詳細介紹
商品介紹:
Deguelin是一種從魚藤屬植物中分離到的天然產物,是AKT的抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:522-17-8 別名:(-)-Deguelin;(-)-cis-Deguelin 純度:98.0% 分子量:394.42 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
產品屬性:
中文名稱:AKT抑制劑(Deguelin)
英文名稱:Deguelin
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
矩圓黑盤孢視黃結合蛋白1抗體Anti-EPHA3 Antibody胰島樣生長因子不穩定亞基(IGFALS)
嗜麥芽糖寡養單胞菌視網膜母瘤結合蛋白6抗體Anti-EPHA5 Antibody胰島樣生長因子結合蛋白7(IGFBP7)
枯斑擬盤多毛孢核糖體結合蛋白1抗體Anti-EPHB2 Antibody胰島樣生長因子結合蛋白6(IGFBP6)
地衣芽胞桿菌核糖體蛋白L5抗體Anti-EPHB1 Antibody胰島樣生長因子結合蛋白5(IGFBP5)
環發仙菌磷化RNA聚合II CTD抗體Anti-EPHB3 Antibody胰島樣生長因子結合蛋白4(IGFBP4)
擬無枝菌菌磷化RNA聚合II CTD抗體Anti-EPHX2 Antibody胰島樣生長因子結合蛋白3(IGFBP3)
產黃青霉血管生成核糖核4抗體(肌性側索硬化癥蛋白)Anti-EPHB3 Antibody胰島樣生長因子結合蛋白1(IGFBP1)
費氏中華根瘤菌核糖體蛋白L19抗體Anti-EPO Antibody胰島樣生長因子2受體(IGF2R)
聚多曲霉Ras樣蛋白家族10A抗體Anti-EPO Antibody胰島樣生長因子2-mRNA結合蛋白3(IGF2BP3)
維氏氣單胞菌Ras相關區域家族蛋白4抗體Anti-EPO Antibody胰島樣生長因子2(IGF2)
塔賓曲霉RNA尿苷合結構域蛋白2抗體Anti-EPO Antibody胰島樣生長因子1受體(IGF1R)
發酵性酵母環指蛋白14抗體Anti-EPOR Antibody胰島樣生長因子1(IGF1)
淺綠黃鏈霉菌呤核苷交換因子抗體Anti-EPOR Antibody胰島樣蛋白5(INSL5)
紅緣擬層孔菌核糖體結合因子RBFA抗體Anti-EPOR Antibody胰島樣蛋白3(INSL3)
煙曲霉環指蛋白166抗體Anti-Epsilon-sarcoglycan(SGCE) Antibody胰島受體(ISR)
煙色離褶傘視網膜色變性蛋白1抗體Anti-EPS15 AntibodyX3(TRYX3)
福氏志賀氏菌Shigella│flexneri 質量規格:0.985
大腸埃希氏菌DH5a/pET20b/PasecAEscherichia│coli 質量規格:0.98
嗜鹽潮間帶桿菌Aestuariibacter│halophilus 質量規格:98%,BR
AKT抑制劑(Deguelin)陰溝腸桿陰溝亞種 Fraser培養基乳清蛋白Elisa
麥根腐平臍蠕孢 Half–Fraser培養基乳固形物Elisa
Lonsdalea quercina subsp. iberica PALCAM瓊脂脂聯Elisa
假乙熱厭氧桿狀 緩沖李氏增肉湯基礎鏈球抗體Elisa
死亡谷芽孢桿 霉和酵母顯色培養基肌肽Elisa
枯草芽孢桿 金黃色葡萄球顯色培養基β-羥基丁酸Elisa
小紅酵母 李斯特氏顯色培養基羧肽BElisa
紅皮堿線 沙門氏顯色培養基弓形蟲IgG抗體Elisa
腐皮殼 O157顯色培養基CXC趨化因子配體14Elisa
團炭角 細總數顯色培養基偽狂犬病Elisa
球孢白僵 TBX培養基主要急性期蛋白Elisa
地衣形芽孢桿 大腸桿/大腸群顯色培養基流感病Elisa
根癌土壤桿 大腸群顯色培養基輪狀病Elisa
芽孢桿 大腸桿顯色培養基T亞群分選熒光抗體Elisa
解藻酸弧 SD-39瓊脂犬尿氨酸Elisa