詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
MHY1485 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
英文名稱:MHY1485 產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg MHY1485是一種mTOR激活劑,也是一種自噬(autophagy)抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:326914-06-1 純度:99.40% 分子量:387.39 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
假單胞菌EHM2蛋白抗體Human HIVEP2 (Transcription factor HIVEP2) ELISA KIT犬胰島原(PI)免疫試劑盒
雅致小克銀漢霉磷化真核翻譯起始因子4E抗體Human HCK (Tyrosine-protein kinase HCK) ELISA KIT犬胰島樣因子3(INSL3)免疫試劑盒
假單胞菌屬翻譯延伸因子EF-1a抗體Human HEPACAM2 (HEPACAM family member 2) ELISA KIT犬胰島樣生長因子結合蛋白3(IGFBP3)免疫試劑盒
殼二胞屬磷化雌激受體α抗體Human CIRBP(Cold-inducible RNA-binding protein) ELISA Kit犬胰島樣生長因子II(IGF2)免疫試劑盒
球孢白僵菌磷化表皮生長因子受體抗體Human HAVCR2 (Hepatitis A virus cellular receptor 2) ELISA KIT犬胰島樣生長因子1(IGF1)免疫試劑盒
蒼白桿菌磷化絲裂原活化蛋白激1抗體Human HGSNAT (Heparan-alpha-glucosaminide N-acetyltransferase) ELISA KIT犬胰島受體β(ISR-β)免疫試劑盒
異常漢遜酵母磷化絲裂原活化蛋白激1/2抗體Human HYPK (Huntingtin-interacting protein K) ELISA KIT犬胰島(INS)免疫試劑盒
猴頭酪蛋白激受體B4抗體Human HIVEP2 (Transcription factor HIVEP2) ELISA KIT犬原激活肽(TAP)免疫試劑盒
亮白曲霉酪蛋白激A5受體抗體Human HEMK1 (HemK methyltransferase family member 1) ELISA KIT犬原-1 免疫試劑盒
孢絲蓋傘上皮鈉離子通道蛋白γ/γENaC抗體Human HCK (Tyrosine-protein kinase HCK) ELISA KIT犬(trypsin)免疫試劑盒
橄欖色鏈霉菌癌基因ETS2抗體Human CIRBP(Cold-inducible RNA-binding protein) ELISA Kit犬一氧化氮(NO)免疫試劑盒
側耳內皮3抗體Human HYPK (Huntingtin-interacting protein K) ELISA KIT犬葉(FA)免疫試劑盒
華麗側耳(佛羅里達側耳)磷化外信號調節激5抗體Human HEPACAM2 (HEPACAM family member 2) ELISA KIT犬血纖蛋白原降解產物(FDP)免疫試劑盒
滑菇磷化外信號調節激5抗體Human HGSNAT (Heparan-alpha-glucosaminide N-acetyltransferase) ELISA KIT犬血纖蛋白原(Fbg)免疫試劑盒
野梧桐歐文氏菌外信號調節激4抗體Human HAVCR2 (Hepatitis A virus cellular receptor 2) ELISA KIT犬血栓B2(TXB2)免疫試劑盒
松口蘑腸出血性大腸桿菌埃希氏菌O157:H7抗體Human HNRNPM (Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein M) ELISA KIT犬血栓前體蛋白(TpP)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規格:分析標準品,99%L-半胱
: A410資源名稱: 天門冬紫鏈霉菌 質量規格:分析標準品,99.5%維生A
: K86/39資源名稱: 新不倫瑞克沙門氏菌 質量規格:分析標準品,97%羊藿次苷I
mTOR激活劑(自噬抑制劑)嗜中溫寒冷桿 2-頻哪酯孕酮Elisa
解脂亞羅酵母 雙(亞乙基二氨)化鉑(II)中性粒明膠相關脂質運載蛋白Elisa
Mucor ardhlaengiktus 2'-甲氧基胞苷腫瘤壞死因子αElisa
寬被多年臥孔 2'-O-甲基鳥苷主要組織相容性復合體I類Elisa
白鬼筆 4-溴-3-苯轉甲狀腺蛋白Elisa
釀酒酵母 (3aR,8aR)-(-)-(2,2-Dimethyl-4,4,8,8-tetraphenyl-te甘油三脂Elisa
葡萄牙棒孢酵母 4-甲硫基苯Ⅰ型膠原N末端肽Elisa
需鈉弧 2-二環己膦基-2'-(N,N-二)-聯苯前蛋白轉化枯草溶9Elisa
斑玉蕈 5-乙?;?2-甲氧基吡啶埃博拉抗體Elisa
根瘤 乙酰乙酸基烯酸乙酯中性內肽;腦啡肽Elisa
假單胞屬 Ramage 鏈接劑血管緊張ⅡElisa
巨大芽胞桿 2,3,5-三苯酸固酮Elisa
嗜松青霉 2-氨基-5-氟-3-硝基吡啶環磷酸鳥苷Elisa
釀酒酵母 4-氨基-3-腎Elisa
黑曲霉 3-苯并[b]噻吩-2-甲酸結核桿抗原Elisa