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詳細介紹
商品介紹：
本試劑盒適用于培養細胞及新鮮組織Caspase-6 檢測。Caspase 家族在介導細胞凋亡的過程中起著非常重要的作用，其中Caspase-6 為關鍵分子，與DNA 斷裂、染色質凝聚和凋亡小體形成有關。Caspase-6 在正常狀態下以酶原的形式存在于胞漿中，沒有活性；但在細胞發生凋亡階段，它被激活，活化的Caspase-6 裂解相應的胞漿胞核底物，導致細胞凋亡。Caspase-6熒光檢測試劑盒就是將Caspase-6 序列特異性的多肽偶聯至發色基團。當底物被Caspase-6 剪切后，發色基團即游離出來，可通過熒光酶標儀測定其熒光強度（激發波長=485nm,發射波長=535nm）。 注意事項 1. Caspase-6 Substrate 避光保存及使用。 2. 對某些凋亡誘導劑引起的細胞凋亡可能存在非依賴于Caspase-6 活化的機制，這種情況時利用本試劑盒檢測Caspase-6 活性無明顯改變，需要考慮凋亡機制中的其他信號通路。 3. 細胞數量需達到3~5×106 個或新鮮組織50~100mg，以便能達到測定需要的100~200μg 蛋白的要求，因為Caspase-6 的活性與細胞裂解液的蛋白含量有關，如測定的RFU 值偏低，可以通過適當延長反應的時間，如果值還是不高，可通過增加細胞數量或組織量的方法來提高蛋白量。 |
產品屬性：
英文名稱：Caspase-6 Fluorescence Metric Assay
產品規格：20T|50T|100T
發貨周期：1～3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調控；
⑤細胞分化及其調控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
胞內離子通道蛋白1(CLIC1)英文名稱：CLIC1 ELISA Kit粘附分子IgG樣結構域蛋白1抗體包裝500g
胞漿型磷脂A2(cPLA2)英文名稱：cPLA2 ELISA Kit卡爾曼綜合癥基因1抗體包裝100mg
半乳糖凝集-3(Gal-3)英文名稱：Gal-3 ELISA Kit含錨蛋白重復序列-因子信號抑制物盒蛋白家族7抗體包裝1g
半乳糖6硫酯(Gal-6S)英文名稱：Gal-6S ELISA Kit含錨蛋白重復序列-因子信號抑制物盒蛋白家族17抗體包裝1g
半胱天冬蛋白(caspase-3)英文名稱：caspase-3 ELISA Kit含錨蛋白重復序列-因子信號抑制物盒蛋白家族12抗體包裝5g
半胱蛋白抑制劑/胱抑C(Cys-C)英文名稱：Cys-C ELISA Kit鈉ATP通道蛋白抗體包裝1g
百白破抗體(DPT)英文名稱：DPT ELISA KitAGXT2L2蛋白抗體包裝25g
白血病抑制因子受體(LIFR)英文名稱：LIFR ELISA Kitβ淀粉樣蛋白胞內結構域相關蛋白1抗體包裝5g
白血病抑制因子(LIF)英文名稱：LIF ELISA Kit錨蛋白重復及SAM結構域蛋白6抗體包裝1g
白細胞活化黏附因子(ALCAM)英文名稱：ALCAM ELISA Kit二磷腺苷核糖基轉移3抗體包裝250mg
白三烯E4(LTE4)英文名稱：LTE4 ELISA Kit二磷腺苷核糖基轉移5抗體包裝1g
白三烯D4(LTD4)英文名稱：LTD4 ELISA Kit腺苷單磷脫1抗體包裝5g
白三烯C4(LTC4)英文名稱：LTC4 ELISA Kit紅蛋白Ank1抗體包裝1g
白三烯B4(LTB4)英文名稱：LTB4 ELISA Kit腺苷琥珀裂解抗體包裝100g
白介9(IL-9)英文名稱：IL-9 ELISA Kitα1B糖蛋白抗體包裝25g
血管緊張原抗體骨成型蛋白2(BMP2)Reversine 是一種ATP-競爭性的 Aurora kinase 抑制劑，作用于 Aurora A，Aurora B 和 Aurora C，IC50 分別
Caspase 6熒光法檢測試劑盒(AFC)土曲霉 2-溴甲基-4-甲氧基甲酯結合珠蛋白檢測試劑盒
膠孢 二氫獼猴桃內酯結核桿IgG抗體檢測試劑盒
傳染性支氣管炎病 3,4-二氟苯-1,2-二睫狀神經營養因子檢測試劑盒
根霉屬的 4-氯異喹啉解脲脲原體抗體檢測試劑盒
猴頭 2-氯甲基-3-甲基-4-(3-甲氧氧基)吡啶鹽酸鹽解整合素樣金屬蛋白酶12檢測試劑盒
色褐鏈霉 鹽酸去甲苯福林解整合素樣金屬蛋白酶33檢測試劑盒
*美味牛肝 2-氟-3-基-4-吡啶解整合素樣金屬蛋白酶9檢測試劑盒
香菇 4，5-二溴-1H-1，2，3-三氮唑金黃色葡萄球腸素檢測試劑盒
魯氏毛霉 1-甲巰基環基乙酸甲酯金黃色葡萄球腸素A檢測試劑盒
糾纏青霉 1-羥甲基環基乙金黃色葡萄球蛋白A檢測試劑盒
腐皮鐮孢 四氟酸亞鐵(II)金葡腸素檢測試劑盒
阿舒多囊霉 4-甲基-2-正基苯并咪唑-6-羧酸金屬硫蛋白檢測試劑盒
淡紫紫霉 2-正基-4-甲基-6-(1-并咪唑-2-基)苯并咪唑金屬肽酶含血小板反應蛋白1檢測試劑盒
玫紅假裸囊 5-氨基-1,2,4-噻二唑鹽酸鹽金屬肽酶含血小板反應蛋白5檢測試劑盒
乳酒假絲酵母 3,4-二甲基(2,3-b)-噻吩-2,5-二羧酸二乙酯緊密連接蛋白檢測試劑盒
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