詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Oltipraz | 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
Oltipraz抑制HIF-1α激活,這種作用具時間依賴性,濃度≥10μM時*廢除HIF-1α誘導,Oltipraz抑制HIF-1α,IC50為10μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:64224-21-1 別名:RP 35972;NSC 347901 純度:99.15% 分子量:226.34 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
釀酒酵母羅丹明標記的驢抗豚鼠IgGAnti-ACSS1 Antibody補體成分3a受體1(C3aR1)
榛色青霉羅丹明標記的鼠抗人IgG單克抗體Anti-ACTBL2 Antibody補體成分3(C3)
絲蘭輪紋斑菌膠體金標記的鼠抗人IgG單克抗體Anti-ACTBL2 Antibody補體成分2(C2)
塊鱗灰傘FITC標記的鼠抗人IgG單克抗體Anti-ACTG2 Antibody補體成分1s(C1s)
金黃色葡萄球菌堿性磷(AP)標記的鼠抗人IgG單克抗體Anti-ACTC1 Antibody補體成分1r(C1r)
*灰葡萄孢PE-Cy3標記的鼠抗人IgG單克抗體Anti-ACVR1C Antibody補體成分1q子成分樣蛋白1(C1qL1)
產單核李氏桿菌PE-CY5標記的鼠抗人IgG單克抗體Anti-ACTIN Antibody補體成分1q子成分C(C1qC)
產氣莢膜梭菌 E型APC標記的鼠抗人IgG單克抗體Anti-ACVRL1 Antibody補體成分1q子成分A(C1qA)
多產色鏈霉菌Alexa Fluor 350標記的鼠抗人IgG單克抗體Anti-ADAM10 Antibody補體C5轉化(C5c)
雙孢蘑菇(白蘑菇、洋蘑菇)Alexa Fluor 488標記的鼠抗人IgG單克抗體Anti-ADAMTS18 Antibody補體C3轉化(C3c)
新月彎孢Alexa Fluor 555標記的鼠抗人IgG單克抗體Anti-ADAM32 Antibody補體3a(C3a)
博斯氏菌屬Alexa Fluor 647標記的鼠抗人IgG單克抗體Anti-ADAMTS19 Antibody補體1抑制因子(C1INH)
茶藨子葡萄座腔菌PE-Cy5.5標記的鼠抗人IgG單克抗體Anti-ADAR1 Antibody博來霉水解(BLMH)
擬可可毛球二孢PE-Cy7標記的鼠抗人IgG單克抗體Anti-ADARB1 Antibody玻璃體蛋白(VIT)
嗜糖土地芽孢桿菌Cy5.5標記的鼠抗人IgG單克抗體Anti-ADCK1 Antibody脫氫磷(PDP)
乳桿菌屬Cy7標記的鼠抗人IgG單克抗體Anti-ADCY1 Antibody脫氫激同工4(PDK4)
腸道71型/手足口病抗體巴氏葡萄球菌大鼠小腦組織提取物
多形性腺瘤基因樣蛋白2抗體海濱芽孢桿菌大鼠腦膜組織提取物
Pantophysin抗體類芽孢桿菌大鼠腦動脈血管組織提取物
橋粒斑菲蛋白1抗體肉葡萄球菌大鼠甲狀腺組織提取物
HIF-1α抑制劑(Oltipraz)壺黑蛋巢布諾德變型 14β-Benzoyloxy-2-deacetylbaccati
金針菇 10-Hydroxyneoline
變異鏈球 10-Hydroxy-16-epiaffinine
產堿假單胞 1,7-二表-8,15-柏木烷二
褐犁頭霉 Koumine N-oxide
側孢短芽孢桿 6α,16,18-Trihydroxycleroda -3,13
人參土尼阿巴 2',4',5'-Trimethoxy-2'',2''- dim
蘋果黑腐皮殼 α-Epoxydihydroartemisinic acid
圈卷產色鏈霉 Yucalexin P-17
魯考弗美奇酵母 細葉桉萜酯 A
殺蟲貪銅 銀線草 C
釀酒酵母 Sambutoxin
節桿 Pterokaurene L3
解淀粉周培瑾氏 Pelirine
釀酒酵母 Ophiopogonanone C