商品介紹:
英文名稱:BI-D1870 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg BI-D1870是一種特異性強(qiáng),ATP競爭性RSK抑制劑,抑制RSK1、RSK2、RSK3、RSK4的活性,IC50值分別為31nM、24nM、18nM、15nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:501437-28-1 純度:99.21% 分子式:C??H??F?N?O? 分子量:391.42 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:RSK抑制劑(BI-D1870)
英文名稱:BI-D1870
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
Enterobacter cowanii Inoue et al. 磷化HOMER3蛋白抗體Human ST6GALNAC1 ELISA Kit大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)免疫試劑盒
克魯弗酵母轉(zhuǎn)化蛋白p21抗體(原癌基因H-ras抗體)Human ST7 ELISA Kit大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)免疫試劑盒
熱帶假絲酵母轉(zhuǎn)錄因子HES-1抗體Human ST6GALNAC5 ELISA Kit大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)免疫試劑盒
蠟狀芽孢桿菌組蛋白H4-K4甲基轉(zhuǎn)移抗體Human ST8SIA1 ELISA Kit大鼠肺癌腫瘤抑制因子1(TSLC1)免疫試劑盒
短密青霉HOMER3蛋白抗體Human ST7L ELISA Kit大鼠肥胖抑制免疫試劑盒
黃曲霉磷化HER3受體抗體Human ST8SIA2 ELISA Kit大鼠肥大類胰凝乳蛋白免疫試劑盒
香氣紅冬孢鎖擲孢酵母磷化HER4抗體Human ST8SIA3 ELISA Kit大鼠肥大類(MCT)免疫試劑盒
谷棒桿菌Ⅰ型磷化HER4抗體Human SSX4 ELISA Kit大鼠防御5 免疫試劑盒
鵝膏菌屬羥類固脫氫17β3抗體Human UBE2I(SUMO-conjugating enzyme UBC9) ELISA Kit大鼠芳烴受體核轉(zhuǎn)位因子樣蛋白1(ARNTL)免疫試劑盒
丁香輪絲鏈輪絲菌羥基類固脫氫11β1抗體Human STAC ELISA Kit大鼠泛連接(E3/UBPL)免疫試劑盒
土壤小單胞菌滋養(yǎng)層抗原3β-HSD抗體Human SSX5 ELISA Kit大鼠泛結(jié)合UBC5 免疫試劑盒
黑木耳乙酰化組蛋白H4抗體Human SSX2IP ELISA Kit大鼠泛結(jié)合(E2/UBCE)免疫試劑盒
*喜溫硫桿菌磷化高遷移率核小體結(jié)合蛋白1Human SRR ELISA Kit大鼠泛激活(E1/UBAE)免疫試劑盒
菌核鏈霉菌附睪分泌蛋白4抗體Human SRPX2 ELISA Kit大鼠泛蛋白(Ub)免疫試劑盒
腐爛粘束梗霉基化組蛋白H3抗體Human SRRM1 ELISA Kit大鼠法尼X受體(FXR)免疫試劑盒
棒曲霉三羥基基還原抗體Human C1QTNF3(Complement C1q tumor necrosis factor-related protein 3) ELISA Kit大鼠二酰基甘油(DAG/DG)免疫試劑盒
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99.5%(GC)10-姜酚
日本慢生根瘤菌Bradyrhizobium│japonicum 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(GC)8-姜酚
多殺性巴氏桿菌Pasteurella│multocida 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品7-羥基
RSK抑制劑(BI-D1870)釀酒酵母 硫化銨溶液肌紅蛋白Elisa
蘇云金芽孢桿莫里遜亞種 乙基香蘭鼻疽伯克霍德抗體Elisa
赤紅球 (聚酰亞-桂酰基)化鈀(II)二聚體5羥色Elisa
Pseudohaliea rubra 錫酸 三水合物活性氧Elisa
尤韋可擬盤多毛孢 2,3-二氟苯酸抗內(nèi)皮抗體Elisa
廈門假單胞 4-溴-3-氟日本腦炎病Elisa
褐球固氮(可訂購) (1,5-環(huán)辛二烯)二化鈀(II)傳染性炎Elisa
美味側(cè)耳(紫孢側(cè)耳) 4-氨基噻吩-2,3-二羧酸二甲酯鹽酸鹽鼻肺炎Elisa
大腸埃希氏 2-甲基-5-磺酰副傷寒沙門氏Elisa
Marella suaedae 二茂鐵甲EB病Elisa
玫瑰小雙孢 (1S,4S,5S)-4,7,7-基-6-硫代二環(huán)[3.2.4]辛烷痢疾阿米巴Elisa
釀酒酵母 3-(4-tert-Butylbenzene)propionic Acid2,3-雙加氧1Elisa
金黃回旋鏈霉 乙酰酮酰雙(亞乙基)化銠(I)新喋呤Elisa
熱紫鏈霉不滲透亞種 二(乙烯基)銠(I)二聚體肌鈣蛋白TElisa
核桃殼囊孢 (1,5-環(huán)辛二烯)二化鉑(II)狂犬病Elisa