商品介紹:
MS049是一個(gè)強(qiáng)的,有選擇性的,有細(xì)胞活性的PRMT4和PRMT6雙重抑制劑,IC50分別是34nM和43nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1502816-23-0 純度:98.0% 分子量:248.36 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:PRMT4和PRMT6雙重抑制劑(MS049)
英文名稱:MS049
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
鴨星狀病亮抑肽Anti-ADGRG5 Antibody胞外5'-核苷(NT5E)
弗里克塞爾湖黃桿菌促胃泌釋放肽(抗原)Anti-ADGRF5 Antibody胞裂蛋白9(SEPT9)
產(chǎn)黃纖維單胞菌牛血清白蛋白(標(biāo)準(zhǔn))Anti-ADGRG1 Antibody胞裂蛋白8(SEPT8)
果蔬汁 op'-DDT、六六六髓鞘堿性蛋白(多肽)大鼠Anti-ADGRG5 Antibody胞裂蛋白7(SEPT7)
紫色紅曲菌血管活性腸肽Anti-ADGRG6 Antibody胞裂蛋白6(SEPT6)
尖孢鐮刀菌神經(jīng)節(jié)肽Anti-ADGRL2 Antibody胞裂蛋白5(SEPT5)
黃硬皮馬勃胰高血糖樣肽-2蛋白Anti-ADGRL1 Antibody胞裂蛋白4(SEPT4)
腸膜明串珠菌活性依賴的神經(jīng)保護(hù)肽(抗原)Anti-ADGRL4 Antibody胞裂蛋白3(SEPT3)
Corallococcus sp.α-1抗胰糜蛋白Anti-ADI1 Antibody胞裂蛋白2(SEPT2)
畢赤酵母胰糜蛋白Anti-ADPGK Antibody胞裂蛋白14(SEPT14)
呂氏泰勒蟲(chóng)(渭源株)促腎上腺皮質(zhì)激(18-39)(抗原)Anti-ADNP Antibody胞裂蛋白13(SEPT13)
孟氏假單胞菌腦腸肽(一種新的生長(zhǎng)激釋放肽)多肽抗原Anti-ADM Antibody胞裂蛋白12(SEPT12)
默氏利斯特氏菌胃泌/蛙皮(多肽人源)Anti-ADRA1D Antibody胞裂蛋白11(SEPT11)
枯草芽孢桿菌外周髓鞘蛋白0(P0蛋白)多肽抗原Anti-ADRA2C Antibody胞裂蛋白10(SEPT10)
釀酒酵母牛胰島蛋白Anti-ADRA2B Antibody胞裂蛋白1(SEPT1)
匍匐曲霉蛋白激活受體-2激活肽Anti-AF4 Antibody胞漿磷蛋白4(STMN4)
PEST含核蛋白抗體昆明鏈霉菌大鼠腎足突基底膜組織提取物
絲/蘇蛋白激18珊瑚鏈霉菌大鼠腎組織提取物
PELO蛋白抗體抗輻射鏈霉菌大鼠腎動(dòng)脈組織提取物
缺陷性分配同源物β抗體登佐鏈霉菌大鼠前列腺組織提取物
PRMT4和PRMT6雙重抑制劑(MS049)彎曲芽孢桿 ent-3β-Tigloyloxykaur-16-en-19-o
佛羅里達(dá)側(cè)耳 ent-3β-Hydroxykaur-16-en-19-oic
節(jié)桿 Derrisisoflavone B
暗擬莖點(diǎn)霉 Denudadione C
細(xì)鏈格孢 Dammarenediol II 3-O-caffeate
糞腸球 酰 F
泡盛曲霉 Buergerinin B
橘青霉 Broussonin C
釀酒酵母 Alstoyunine E
平菇 Aglinin A
大腸埃希氏 Aglain C
耐鹽擬諾卡氏 8α-Hydroxylabda-13(16),14-dien -
米曲霉 8,3'-Diprenylapigenin
季也蒙邁耶氏酵母 Mirandin B
芽孢桿 Fragransin A2