詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
英文名稱:Centrinone-B
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
Centrinone-B是一種高親和的選擇性PLK4抑制劑(Ki=0.59nM)。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1798871-31-4 純度:98.58% 分子量:631.67 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
Streptomyces flavovariabilis鋅指蛋白473抗體Anti-NEDD4L Antibody鎳紋蛋白(METRN)
居白蟻菌AN1型鋅指蛋白5抗體Anti-NEDD8 Antibody脲酰β(UPβ1)
釀酒酵母鋅指蛋白146抗體Anti-NEDD9 Antibody尿調蛋白(UMOD)
黑靈芝鋅指蛋白23抗體Anti-NEDD4 Antibody尿鹽轉運蛋白1(URAT1)
兩粵黃檀根瘤菌NFκB激活蛋白205抗體Anti-NELFB Antibody尿溶蛋白3B(UPK3B)
灰藤黃鏈霉菌鋅指蛋白321B抗體Anti-NES Antibody(PB0920)尿溶蛋白3A(UPK3A)
南方散斑殼鋅指蛋白297抗體Anti-Neurotrophin 3/NTF3 Antibody尿溶蛋白2(UPK2)
瓜類*鋅指蛋白ZBTB12抗體Anti-NES Antibody尿溶蛋白1B(UPK1B)
中國臺灣根霉負調控因子白介2抗體Anti-Nephrin(NPHS1) Antibody尿溶蛋白1A(UPK1A)
盤長孢狀盤孢鋅轉運蛋白1抗體Anti-Neuroglobin(NGB) Antibody尿皮質3(UCN3)
鐘器腐霉磷化ZCWCC1抗體Anti-NF2(Merlin) Antibody尿皮質2(UCN2)
黃曲霉鋅指蛋白598抗體Anti-NF2 Antibody尿皮質1(UCN1)
產紫青霉鋅指蛋白537抗體Anti-NFAT5 Antibody尿囊(ALLC)
炭黑曲霉ZSWIM3蛋白抗體Anti-NF1 Antibody尿嘧啶磷核糖轉移(UPRT)
噬瓊脂鏈卵菌E3泛蛋白連接ZSWIM2抗體Anti-NFATC1 Antibody尿嘧啶核苷磷化2(UPP2)
葡萄座腔菌鋅指/環指蛋白4抗體Anti-NFATC1 Antibody尿嘧啶DNA糖基化(UNG)
卵巢癌免疫反應抗原抗體頭狀葡萄球菌頭狀亞種人肺大動脈內皮細胞提取物
口腔癌高表達的蛋白1抗體最小弧菌人肺大動脈平滑肌細胞提取物
氧化固結合蛋白4抗體腸沙門氏菌腸亞種傷寒血清型人呼吸道上皮細胞提取物
抗細胞凋亡蛋白OLFM44抗體鴨沙門氏菌人肺大靜脈平滑肌細胞提取物
PLK4抑制劑(Centrinone-B)四川散斑殼 2-羥基吡啶成纖維生長因子23Elisa
檸檬明串珠 三氟乙酰酮辣椒受體5Elisa
野油菜黃單胞棲青莧致病變種 2-氟苯乙酮飽和脂肪酸Elisa
科羅拉多擬無枝酸 二苯甲酮過氧化物Elisa
Brenneria salicis 芐酮維生EElisa
新疆交替紅色桿 苯乙酮雪卡Elisa
Lonsdalea quercina subsp. quercina 異佛爾酮空泡Elisa
局限曲霉 硅酸鈉甲狀腺受體αElisa
頭孢霉屬 無水磷酸鈉甲狀腺受體βElisa
叢赤殼屬 原釩酸鈉甲狀腺球蛋白Elisa
矩圓黑盤孢 亞硝基鐵化鈉組織蛋白BElisa
葡萄座腔 三偏磷酸鈉7-芐氧基-4-三氟甲基-脫芐基Elisa
白色假絲酵母* 偏磷酸鈉αS轉移Elisa
根瘤 偏酸鈉膜攻擊復合物Elisa
假單胞 偏重亞硫酸鈉球蛋白Elisa