詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Rigosertib sodium | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
Rigosertib sodium是一種PLK1的ATP非競爭型抑制劑,IC50值為9nM,選擇性是對PLK2的30多倍。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:592542-60-4 別名:ON-01910 sodium 純度:99.09% 分子量:473.47 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
黃曲霉*絲/蘇蛋白激NEK8抗體Human LTB4R(Leukotriene B4 receptor 1) ELISA Kit人抗BP180抗體(anti-BP180-Ab)
*灰葡萄孢核孔蛋白Nup37抗體Human AGRP(Agouti-related protein) ELISA Kit人抗BB抗體(BB-Ab)
漫游孢囊菌屬核結構蛋白5抗體Human GHSR(Growth hormone secretagogue receptor type 1) ELISA Kit軍團菌抗原(LP Ag)
枯草芽孢桿菌 B核苷結合蛋白1抗體Human PPY(Pancreatic prohormone) ELISA Kit軍團菌抗體IgM(LP Ab-IgM)
稻麥穗孢霉核苷結合蛋白2抗體Human SERPINA3(Alpha-1-antichymotrypsin) ELISA Kit軍團菌抗體IgG(LP Ab-IgG)
無花果曲霉乙酰基轉移10抗體Human APOE(Apolipoprotein E) ELISA Kit軍團菌抗體IgA(LP Ab-IgA)
芹側耳(杏鮑菇)絲/蘇蛋白激Nek7抗體Human AGT(Angiotensinogen) ELISA Kit卷曲蛋白8(FZD8)
傳染性法氏囊病病神經正五聚體1抗體Human CTNNβ1(Catenin beta-1) ELISA Kit聚集蛋白(Agrin)
金太陽杏葉細菌性穿孔病煙酰核苷轉氫抗體Human SERPINA3(Alpha-1-antichymotrypsin) ELISA Kit巨噬移動因子(MIF)
青灰紅菇利鈉肽受體B抗體Human AGT(Angiotensinogen) ELISA Kit巨噬移動抑制因子(MIF)
金黃殼囊孢菌利鈉肽受體C抗體Human CTNNβ1(Catenin beta-1) ELISA Kit巨噬炎性蛋白5(MIP-5)
大腸埃希氏菌磷化谷受體2B抗體Human APOE(Apolipoprotein E) ELISA Kit巨噬炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)
木糖葡萄球菌磷化谷受體2B抗體Human HIF1A(Hypoxia-inducible factor 1-alpha) ELISA Kit巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)
木霉NADPH氧化2抗體Human MAP2K5(Dual specificity mitogen-activated protein kinase kinase 5) ELISA Kit巨噬炎性蛋白2(MIP-2)
構巢曲霉NADPH氧化活化蛋白1抗體Human IAPP(Islet amyloid polypeptide) ELISA Kit巨噬炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)
孢小克銀漢霉輪生變種磷化核因子抗體Human NOS3/eNOS(Nitric oxide synthase, endothelial) ELISA Kit巨噬炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)
綠色木霉=木木霉Trichoderma│viride 質量規格:BR,RZ>2.5,活性>250U/mg槲皮苷
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質量規格:≥500IU/mg,BR,牛源提取槲皮
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質量規格:≥3TIU/mg,進分,來源: 牛肺或牛胰花旗松;二氫槲皮
PLK1抑制劑(Rigosertib sodium)根瘤 非必須氨基酸γ酪蛋白Elisa
乳桿屬 α-MEM液體培養基胎兒彎曲抗原Elisa
松口蘑 二酐關節炎腦炎病Elisa
島青霉 PBS緩沖液總蛋白Elisa
宛氏擬青霉 1-氨基海因鹽酸鹽球蛋白Elisa
潘諾尼亞鎖霉 M199液體培養基葡萄糖Elisa
卵形巴貝斯蟲(盧氏株) DMEM高糖[含酮酸鈉]尿氮Elisa
枯草芽孢桿 2,3,4-三氟游離脂肪酸Elisa
產腸大腸埃希氏 IMDM液體培養基白介22Elisa
金黃色葡萄球 F12液體培養基白介23Elisa
產氣莢膜梭 A型 MEM液體培養基活性氧Elisa
葛氏沙雷氏 噻吩-2-羧酸乙酯谷草轉氨Elisa
熒光威克酵母 DMEM低糖液體培養基巴氏桿抗體Elisa
層出鐮孢 葉縮魏氏梭抗體Elisa
宇佐美曲霉 DMEM低糖液體培養基銅藍蛋白Elisa