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詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Hoechst33258 Staining Solution(1mg/ml) | 1ml|5×1ml | 1～3天 |
商品介紹：
用途： 細胞凋亡檢測、普通細胞核染色、常規的DNA染色。 注意事項： Hoechst33258染色中leagene公司推薦采用該試劑。Hoechst33258是一種熒光染料，可以穿透細胞膜的藍色熒光染料，對細胞的毒性較低。染色染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。可直接用于固定細胞或組織的細胞核染色，也可直接用于活細胞或組織的細胞核染色。 儲存條件：-20℃，避光，12個月 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
沒藥（膠質沒藥）（標準品）英文名稱： Indole高爾基體外周膜蛋白1抗體包裝50mg
沒藥（天然沒藥）（標準品）英文名稱： Ethyl octanoate高爾基體膜蛋白抗體包裝100mg
玫瑰花（標準品）英文名稱： 2-Ethyl-1-hexanol高爾基體磷蛋白6抗體包裝100mg
玫瑰花總黃英文名稱： Ethyl palmitate高爾基SNAP受體復合物1抗體包裝25g
蒙花苷(標準品)英文名稱： 2-Ethylhexanoic acid谷草酰乙轉1樣蛋白1抗體包裝5g
迷迭香（標準品）英文名稱： p-AnisaldehydeG蛋白偶聯受體52抗體包裝1g
密蒙花（標準品）英文名稱： Bis(2-ethylhexyl)adipate核膜糖蛋白210抗體包裝5g
蜜環菌粉（標準品）英文名稱： Disperse Blue 35GADD153抗體包裝1g
綿萆薢（標準品）英文名稱： 9-MethylanthraceneG蛋白偶聯受體57抗體包裝10MG
綿大戟（標準品）英文名稱： MCPAGSK-3結合蛋白FRAT2抗體包裝1g
綿馬貫眾（標準品）英文名稱： Methyl oleate磷化內收蛋白gamma抗體包裝250mg
綿馬貫眾ABBA（標準品）英文名稱： Isoeugenol生長因子受體結合適應蛋白抗體包裝100g
綿馬ABA（標準品）英文名稱： NonaneGARNL3蛋白抗體包裝25g
棉花根（標準品）英文名稱： 1-NaphtholTuberin樣蛋白1抗體包裝5g
棉子糖（標準品）英文名稱： N-NitrosodiethylamineX連鎖Charcot-Marie-Tooth變相關蛋白抗體包裝1g
炭疽芽孢桿菌Bacillus│anthracis 質量規格：>99%,BR蘋果脫氫1試劑盒絡塞琳;Rosarin
北方梭囊孔菌Climacocystis│borealis 質量規格：HPLC>98%,標準品平滑肌肌動蛋白試劑盒毛兩面針;toddalolactone
球孢白僵菌Beauveria│bassiana (Bals.-Criv.) Vuill. 質量規格：>98%,BR嘌呤核苷磷化試劑盒磷川芎;Tetramethylpyr
Hoechst33258染色液(1mg/ml)炭黑曲霉 乙酸氯甲酯狀瘤病抗體18型Elisa
海洋桿 N-羥甲基乙酰蓖麻Elisa
大腸埃希氏 1-BOC-3-甲酰肼硬皮病Elisa
瑟氏泰勒蟲(成縣株） 4-溴-2-氟苯乙酮硬皮病Elisa
秦氏蜜環 6-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮抗多發性肌炎硬皮病抗體Elisa
布氏艾美耳球蟲 2,4-二羥基-3-甲載脂蛋白DElisa
黃傘 2-乙Osterix蛋白Elisa
尖孢鐮刀 羥乙酸異酯核轉錄因子Elisa
黑曲霉 甲基2,5-二氯異煙酸酯神經膠質成熟因子βElisa
蠟樣芽孢桿 酸乙酯色氨酸羥化2Elisa
冬蟲夏草 L-谷氨酸-5-叔丁酯-1-甲酯鹽酸鹽彈性蛋白1Elisa
灰色困難鏈霉 1-己基吡啶三氟甲磺酸鹽乙脫氫Elisa
弗雷德里克斯堡假單胞 2,6-二甲氧基吡啶牙本質涎磷蛋白Elisa
黑化鏈霉 環酰鱗狀癌相關抗原Elisa
釀酒酵母 2-正辛基-1-十二磷酸甘油酸脫氫Elisa
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