產(chǎn)品屬性:
中文名稱:BRAF抑制劑(Dabrafenib Mesylate)
英文名稱:Dabrafenib Mesylate
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
Dabrafenib Mesylate是一種新穎的,高效的,具有選擇性的BRAF抑制劑,能夠抑制CRAF和BRAFV600E的活性,IC50值分別為5nM和0.6nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1195768-06-9 別名:GSK2118436 Mesylate;GSK 2118436B 純度:99.78% 分子量:615.67 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
香菇乙/植物生長單克抗體Human PYCR2 ELISA Kit原鈣黏1(PCDH1)
山綠豆根瘤菌白介4受體抗體IL-4RαHuman PTGES3(Prostaglandin E synthase 3) ELISA Kit魚精蛋白1(PRM1)
Algoriphagus白介2受體γ鏈抗體Human QKI ELISA Kit誘導(dǎo)型一氧化合成(iNOS)
深綠色木霉白介1受體1抗體Human QPRT(Quinolinate phosphoribosyltransferase) ELISA Kit誘導(dǎo)型一氧化氮合成(iNOS)
淺黃隱球酵母白介1受體2抗體Human PURA ELISA Kit有絲分裂原活化蛋白激14(MAPK14)
微球菌白介20受體α鏈抗體Human PUS1 ELISA Kit游離脂肪(FFA)
化膿性鏈球菌白介20受體β鏈抗體Human PVRIG ELISA Kit游離原卟啉(FEP)
康寧木霉乙抗體/植物生長抗體Human PUS3 ELISA Kit游離血紅蛋白(f-Hb)
枝芽胞桿菌整合α6抗體Human PTPRR ELISA Kit游離狀腺原(Free-T3)
大球蓋菇擬南芥IKI3抗體Human PVRL3/Nectin 3 ELISA Kit游離肉堿(Free Carnitine)
米曲霉白介5抗體Human PTPRS ELISA Kit游離前列腺特異性抗原(fPSA)
松口蘑白介-1受體相關(guān)激1抗體Human PURA ELISA Kit游離甲狀腺(FT4)
巴斯德畢赤酵母整合α5抗體Integrin α5Human PUS1 ELISA Kit游離睪(F-TESTO)
平滑假絲酵母整合β1/Integrin β1抗體Human PUS3 ELISA Kit游離蛋白S(FP-S)
糙皮側(cè)耳整合αVβ3抗體Human PTPRZ1(Receptor-type tyrosine-protein phosphatase zeta) ELISA Kit游離雌三(FE3)
孢籃狀菌胰島樣生長因子2 mRNA 結(jié)合蛋白3抗體Human PVRIG ELISA Kit游離β絨毛膜促性腺激(f-βhCG)
芽孢桿菌屬Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)哈巴苷
麥克姆多類芽孢八疊球菌Paenisporosarcina│macmurdoensis 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(HPLC),用于高效液相色譜標(biāo)記哈巴俄苷
吉林?jǐn)S孢酵母Sporobolomyces│jilinensis 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T),用于高效液相色譜標(biāo)記香蒲新苷
BRAF抑制劑(Dabrafenib Mesylate)釀酒酵母 5-氨基-2-羊結(jié)合病抗體Elisa
Mesorhizobium 鄰苯甲羊布魯病抗體Elisa
中間檸檬酸桿 吡啶-4-甲結(jié)核桿抗體IgGElisa
密叢毛霉 3-甲?;剿岣篂a粘膜病抗體Elisa
巴氏葡萄球 1,7-辛二炔腹瀉粘膜病抗原Elisa
米根霉 氨乙基硫維生AElisa
芋枝孢 叔丁氧羰基肼炭疽桿抗原Elisa
耐久腸球 2-乙鹽酸鹽β-胡蘿卜Elisa
靈芝 氧化二辛基錫(DOTO)Y一谷氨酞轉(zhuǎn)膚Elisa
枯草芽孢桿 7--4-羥基喹啉粘膜腹瀉病病Elisa
Bacillus atrophaeus 2,4-二羥基喹啉多瘤病Elisa
細(xì)鏈格孢 (S)-4--3-羥基丁酸乙酯冷誘導(dǎo)RNA結(jié)合蛋白Elisa
Chrysonilia sitophila 膦?;宜崛阴ト;视王lisa
海海芽孢桿 四戊基溴化銨脂蛋白脂肪Elisa
竹喙球 2-噻噸酮L-谷氨酸Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)