詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
HBX 19818 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
HBX19818是USP7抑制劑,IC50為28.1uM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1426944-49-1 純度:96.84% 分子量:421.96 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
紅色蠟蘑一種腫瘤抑制基因抗體(N端)Anti-CASP8(P10) AntibodyN端中段骨鈣(N-MID-OT)
香港洛克氏菌腺苷單磷活化蛋白激α1/AMPK α 1抗體Anti-CASP8 AntibodyN端外顯肽(Ext-N)
白僵菌維生K依賴的蛋白C重鏈抗體Anti-CASP8(P18) AntibodyN端前腦鈉(NT-proBNP)
長蠕孢菌神經叢蛋白A1抗體Anti-CASP8 AntibodyNOGO-A抗體(Nogo-A Ab)
p21激活激4抗體Anti-CASP9(small)(p10) AntibodyNOD樣受體(NLR)
Aquimonas磷化p21激活激4/5/6抗體Anti-CASP8(P18) AntibodyNADPH氧化3(NOX3/MOX2)
Microbacterium marinilacus磷化p21激活激1/2抗體Anti-CASP9(p35) AntibodyNADPH氧化1(NOX1/MOX1/NOH1)
變異鏈霉菌磷化p21激活激1/2抗體Anti-Caspase-1(P20)/CASP1 AntibodyNa+/H+交換體3(NHE3)
干草鞘單胞菌磷化p21激活激2抗體Anti-CASP9(large) AntibodyN(ε)羧乙基賴(CEL)
蠟狀芽孢桿菌磷酯Cγ2抗體Anti-Caspase-9 p35/Casp9 AntibodyMYC誘導核抗原(MINA)
枯草芽胞桿菌磷化血小板源性生長因子受體-α抗體Anti-CAST AntibodyMAX二聚化蛋白1(mxd1)
產堿普羅威登斯菌磷化血小板源性生長因子受體-α抗體Anti-CAT AntibodyMAP磷雙特異性磷1(DUSP-1)
假單胞菌P73腫瘤抑制基因抗體Anti-CAV1 AntibodyM2腎激(M2-PK)
鹽假單胞菌表觀抑制因子Polycomb家族成員PCGFl蛋白抗體Anti-CASR Antibody(PB0970)L選擇(L-Selectin/CD62L)
蘇云金芽孢桿菌擬步行甲亞種G蛋白偶聯嘌呤受體p2y10抗體Anti-CAV2 AntibodyL-乳脫氫(L-LDH)
哈茨木霉腺苷環化激活肽-27/38抗體Anti-CAV2 Antibody(PB0108)L-解(PAL)
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質量規格:>98%,BR
非O1群霍亂弧菌Vibrio│cholerae non-O1 質量規格:>98%,BR
堅強芽孢桿菌Bacillus│firmus Bredemann and Werner 質量規格:>98%,BR
USP7抑制劑(HBX 19818)鼎湖鱗傘(只能確定到屬) 麥康凱瓊脂2號色P45027B1Elisa
謝瓦曲霉 纖維剛果紅培養基可溶性血管內皮生長因子受體1Elisa
鴨瘟病抗血清 姜氏培養基(不含瓊脂)可溶性FMS樣酪氨酸激1Elisa
草酸青霉 姜氏瓊脂培養基游離甲狀腺Elisa
玫瑰產色鏈霉 解磷細培養基(有機磷細培養基)游離狀腺原氨酸Elisa
光帽鱗傘 固氮根瘤培養基可溶性CD44變體9Elisa
水稻節桿 聯合固氮培養基Periostin蛋白Elisa
木霉 固氮用阿須貝氏培養基X-框結合蛋白1Elisa
黃色雙孢放線 無機磷細培養基肌依賴1αElisa
節桿 去氧膽酸鹽枸櫞酸鹽乳糖蔗糖瓊脂總膽汁酸Elisa
墳墓節桿 Honda氏產肉湯尿酸Elisa
樟疫霉 明膠蛋白胨肌酐Elisa
貴州青霉 玉米浸粉尿氮Elisa
芥黃蜜環 MPC瓊脂培養基白介23Elisa
耐酪酸冢村 接觸皿培養基白介22Elisa