NGF Antibody內收蛋白3(ADD3)
葛氏沙雷氏菌鋅指蛋白693抗體Anti-NGF Antibody內收蛋白2(ADD2)
產黃青霉鋅指蛋白ZBTB3抗體Anti-NGF Antibody內收蛋白1(ADD1)
鴿痘病著絲粒ZWILCH蛋白抗體Anti-NFKBIB Antibody(PB0304)內切核V(ENDOV)
霍氏分支桿菌鋅指蛋白57抗體Anti-NGF Antibody內切核G(ENDOG)
小孢擬盤多毛孢鋅指蛋白717抗體Anti-NGFR Antibody內皮脂肪(LIPG)
枯草芽孢桿菌鋅指蛋白370抗體Anti-NGFR Antibody內皮型一氧化氮合(NOS3)
皺褶假絲酵母鋅指蛋白3抗體Anti-NHEJ1 Antibody內皮粘附分子(ESAM)
食欲前體蛋白OX抗體枯草芽胞桿菌枯草亞種人成骨細胞提取物
轉錄因子OTX1抗體土生克雷伯氏菌人腎足突細胞提取物
轉錄因子OTX2抗體圣堡羅沙門氏菌人膀胱成纖維細胞提取物
轉錄因子OTX1+OTX2抗體阿貢納沙門氏菌人膀胱上皮細胞提取物
DLK/MAP3K12抑制劑(GNE-3511)植物乳桿 結晶亞硫酸鈉骨堿性磷酸Elisa
靈芝 無水硫酸鈉亮氨酸Elisa
串珠鐮孢 結晶硫酸鈉溶血Elisa
Corynebacterium trachiae 碳酸氫鈉類卟啉原氧化Elisa
牛分枝桿 無水碳酸鈉熱休克蛋白60Elisa
釀酒酵母 檸檬熱休克蛋白40Elisa
肺炎克雷伯氏 2-苯甲降鈣Elisa
皮落青霉 水合17α,20β-雙羥孕酮Elisa
扭曲毛殼 三乙二白介2Elisa
串珠鐮刀* 1,2-白介4Elisa
護岸植物紅樹桿 聚2000白介18Elisa
Ag11(蘑菇) 1,2,6-己三乙酰Elisa
慢生根瘤 十二生長抑制Elisa
鏈霉 一縮二鈣粘蛋白Elisa
膠孢 新戊二半胱氨酸蛋白2Elisa
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)