詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
20ml|50ml | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
用途: 觀察細菌莢膜 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
色英文名稱: Manganese (II) phosphate monobasic tetrahydrate磷化PDZ連接激/T-LAK源蛋白激抗體包裝5g
沙利度(反應停)英文名稱: Melezitose monohydrate磷化3磷肌依賴性蛋白激1包裝10g
英文名稱: Mepiquat chloride星形膠質PEA15抗體包裝1g
舒林英文名稱: Metaphosphoric acid轉錄因子RPF1抗體包裝500mg
舒洛芬英文名稱: Methyl cinnamate蛋白磷2A抑制劑1抗體包裝100g
雙芬英文名稱: Methyl dihydrojasmonate橋粒相關蛋白DRS抗體包裝25g
雙芬鈉英文名稱: Methyl indole-4-carboxylate抑癌蛋白DLP1抗體包裝5g
雙楊酯;楊-2-羧基酯英文名稱: Methylene green zinc chloride double salt蛋白激C delta結合蛋白抗體包裝1g
順磺阿曲庫銨英文名稱: Methylene violet 3RAX鴨型肝炎病聚蛋白抗體包裝1mg
蘇拉明鈉英文名稱: Methylsuccinic acid前列腺E2抗體包裝1g
索非那新琥珀鹽英文名稱: MH, maleic hydrazide多效生長因子抗體包裝5g
他扎羅汀英文名稱: Molybdenium powder轉錄調節因子MAZR抗體包裝100g
碳司維拉姆英文名稱: Molybdenium(IV) sulfide凋亡相關蛋白6抗體包裝25g
特非那定英文名稱: NAA-Na, 1-naphthaleneacetic acid sodium saltPSD95相關緊密連接蛋白PATJ抗體包裝100g
特立英文名稱: N-Acetyl-DL-valine血小板源性生長因子AA+BB抗體包裝25g
柿尾孢菌Cercospora│kaki Ellis & Everh. 質量規格:>99%,BR核糖核試劑盒D-阿拉伯糖;Adonito
淺黃金色單胞菌Chryseomonas│luteola 質量規格:>98%,BR核仁纖維蛋白抗體試劑盒艾黃;Artemisetin
嗜熱地芽孢桿菌Geobacillus│kaustophilus 質量規格:HPLC≥98%,標準品核基質蛋白22試劑盒β-桉葉;β-Eudesmol
莢膜染色液(墨汁法)大腸埃希氏 5-氨基-1H-1,2,4-三氮唑-3-羧酸甲酯幾丁質3樣蛋白1Elisa
琉球曲霉 2,2,3,4,4,4-六氟丁基 甲基烯酸鹽微管相關蛋白輕鏈3IElisa
近綠曲霉 2-氟煙瓜氨酸組蛋白H3Elisa
綠垂曲霉 2,4-二-6-甲氧基-1,3,5-三Ⅳ型肽精氨酸脫亞氨基Elisa
球毛殼 2--6-氟苯ATP合成Elisa
直絲淡藍褐鏈霉 N-甲基庚Lys63特異性去泛化BRCC36Elisa
大腸埃希氏 聚[4-二乙酰氧基基苯乙烯]脂磷壁酸Elisa
單孢蟲道酵母 3-溴-4-基補體蛋白1Elisa
橘色硬皮馬勃 N,N-二乙基-2,2,2-三氟乙酰補體蛋白5Elisa
蛛網不顯枝霉中華變種 2.6-二甲基-4-甲氧基苯酸補體蛋白2Elisa
需土節桿 2,5-二-3-噻吩甲酸補體蛋白5b-9Elisa
葡萄球屬 1-癸基-3-甲基咪唑六氟磷酸鹽色氨酸Elisa
草假單胞 2,5-二苯并惡唑內皮特異性分子Elisa
豌豆根瘤 2,6-二苯并噁唑羥賴氨酸吡啶啉Elisa
沙漠奇異球 8-溴-7-甲氧基喹啉基質金屬蛋白12Elisa