產(chǎn)品屬性:
中文名稱:MAGL抑制劑(KML29)
英文名稱:KML29
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
KML29是一種有效的選擇性MAGL抑制劑,抑制人,小鼠,和大鼠腦蛋白酶時(shí),IC50分別為5.9,15,和43nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1380424-42-9 分子式:C??H??F?NO? 分子量:549.42 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
巴氏醋桿菌GDP甘露糖焦磷化抗體Human WDR46 ELISA Kit過氧化氫(CAT)免疫試劑盒
柱孢犁頭霉G蛋白偶聯(lián)受體171抗體Human WDR18 ELISA Kit谷胱甘肽還原(GR)免疫試劑盒
新城疫病神經(jīng)膜糖蛋白M6bHuman WDR55 ELISA Kit谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移(GSTs)免疫試劑盒
球孢白僵菌鳥苷激GMK抗體Human WARS2 ELISA Kit睪(T)免疫試劑盒
密褐褶菌半乳糖腦苷脂抗體Human WDR16 ELISA Kit分泌型免疫球蛋白A(sIgA)免疫試劑盒
高盧蜜環(huán)菌G蛋白偶聯(lián)受體激5抗體Human WBP1 ELISA Kit單核趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫試劑盒
韓芝GTP結(jié)合蛋白R(shí)EM1抗體Human WBP11 ELISA Kit促卵泡(FSH)免疫試劑盒
楚氏喜鹽芽孢桿菌磷化糖原合激-3α抗體Human WASL ELISA Kit雌激(E)免疫試劑盒
微桿菌生長分化因子7抗體Human ACHE(Acetylcholinesterase) ELISA Kit雌二(E2)免疫試劑盒
外外安德倫茨氏菌葡萄糖激調(diào)節(jié)蛋白抗體Human WBP2 ELISA Kit層連蛋白/板層(LN)免疫試劑盒
樟疫霉γ谷酰半胱合成抗體(γ-GCSc)Human VSTM2L ELISA Kit補(bǔ)體蛋白4(C4)免疫試劑盒
佐貝爾梅奇酵母GCOM1蛋白抗體Human VSX2 ELISA Kit補(bǔ)體蛋白3(C3)免疫試劑盒
異常威克漢姆酵母葡萄糖果糖還原2抗體Human VSX1 ELISA Kit白三烯C4(LTC4)免疫試劑盒
大腸埃希菌膠質(zhì)系源性神經(jīng)營養(yǎng)因子受體α1樣蛋白抗體Human VSX1 ELISA Kit白介8(IL-8/CXCL8)免疫試劑盒
金龜子假絲酵母GHDC蛋白抗體Human VSX2 ELISA Kit白介2受體(IL-2R)免疫試劑盒
大腸埃希菌甘油激5抗體Human LECT2(Leukocyte cell-derived chemotaxin-2) ELISA Kit白介15(IL-15)免疫試劑盒
: =ATCC19098=CIP106986=DSM20167=KCTC3196=LMG16694=MTCC1528=NBRC12678=NRRLB-14730.資源名稱: 硫磺色節(jié)桿菌 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC≥97.0%(GC)11-O-羅漢果苷V
間座殼Diaporthe│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品, ≥99.5% (GC)二咖啡酰菊苣
Pseudonocardia alaniniphilaPseudonocardia│alaniniphila 質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,≥99%(GC)3,4,5-三咖啡??鼘?/span>
MAGL抑制劑(KML29)右佐匹克(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: (R)-(?)-Mandelic acid雌受體α抗體包裝250mg
魚腥草鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1-Aminohydantoin Hydrochloride內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Aβ相關(guān)結(jié)合蛋白抗體包裝1g
愈創(chuàng)甘油(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1-Aminohydantoin HydrochlorideEphrin A2抗體包裝5g
愈創(chuàng)木酚磺(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: ACTH (1-24), human大腸埃希菌菌體蛋白抗體包裝1g
遠(yuǎn)華蟾蜍精(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bradykinin雌硫轉(zhuǎn)移抗體包裝25g
月桂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bradykinin acetateE Tag標(biāo)簽抗體包裝5g
孕三烯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: α-MSH登革熱病包膜糖蛋白E抗體包裝25g
扎來普(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Endothelin-1, human,porcine食道癌相關(guān)基因抗體包裝5g
扎那米韋(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: BombesinEB病核抗原-3A抗體包裝500g
扎托布洛芬(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: VIP, human, porcine, rat; VIP (28 amino acids)膠質(zhì)谷運(yùn)載蛋白1抗體包裝1g
正己(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Agarose轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體包裝5g
正十九烷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: PEG 400內(nèi)皮轉(zhuǎn)化1抗體包裝1mg
正十五烷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cholestyramine resin外基質(zhì)蛋白1抗體包裝5mg
芝麻酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sucrose外胚層發(fā)育不良抗體包裝25g
酯蟾配基;蟾力蘇(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: D-(+)-Trehalose, dihydrate E2 tag標(biāo)簽抗體包裝5g
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)