商品介紹:
PLX7904是有效的,選擇性的BRAF抑制劑,在表達(dá)突變體RAS的細(xì)胞中,對BRAFV600E的IC50值約為5nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1393465-84-3 純度:98.15% 分子量:512.53 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:BRAF抑制劑(PLX7904)
英文名稱:PLX7904
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
層出鐮孢陽離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體Anti-ABCB6 Antibody發(fā)動蛋白2(DNM2)
鼠乳桿菌骨橋蛋白/分泌型磷蛋白1抗體Anti-ABCB4 Antibody(PB0274)二酰基甘油(DAG/DG)
簇生鏈格孢骨橋蛋白抗體(分泌型磷蛋白1)Anti-ABCC1 Antibody二肽基肽Ⅳ(DPPⅣ)
小紅酵母增食欲A/欲激AAnti-ABCC2 Antibody二氫嘧啶脫氫[NADP+](DPYD)
宇佐美曲霉變種成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體Anti-ABCC4 Antibody二氫嘧啶樣3(DPYSL3)
大腸埃希氏菌雞卵白蛋白/卵清蛋白抗體Anti-ABCC1 Antibody二氫嘧啶樣2(DPYSL2)
橙色單胞菌丘腦分泌受體1+2/食欲受體1+2抗體Anti-ABCC2 Antibody二羥基賴正己(DHLNL)
糞產(chǎn)堿桿菌*陽離子轉(zhuǎn)運(yùn)器1抗體Anti-ABCC8 Antibody二磷腺苷(ADP)
旱生紅曲霉氧化低密度脂蛋白抗體Anti-ABCC4 Antibody(PB0153)二磷尿核苷葡糖基轉(zhuǎn)移2家族肽B4(UGT2B4)
空腸彎曲桿菌骨鈣蛋白/骨鈣抗體Anti-ABCC8 Antibody二級淋巴組織趨化因子(SLC/CCL21)
熒光假單胞桿菌視變誘導(dǎo)蛋白抗體Anti-ABCC8 Antibody二氧化(DAO)
大腸埃希菌胚胎干關(guān)鍵蛋白2抗體Anti-ABCG1 Antibody兒茶酚抑(CAT)
金針菇—金白1號胚胎干關(guān)鍵蛋白1抗體Anti-ABCE1 Antibody兒茶酚(CA)
Actinomadura amylolytica衰老相關(guān)Sigma受體蛋白抗體Anti-ABCG2 Antibody多藥耐藥相關(guān)蛋白(MRP)
糙皮側(cè)耳有機(jī)溶質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白OSTβ抗體Anti-ABCD3 Antibody多形核白彈性蛋白(PMN Elastase)
小麥蒼白桿菌嗅球蛋白1抗體Anti-ABCG2 Antibody多效生長因子(PTN)
: ivcas7.00443資源名稱: 蘇云金芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%
平滑假絲酵母Candida│parapsilosis 質(zhì)量規(guī)格:0.99
假單胞菌Pseudomonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格:10-15 units/mg protein,進(jìn)分
BRAF抑制劑(PLX7904)蜂蜜水分檢測裝置 孟加拉紅培養(yǎng)基顆粒皮質(zhì)酮;腎上腺酮Elisa
大腸埃希 7.5%肉湯顆粒葡糖氨基葡聚糖Elisa
釀酒酵母 Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ)顆粒前列環(huán)Elisa
真灰綠正青霉 四硫磺酸鹽煌綠增液基礎(chǔ)(TTB)顆粒前列腺E2Elisa
樺滴孔 鹽胱氨酸增液(SC)顆粒前列腺F2aElisa
芽孢桿 結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂(VRBA)顆粒羥甲基戊二酸單酰還原Elisa
青霉?fàn)钫持忝?/span> 乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基顆粒羥脯氨酸Elisa
枯草芽孢桿 煌綠乳糖膽鹽肉湯(BGLB)顆粒去甲腎上腺Elisa
卡納霉鏈霉 月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯(LST)顆粒固酮Elisa
枯草芽孢桿 沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基顆粒缺血修飾白蛋白Elisa
葉近藤氏酵母 沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基顆粒熱休克蛋白27Elisa
懷槐多年臥孔 大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基(TSA)顆粒熱休克蛋白70Elisa
美麗鏈霉 胰酪胨大豆瓊脂培養(yǎng)基(TSA)顆粒熱休克蛋白90Elisa
莖生擬莖點(diǎn)霉 胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基(TSA)顆粒相關(guān)血漿蛋白AElisa
洋蔥伯克霍爾德 6-甲氧基-2-四氫萘酮溶Elisa